1.葡萄籽提取物(葡萄籽低聚原花青素)国际商务标准

国际商务标准SW/T1—2015SW中国医药保健品进出口商会发布2015-11-20发布2015-12-1实施植物提取物葡萄籽提取物（葡萄籽低聚原花青素）GrapeseedsoligomericproanthocyanidinsSW1—20151前言本标准由中国医药保健品进出口商会提出。本标准由中华人民共和国商务部归口。本标准由中国医药保健品进出口商会国际商务标准化技术委员会负责解释。本标准起草单位：天津市尖峰天然产物研究开发有限公司、浙江天草生物科技股份有限公司、重庆骄王天然产物股份有限公司。本标准主要起草人：吴巍、邢新锋、翟巧丽、谢国华、高伟、黄华学等SW1—20152国际商务标准植物提取物葡萄籽提取物（葡萄籽低聚原花青素）1范围本标准规定了葡萄籽提取物（葡萄籽低聚原花青素）的技术要求、检验方法、检验规则和产品标志、包装、运输、贮存要求。本标准适用于以葡萄籽为原料经提取分离制成的葡萄籽提取物（葡萄籽低聚原花青素）。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数GB4789.38食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数GB9685食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准中华人民共和国药典（2010年版）一部附录IXH水分测定法第一法中华人民共和国药典（2010年版）一部附录IXK灰分测定法中华人民共和国药典（2010年版）一部附录IXE重金属检查法中华人民共和国药典（2010年版）二部附录VIIIP残留溶剂测定法保健食品检验与评价技术规范（2003年版）3名称、结构式、分子式和相对分子质量葡萄籽提取物（葡萄籽低聚原花青素）由一系列有效成分组成，其名称、结构式、分子式、相对分子质量见表1。表1葡萄籽提取物（葡萄籽低聚原花青素）组分名称、结构式、分子式及相对分子质量组分名称结构式分子式相对分子质量没食子酸（Gallicacid）C7H6O5170.12原花青素B1（ProcyanidinB1）C30H26O12578.52SW1—20153(+)-儿茶素（(+)-Catechin）C15H14O6290.27原花青素B2（ProcyanidinB2）C30H26O12578.52(−)-表儿茶素((−)-Epicatechin)C15H14O6290.27(−)-表儿茶素3-O-没食子酸酯((−)-Epicatechin-3-O-gallate)C22H18O10442.37低聚原花青素(Oligomericproanthocyanidins;n=0-3)C15nH14n-2(n+1)O6nn=0-3290.27n-2(n+1)n=0-34技术要求4.1工艺要求4.1.1植物原料为葡萄科葡萄属植物葡萄(VitisviniferaL.(Fam.Vitaceae)）的种子。4.1.2工艺过程用水或乙醇和水一定比例混合溶液提取，浓缩，稀释，沉淀，经大孔吸附树脂吸附、洗脱，洗脱液回收乙醇，干燥，即得。4.2产品要求4.2.1感官要求：应符合表2规定。表2感官要求项目要求检查方法色泽浅棕黄色至棕褐色粉末启开试样后，立即嗅其气和尝其味；另取试样适量置于白色瓷盘中观察其气味气微，味微而苦涩SW1—20154外观均匀，无可见异物的粉末色泽、外观，并检查有无异物4.2.2理化指标：应符合表3规定。