常用标本的采集原则与方法

LOGO标本采集方法标本的定义：是指采取患者少许的血液、排泄物（粪、尿）、分泌物（痰、鼻分泌物）、呕吐物、体液（胸腔积液、腹腔积液）和脱落细胞（食道、阴道）等样品，经过物理、化学和生物学的实验室技术和方法对其进行检验，作为判断患者有无异常存在的依据。本章重点：掌握标本采集的原则掌握痰标本、血标本、尿标本、粪标本的采集方法标本采集的意义明确诊断观察病情指导制定治疗措施标本采集的原则遵照医嘱充分准备：1）患者准备2）用物准备3）护士自身准备严格查对：检查项目、患者姓名、床号、住院号正确采集：方法、时间、量、容器及时送检明确检验项目、检验目的及注意事项标本的容器贴好标签，附上验单：患者的姓名、科室、床号、住院号、送检目的、送检日期和时间等每次采集血标本时应做到“三个一”：一患者、一化验单、一容器一般培养标本的采集应在使用抗生素之前culture各种标本的采集一、痰标本的采集二、咽拭子标本的采集三、尿标本的采集四、粪便标本的采集五、血液标本的采集各种标本的采集一、痰液标本的采集★痰常规标本★痰培养标本★24小时痰标本三种痰标本的区别分类目的痰常规标本痰液一般形状，涂片查细胞、细菌、虫卵等痰培养标本痰中的致病菌24小时痰标本24小时痰液的量和性状分类用物痰常规标本普通容器，痰盒痰培养标本无菌集痰器，漱口液24小时痰标本500ml的广口玻璃瓶，内盛少量清水共同点：验单分类采集方法痰常规标本幻灯片10能自理的患者；无法咳痰或不合作者痰培养标本步骤基本同上。不同的是先用漱口液漱口，再用清水漱口；无菌容器，无菌操作。24小时痰标本从晨7时~次晨7时第一口痰结束。全部痰液留在容器中送检。能自理的患者：—晨起后用清水漱口—以清晨第一口痰为宜—深吸气后用力咳出气管深处的痰液—不可混入漱口液、唾液、鼻涕等无法咳痰或不合作者：—用吸痰法收集（集痰器）痰标本采集注意事项1、如查癌细胞，应立即送检或用95%乙醇或用10%甲醛固定后送检2、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中3、收集痰液宜在清晨，因此时痰量较多，痰内细菌也较多，提高阳性率。LOGO痰培养标本采集与运送病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原体、衣原体与立克次体原虫寄生虫咳痰途经口咽部唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。不可避免地受到污染我国痰细菌培养现状标本送检率低苛养菌检出率极低结果重复性差报告速度慢感染菌与污染菌不易区分药敏结果与治疗反应存在差距咳痰标本的采集标本采集方法医师或护士直视下采集标本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液临床上约半数咳痰标本不合格！关于咳痰标本在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后1～2h内必须立即进行实验室处理咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导无痰可用3％～5％NaCl5ml雾吸约5min导痰也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰几种下呼吸道直接采集的标本经气管穿刺吸引（transtrachealaspiration,TTA）经胸壁针刺吸引（transthoracicneedleaspiration,TNA）经支气管镜采样支气管肺泡灌洗（bronchoalveolarlavage,BAL）经支气管镜直接吸引防污染样本毛刷（protectivespecimenbrush,PSB）开胸肺活检（open-lungbiopsy，OLB）经人工气道吸引分泌物（endotrachealaspirates，ETA）痰培养的送检次数对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检；怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。痰培养的运送和保存尽快（2h）送至实验室。如不能及时送达，应将标本暂存于4℃，但放置时间不可超过24h。厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。二、咽拭子标本采集目标：从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养或病毒分离，协助诊断。操作步骤及要点操作前准备核对点燃酒精灯，指导患者张口发“啊”音，用长棉签蘸以敏捷、轻柔的动作擦拭两侧腭弓、咽扁桃体上的分泌物，取毕，将试管口及棉塞在酒精灯火焰上消毒后插入棉签，塞紧。将棉签插入试管中送检咽拭子标本采集注意事项作真菌培养时，须在口腔溃疡面采集分泌物避免交叉感染注意棉签不要触及其它部位，防止污染标本，影响其他结果避免在进食2小时内采集标本，以防呕吐上呼吸道标本上呼吸道感染：绝大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部位；导致咽痛、鼻涕、常常会发热。感染喉部、中耳、鼻窦炎、结膜炎或角膜炎。可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和传染性单核细胞增多症并存。不同的采样拭子对标本的检测结果有影响吗??棉+木棍抑菌区域的产生由于棉中所含的脂肪酸以及从木棒中渗出的树脂和甲醛。三、尿标本的采集尿标本的分类尿常规标本尿培养标本12h或24h尿标本1、尿常规标本查尿液的性状，有无管型和细胞，并作尿蛋白和尿糖的定性检测用物准备：一次性尿杯自理的病人：清晨首次尿，1/3到1/2杯留置导尿：集尿袋中放出尿液2、尿培养标本用于细菌培养和细菌敏感试验用物：中段尿留取法：1、导尿术2、按导尿术清洁外阴、尿道口→嘱患者排去前段尿→用试管留取5-10ml中段尿液LOGO尿培养标本采集与运送你知道吗？尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误的培养结果。诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集2-3份标本。