血液RNA提取方法

血液RNA提取方法1.取新鲜的血液（紫管），加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10,000rpm离心1分钟。2.彻底吸弃上清，收集白细胞沉淀。3.每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1mlTRIzol。室温放置5min，使样品充分裂解。4.4℃12,000rpm离心10分钟，取上清（）。5.每1mlTRIzol加入200μl氯仿，剧烈振荡混匀后室温放置3-5min，自然分相。6.4℃12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层：黄色的有机相，中间层和无色的水相，RNA主要在水相中，把水相转移到新管中（小心吸取水相）7.在上清中加入等体积冰冷的异丙醇（），室温放置10-20min。8.4℃12,000rpm离心10min，弃上清，RNA沉淀于管底。9.RNA沉淀中加入1ml75%乙醇（用RNase-free水配制，），温和振荡离心管，悬浮沉淀。10.4℃5,000-8,000rpm离心1-2min，弃上清。11.室温放置1-2分钟晾干沉淀。12.沉淀中加入50-100μlRNase-free水，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存。13.检测纯度和浓度（OD260/OD280在2.0左右）