表3理化指标项目指标检验方法鉴别应符合规定附录A中A.3水分，%≤6.0中华人民共和国药典2010版一部附录IXH灰分，%≤2.0中华人民共和国药典2010版一部附录IXK儿茶素和表儿茶素，%≤19.0附录A中A.3原花青素值≥95.0附录A中A.1多酚含量，%≥70.0附录A中A.2残留溶剂甲醇，mg/kg≤50中华人民共和国药典2010版二部附录VIIIP乙醇，mg/kg≤1000重金属〔以Pb计〕，mg/kg≤20中华人民共和国药典2010版一部附录IXE4.2.3微生物指标要求：应符合表4的规定表4微生物指标项目指标检验方法细菌总数，cfu/g＜1000GB4789.2霉菌及酵母菌数，cfu/g＜100GB4789.15大肠埃希氏菌不得检出GB4789.38沙门氏菌不得检出GB4789.44.2.4其他污染物其他污染物限量要求，对于出口产品，应符合出口目的国相关法规的规定；对于进口产品，依据不同用途，应符合我国相关法规的规定。5检验方法5.1感官检验：按表2中规定进行检验。启开试样后，立即嗅其气和尝其味；另取试样适量置于白色瓷盘中观察其色泽、外观，并检查有无异物。5.2理化检验5.2.1鉴别按附录A.3规定的检测方法进行测定。供试品溶液液相色谱图中应显示与USP葡萄籽低聚原花青素对照品相应保留时间处一致的色谱峰，其中应体现原花青素二聚体B1的峰，原花青素二聚体B2的峰，(-)-表儿茶素3’-O-没食子酸的峰，还有一个混合低聚原花青素形成的宽峰。SW1—201555.2.2水分按中华人民共和国药典2010版一部附录IXH水分测定法第一法进行测定。5.2.3灰分按中华人民共和国药典2010版一部附录IXK灰分测定法进行测定。5.2.4儿茶素和表儿茶素限量按附录A.3规定的检测方法进行测定。5.2.5原花青素值按附录A.1规定的检测方法进行测定。5.2.6多酚含量按附录A.2规定的检测方法进行测定。5.2.7残留溶剂按中华人民共和国药典2010版二部附录VIIIP残留溶剂测定法进行测定。5.2.8重金属按中华人民共和国药典2010版一部附录IXE重金属检查法进行测定。5.3卫生检验：5.3.1菌落总数按GB4789.2进行测定。5.3.2霉菌和酵母菌按GB4789.15进行测定。5.3.3大肠埃希氏菌按GB4789.38进行测定。5.3.4沙门氏菌按GB4789.4进行测定。6包装、标签、运输、贮存6.1包装包装材料应符合食品卫生要求。使用前应对所有包装材料进行严格的卫生检查。桶装后，应加封封口签。6.2标签6.2.1包装标志上应标注：葡萄籽提取物（葡萄籽低聚原花青素）、批号、规格、净重、毛重、产地、生SW1—20156产日期、保质期、贮存条件等内容。6.2.2外包装箱体上应标有：防潮、防晒、勿重压、朝上（朝下）等字样或标志。标志内容清晰可见，标志应粘贴牢固。6.3运输6.3.1运输工具应清洁、卫生，不得与有毒、有害、有腐蚀性或有异味的物品混装混运。6.3.2搬运时应轻装轻卸，运输时防止挤压、曝晒、雨淋。6.4贮存6.4.1产品不得与有毒、有害、有腐蚀性或有异味的物品混合存放。6.4.2产品应贮存于阴凉、干燥的仓库中。6.5保质期在符合规定的贮运条件、包装完整、未经开启封口的情况下，保质期不超过36个月。SW1—20157附录A（规范性附录）检验方法A.1一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。实验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2原花青素值的测定方法A.2.1方法提要样品经甲醇溶解后，采用紫外-可见分光光度计法测定。A.2.2仪器和用具A.2.2.1分析天平，感量为0.01mg。A.2.2.2紫外-可见分光光度计。A.2.2.3超声波清洗器A.2.2.4顶空瓶和压盖器A.2.3试剂和溶液A.2.3.1甲醇，分析纯。A.2.3.2盐酸，分析纯。A.2.3.3正丁醇（n-BuOH），分析纯。A.2.3.4硫酸铁铵，分析纯。A.2.3.5水。A.2.3.65%盐酸-正丁醇（V/V）溶液：在一个100mL容量瓶中加入大约2/3体积的正丁醇，量取5.0mL盐酸加入，放冷至室温，并用正丁醇定容至刻度，摇匀。溶液可稳定保存一个月。A.2.3.72%硫酸铁铵溶液：精确称取2.0g硫酸铁铵，置100mL容量瓶中，加入2mol/L盐酸溶解，放冷至室温，用2mol/L盐酸定容至刻度，摇匀。