儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物.ppt

儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物儿茶酚胺的检测内容包括•去甲肾上腺素NE•肾上腺素E•多巴胺DA儿茶酚胺的代谢产物检测内容•香草扁桃酸VMA•高香草酸HVA儿茶酚胺的合成代谢路线酪氨酸酪氨酸羟化酶多巴胺羟化酶多巴多巴脱羧酶去甲肾上腺素多巴胺苯乙胺-N-甲基转移酶肾上腺素香草扁桃醛香草扁桃酸单胺氧化酶单胺氧化酶儿茶酚胺主要靠神经和激素两种因素调节，神经刺激可以增加儿茶酚胺的合成，糖皮质激素可以诱导苯乙胺甲基转移酶的合成，ACTH也可以促进苯乙胺甲基转移酶的合成，从而增加儿茶酚胺的合成。肾上腺素和去甲肾上腺素是由不同的细胞分泌的，当受到不同的刺激后，可选择分泌不同的儿茶酚胺，情绪兴奋时分泌去甲肾上腺素，情绪低落时分泌肾上腺素，所以是体内非常重要的应激激素。正常人血浆中：肾上激素的浓度约为0.05ng/100ml,去甲肾上腺素的浓度约为0.2ng/100ml,多巴胺的浓度与去甲肾上腺素相当。肾上腺素和去甲肾上腺素经单胺氧化酶脱氨基后生成醛，进一步氧化成香草扁桃酸（VMA），高香草酸（HVA）及少量的N-甲基肾上腺素以及N-乙酰去甲肾上腺素。正常的内源性儿茶酚胺代谢物在尿中的分布：肾上腺素+去甲肾上腺素1.1%变肾上腺素+去甲变肾上腺素7.6%香草扁桃酸91%高香草酸少量由于儿茶酚胺主要从尿中排泄，测定它们及其代谢产物在尿中的含量具有重要的临床意义，可以作为嗜铬细胞瘤，副神经节瘤和成神经细胞瘤的诊断依据，还有助于原发性高血压和嗜铬细胞瘤的鉴别诊断，血浆中儿茶酚胺和它们的前体以及代谢物，对许多疾病的诊断和研究具有重要意义。例如：帕金森病、心脏病、高血压、神经脊瘤、甲亢等。儿茶酚胺类化合物在结构上都有一个氨基连接到带两个相邻羟基的苯环上，这类化合物在体液中的浓度较低，而且儿茶酚胺基团易被氧化，所以在收集样品用于血浆儿茶酚胺测定时必须考虑以下影响因素：1.采样的时间：因为去甲肾上腺素的含量每日随时间不同发生改变2.采样部位：动脉血中的儿茶酚胺较静脉血低3.采样时的体位：立位比卧位时的血浆儿茶酚胺浓度高2-3倍4.吸烟，摄入含咖啡因的食物都会给结果产生影响综合以上影响因素，要使样本符合检测要求，采集血样进行儿茶酚胺测定时有一套公认的操作方案：采样前：病人至少要静坐30min。为了减少儿茶酚胺的损失，样品传递过程要加冰，采样30min以内立即4℃离心，然后置于-8℃冰箱保存采样后：立即离心，分离血浆；儿茶酚胺极易被玻璃吸附，因此样本应贮存于聚丙烯管中；儿茶酚胺又易氧化，故应低温避光保存；血浆儿茶酚胺不加抗氧化剂能在-20℃条件下稳定6周。-80℃条件下1年。测定尿液中的游离儿茶酚胺，必须收集24h尿样，以避免因饮食、饮水、活动而造成的误差，尿液的PH值对儿茶酚胺的稳定性影响较大，即使在PH=3时，儿茶酚胺仍会有部分损失，因此，确保尿液的低PH值是减少降解的关键环节。常用的有盐酸、硫酸，若在收集容器中加入0.5gEDTA,可使尿样中的儿茶酚胺在-20℃下稳定2周，-80℃下稳定更长的时间。在留取尿液时，同样应避免食用浓茶、咖啡、香蕉等影响检测结果的食物。若是测定其代谢产物VMA、HVA，-20℃贮存期可达数月。以上所有样本冻融2次，多种成分的含量均有所下降，影响检测结果的准确性。