怀疑肾结核时，应连续3天采集晨尿。多次收集或24小时尿不能用作培养。申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标本。室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过24小时。尿培养标本清洁中段尿导尿导管尿经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液送检标本以晨起第一次尿液为佳不能立即送检者，可暂存4℃冰箱，但保存不超过8h清洁中段尿液尽量取早晨第一次尿液弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿详细告知病人以下操作步骤女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细擦洗尿道区域分开阴唇，开始排尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿男性病人回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿导尿管尿液集尿袋内的尿液不能用作培养；导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中耻骨上穿刺吸取尿液常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病人等。可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少量尿液的小儿难以实施。方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，局麻穿刺点部位；在耻骨联合与脐连线上，高于耻骨联合2cm处进针刺入膀胱；取20ml尿液；置于无菌容器中并送往实验室。可用于厌氧菌检测3、12h或24h尿标本尿生化或尿浓缩查结核杆菌7pm(am)排空膀胱→翌日7am请病人先把尿液排到便盆或便壶内，再置于3000-5000ml带盖的清洁容器内。用物：容器（3000~5000ml）防腐剂常用防腐剂：甲醛：—防腐和固定，用于作尿爱迪计数（12小时尿细胞计数）等—每30ml尿液加40%甲醛液1滴浓盐酸：—作用：保持尿液在酸性环境中，防止尿中激素被氧化。常用于内分泌系统的检验，如17-酮类固醇、17-羟类固醇—24小时尿中加5-10ml甲苯：—保持尿液的化学成分不变，常用作尿蛋白、尿糖的定量测定。—用法：每100ml尿液中加入0.5%~1%甲苯2ml，使之形成一薄膜，覆盖于尿液的表面，防止细菌感染。如果测定尿中的钠、钾、氯、肌酐、肌酸等需加10ml。尿标本采集注意事项—女患者月经期不宜留取尿标本—会阴部分泌物过多时，应先清洁再冲洗，再收集。—做早孕检查试验应留晨尿—留取尿培养标本时，无菌操作—留取12h或24h尿标本，集尿瓶应放在阴凉处，根据检验要求加防腐剂。四、粪便标本采集意义、目的：1、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染等2、了解消化道状况，粗略判断胰腺的外分泌功能3、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的诊断筛查试验4、检查粪便中有无细菌感染，防止肠道感染种类目的容器常规标本查一般形状便盒细菌培养标本查致病菌培养瓶隐血标本查肉眼不能察见的微量血液便盒寄生虫或虫卵标本查寄生虫便盒便盒大便培养种类操作要点常规标本排空膀胱。异常粪便挑取有脓血、粘液的部分；外观无异常的粪便应从中央取材，2-5g大小细菌培养标本用无菌棉签取中央部分或脓血、粘液部分2-5g致培养瓶内，塞紧瓶盖。隐血标本（OB）检查前3天禁食肉类、肝、血、含大量绿叶素的食物或含铁剂药物，三天后留取标本送检。寄生虫或虫卵标本虫卵：不同部位的异常粪便5-10g蟯虫：用透明胶带粘肛门周围阿米巴：便器加热致人体体温采集粪便标本的注意事项：1、采集培养标本时，如患者无便意，用长无菌棉签蘸生理盐水，由肛门插入6-7cm，顺一个方向轻轻旋转后取出，将棉签插入培养试管内，盖紧送检。2、病人服用驱虫药或做血吸虫孵化实验，应留取全部粪便送检。3、患者如有腹泻，水样便应盛于便盆内送检五、血液标本的采集血标本的分类和目的全血：用作血沉、血常规和测定血液中某些物质的含量，如肌酐、尿素氮、尿酸、血糖等血清：全血自然凝固后析出的液体,用于生物化学、免疫学检测等，如血清酶、脂类、电解质、肝功能血培养标本：查找血液中的致病菌采集法1、静脉采血法★全血★血清★血培养2、动脉血标本采集法常用于血气分析3、毛细血管采集法常用于血常规检查常用抗凝剂EDTA(乙二胺四乙酸)通过与血中钙离子形成螯合物,从而阻止血液凝固常用类型:K2EDTA:EDTA二钾塑料试管以喷雾状态抗凝.ICSH推荐.需充分混匀K3EDTA:EDTA三钾(玻璃试管以液体状态抗凝)可能因‘采血量不足’液体抗凝剂对标本有稀释作用,从而导致错误的实验结果Na2EDTA:EDTA二钠应用:常规液学实验,输血前试验,糖化血红蛋白(HbA1C),血红蛋白电泳现象分析.枸橼酸钠:如血凝（1：9）、血沉（1：4）肝素：如血黏液氟化钠(固体)草酸钾类似EDTA都是通过去除血液中的钙而达到抗凝作用.氟化钠帮助保存分析前的血糖.---血糖保存剂ACD(液体)促凝剂：矾土水泥，以铝矾土和石灰石为原料，经锻炼制成纤维蛋白原常用抗凝剂肝素通过阻止凝血途径的最后一步骤而起到抗凝作用.通常使用的形式:肝素锂肝素钠某些情况下,也可能使用肝素氨应用:特殊化学试验、血流变学、检测定性的表面抗源、血浆生化、急诊生化，不适合做电解质常用抗凝剂枸橼酸三钠只有一种形式,但有不同的浓度.•0.105mol/L(约为3.1%浓度)新的塑料枸橼酸钠试管使用0.109mol/L(约为3.2%)•0.129mol/L(约为3.8%concentration)NCCLS推荐使用低浓度的抗凝剂(0.105–0.109mol/L)抗凝剂与血液的比例是1︰9应用:凝血试验(抗凝药物的监测,凝血因子分析)常用抗凝剂氟化钠/草酸钾草酸钾类似EDTA都是通过去除血液中的钙而达到抗凝作用.氟化钠帮助保存分析前的血糖.应用:血浆中血糖分析GTT(葡萄糖耐量试验常用抗凝剂枸橼酸