溶液可稳定保存6个月。A.2.4操作方法A.2.4.1供试品溶液制备精密称取供试品约10mg，置于100mL棕色容量瓶中，加入80mL甲醇，超声溶解，用甲醇定容至刻度，摇匀，即得供试品溶液。A.2.4.2测定方法A.2.4.2.1精密移取下列溶液至10mL顶空瓶中A.2.4.2.1.11.0mL供试品溶液；A.2.4.2.1.26.0mL5%的盐酸-正丁醇溶液；A.2.4.2.1.30.2mL2%硫酸铁铵溶液；A.2.4.2.2盖上顶空瓶的盖和垫，用压盖器（封口钳）封口，将顶空瓶放于水浴（100±2℃）锅中（瓶中试剂部分应处于水面以下），水浴40分钟，取出，在冷水浴（2～10℃）中迅速冷却20分钟。A.2.4.2.3试剂空白：照上述方法精密移取1mL甲醇，6mL盐酸-正丁醇和0.2mL硫酸铁铵溶液于10mL顶空瓶中，同法制备一个试剂空白。SW1—20158A.2.4.2.4用试剂空白作对照，在546nm处测定供试品溶液的吸光度A1。A.2.5结果计算葡萄籽提取物（葡萄籽低聚原花青素）中原花青素值以w1计，按公式（A.1）计算：275m7200Aw111……………………………………………………(A.1)式中：w1——供试品中原花青素值；A1——供试品溶液在吸收波长546nm下的吸光度；m1——供试品的称样量，单位为毫克（mg）；275——标准原花青素100的检测值；A.3多酚含量的测定方法A.3.1方法提要样品经纯化水溶解后，采用紫外-可见分光光度计法测定，以多点回归曲线法测定多酚的含量。A.3.2仪器和用具A.3.2.1分析天平，感量为0.01mg。A.3.2.2紫外-可见分光光度计。A.3.2.3超声波清洗器。A.3.3试剂和溶液A.3.3.1无水碳酸钠，分析纯。A.3.3.2钨酸钠，分析纯。A.3.3.3钼酸钠，分析纯。A.3.3.4硫酸锂，分析纯。A.3.3.5溴酸钾，分析纯。A.3.3.6溴化钾，分析纯A.3.3.7磷酸，分析纯。A.3.3.8盐酸，分析纯。A.3.3.9水。A.3.3.10碳酸钠溶液：称取20.0克无水碳酸钠，用水溶解于100mL容量瓶中，超声溶解，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀即得。A.3.3.11溴滴定液：取溴酸钾3.0g与溴化钾15克，加水适量使溶解成1000mL，摇匀，即得。A.3.3.12福林酚试液（磷钼钨酸试液）：取钨酸钠100g、钼酸钠25g，加水700mL，85%磷酸50mL与盐酸100mL,置磨口圆底烧瓶中，缓缓加热回流10小时，放冷，再加硫酸锂150g、水50mL和溴滴定液1滴，加热煮沸15分钟，冷却，加水稀释至1000ml,滤过，滤液作为贮备液，置棕色瓶中。本贮备液（应为黄绿色）不得显绿色(如放置后变为绿色，可加溴滴定液1滴，煮沸除去多余的溴即可）。临用前取贮备液2.5mL，加水稀释至10mL，摇匀，即得。A.3.3.12标准品：没食子酸，CAS号149-91-5，纯度≥97.5%。A.3.4操作方法A.3.4.1标准品溶液的制备SW1—20159精密称取没食子酸约10mg，置于100mL棕色容量瓶中，加入水，超声溶解，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀，配成的标准品溶液中没食子酸浓度约为0.1mg/mL。A.3.4.2供试品溶液制备精密称取供试品约20-30mg，置100mL棕色容量瓶中，加入水适量，超声使其完全溶解，冷却至室温，以水定容至刻度，摇匀即得。A.3.4.3测定方法A.3.4.3.1标准曲线测定A.3.4.3.1.1精密吸取标准品溶液0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL分别置于10mL的棕色容量瓶中，各加入3-4mL的水，摇匀；A.3.4.3.1.2加入0.5mL福林酚试液，摇匀；在1-8分钟内，各加入1