细胞超微结构观察与透射电子显微镜的使用

实验八-1细胞超微结构观察与透射电子显微镜的使用掌握透射电子显微镜的成像基本原理及其应用实验目的与要求一、透射电子显微镜的成像基本原理在真空条件下，电子束经高压加速后，穿透样品时形成散射电子和透射电子，它们在电磁透镜的作用下在荧光屏上成像。显微镜分辨本领光源透镜真空成像原理LMTEM200nm100nm0.1nm可见光（400-700）紫外光（约200nm)电子束（0.01-0.9）玻璃透镜玻璃透镜电磁透镜不要求真空不要求真空要求真空1.33x10-5～1.33x10-3Pa利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差电镜与光镜的比较超薄切片技术用于电镜观察的样本制备负染色技术（Negativestaining）染色背景，衬托出样品的精细结构冰冻蚀刻技术（Freezeetching）冰冻断裂与蚀刻复型：主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构。电镜三维重构技术电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应用前景的一门新技术。电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振分析技术相结合，是当前结构生物学（StructuralBiology）（主要研究生物大分子空间结构及其相互关系）的主要实验手段。主要电镜制样技术超薄切片技术主要包括取材、固定、包埋、切片、染色等步骤。二、作业:试比较电子显微镜与普通光学显微镜的异同。实验八-2细胞超微结构观察与扫描电子显微镜的使用利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态。电子“探针”扫描，激发样品表面放出二次电子，探测器收集二次电子成像。一、实验原理疟疾破坏的两个红细胞二、作业试描述扫描电子显微镜成像的基本原理