大肠杆菌的药敏试验

·29·基础科学中国畜牧兽医文摘2014年30卷第3期2012年10月11日，常州市武进区某养猪户带病死猪来兽医站就诊，据畜主介绍，家里饲养的3月龄左右的猪有27头，体重30～45kg，20d前曾给该猪群免疫过猪瘟疫苗，10月9日突然发病。病猪精神沉郁，食欲废绝，体温38.5℃～39.5℃，眼睑水肿下垂，下颌以及颈部水肿，眼结膜充血，步态不稳，不久出现共济失调，盲目行走或转圈，叫声嘶哑，心跳疾速，呼吸快而浅，后期倒地不起。到目前为止，发病猪已有4头，刚死亡2头，且为猪群中体格较大者。在就诊之前，畜主已经给发病猪使用过土霉素、血虫灵等药物，但均未见效。养猪户带1头刚病死的仔猪求诊。笔者等对病原进行分离、鉴定，并对分离出的细菌进行药物敏感试验，筛选敏感的抗菌素，指导临床用药。1材料与方法1.1材料生化发酵管；药敏纸片（购自杭州天和微生物试剂有限公司）；恒温生化培养箱（南京仪器厂生产）；高压灭菌锅（上海三申仪器有限公司生产）；普通光学显微镜（Leica公司生产）；牛肉浸膏、蛋白胨、琼脂粉、氯化钠、麦康凯培养基粉（购自上海化学试剂厂）；5%无菌兔抗凝鲜血、接种环、接种针、酒精灯、剪刀、镊子等。1.2方法从麦康凯培养基上挑取分离培养的纯菌落，在普通琼脂表面划线，所划线紧靠一起，并不断调整划线方向，使普通琼脂培养基表面细菌分布均匀，且连成一片，再将镊子在酒精灯火焰上灼烧，冷却后，夹取药敏纸片，紧密贴附于培养基的表面，37℃培养箱中倒扣培养，18h后观察培养基上细菌生长情况，并用直尺测量抑菌圈直径。2实验结果笔者等对菌株进行了分离。将分离的细菌划布普通琼脂培养板，分别用含呋喃妥因（呋）、菌必治（菌）、罗红霉素（罗）、林可霉素（林）、四环素（四）、利福平（利）、妥布霉素（妥）、环丙沙星（环）、先锋噻肟（肟）、链霉素（链）和复方新诺明（复）的药敏纸片进行药敏试验，试验数据统计见附表。大肠杆菌的药敏试验王建1沃妮娜2邱江3*（1.常州市武进区动物疫病预防控制中心，江苏常州213021；2.常州出入境检验检疫局，江苏常州213002；3.扬州市邗江区公道镇农业推广服务中心，江苏扬州225000）附表药敏试验结果统计药物名称呋菌罗林四利妥环肟链复抑菌圈直径（mm）1330000010143300敏感性中敏高敏不敏不敏不敏不敏中敏中敏高敏不敏不敏注：高敏：抑菌圈直径≥18mm，表明细菌对该药物高度敏感；中敏：18mm＞抑菌圈直径≥13mm，表明细菌对该药物中度敏感；低敏：13mm＞抑菌圈直径＞0mm，表明该细菌该药物低度敏感；不敏：抑菌圈直径=0mm，表明该细菌该药物不敏感。根据细菌分离培养、镜检结果、在麦康凯鉴别培养基上的生长状况并结合生化试验结果可判定，笔者等从患水肿病的病死猪体内实质器官中成功分离出致病性大肠杆菌；且对该株大肠杆菌进行的药敏试验结果表明，菌必治和先锋噻肟能有效抑制细菌生长，可作为该病例的预防和治疗性药物。3讨论大肠杆菌容易形成抗药性，而且大肠杆菌可通过菌毛将其抗药性质粒传递给其他大肠杆菌，所以，大肠杆菌的抗药性形成较快，环境中大肠杆菌耐药性菌株越来越多，因此，在用抗菌药物对大肠杆菌造成的疾病的治疗过程中，往往先进行药敏试验，筛选高度敏感的抗菌药物来指导临床用药，从而提高临床治疗效果。从药敏试验结果可以看出，经典的抗革兰氏阴性菌药物如链霉素等，对本株大肠杆菌的生长抑制效果很差，但菌必治和先锋噻肟对其生长抑制效果很好，此2种药物可作为该养殖场防治大肠杆菌病的首选药物。参考文献[1]　林满堂，陈巧静，史常勇.猪水肿病的诊断与治疗[J].浙江畜牧兽医，2005，（2）：17-18.[2]　邢兰君，高社朝.猪水肿病的诊断与治疗[J].河北畜牧兽医，2002，6（4）：20-21.[3]　郭永添.猪水肿病的综合防治[J].贵州畜牧兽医，2007，1（31）：6-7.[4]　王鹏，刘春凌，李育蜂.猪水肿病致病性大肠杆菌的分离与血清型鉴定[J].河北畜牧兽医，2006，10（5）：13-14.[5]　赵本领，张奔，刘兴超，等.仔猪水肿病的诊治与分析[J].中国畜牧兽医，2006，9（33）：26-27.大肠杆菌的药敏试验作者：王建，沃妮娜，邱江作者单位：王建(常州市武进区动物疫病预防控制中心,江苏常州,213021)，沃妮娜(常州出入境检验检疫局,江苏常州,213002)，邱江(扬州市邗江区公道镇农业推广服务中心,江苏扬州,225000)刊名：中国畜牧兽医文摘英文刊名：ZHONGGUOXUMUSHOUYIWENZHAI(SHUOYI)年，卷(期)：2014(3)本文链接：