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流式细胞术样本制备流式细胞术样本制备BD质控品上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206流式细胞术样本来源含有生物学颗粒的悬液:单细胞悬液、微生物颗粒悬液、人工微球悬液标本类型:细胞悬液:⌧外周血(溶血)、PBMC、骨髓⌧灌洗液、体腔积液⌧培养细胞、细胞系实体组织:⌧病理组织:新鲜样本/石蜡包埋样本⌧针吸组织:新鲜样本鞘液、洗液、PMA等:洁净,无颗粒杂质上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206流式细胞术样本来源血液成分的分析:如白细胞、红细胞、血小板等分离血液中特定细胞成分,进行分析:操作复杂,分离、离心步骤导致细胞特定群体丢失,并可能引入某些误差直接使用全血:最接近生理状况,操作简便,样本用血量小实体组织:MediMachine上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206单细胞悬液的处理荧光标记抗体的染色:使用特异的单克隆抗体单色分析:直接标记、间接标记双色分析:SimulSETIMK、HLA-B27多色分析:TriTEST、MultiTEST、ProCOUNT溶血:FACSLysingSolution细胞打孔:FACSPerm2固定:1%多聚甲醛上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206细胞染色染色要求:特异识别某一群细胞,有效区分不同细胞亚群非特异反应水平低抗体校价高,用量适用于常规标本使用特异的单克隆抗体最好使用荧光直接标记的抗体采用适当的阴性对照物抗体最适滴度上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206淋巴细胞表面抗原分析样本来源新鲜抗凝全血PBMC单克隆荧光抗体染色溶血洗细胞固定上机检测上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206淋巴细胞细胞内抗原分析样本来源新鲜抗凝全血PBMC细胞表面抗体染色溶血、固定细胞打孔细胞内抗体染色上机检测上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206红细胞、血小板表面抗原分析样本来源新鲜抗凝全血PRP单克隆荧光抗体染色固定上机检测上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206细胞周期分析准确分析细胞核中DNA含量单细胞悬液:细胞数0.5-1×106碎片和粘连细胞少DNA染色的线性度:CEN单细胞分析:CTN进行DDM检查CV:2μm微球上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206细胞周期分析DNACyclePlusBufferSolution:细胞保存液SolutionA:破膜剂SolutionB:RNaseSolutionC:PI单细胞悬液1×106cells/ml,固定消化RNADNA染色上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206对照样本对照样本应与实验样本平行操作阴性对照:评估非特异反应水平,界定阴性范围阳性对照:在诊断抗原表达确失性疾病时,需确定抗原表达正常时的抗原表达强度和百分含量补偿调整管上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206质控品体外诊断试验的必要保证稳定样品,提供靶值和质控范围,供实验室监测流式细胞仪分析实验全过程,确保结果可靠质控品应与实验样本同时处理,采用相同步骤,相同试剂,相同的画门分析方法双水平控制:Low/High三水平控制:Low/Median/High上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206BDStemCellControl流式细胞术造血干细胞免疫表型分析与计数的全血质控物抗体染色溶血流式细胞仪设置及运行状况分析数据,计数干细胞Cat.No3409911×2.0ml,CD34Low1×2.0ml,CD34High上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206BDMulti-CheckControl流式细胞术淋巴细胞免疫表型分析与计数的全血质控物抗体染色溶血固定流式细胞仪设置及运行状况分析数据,计算淋巴细胞各亚群含量上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206BDMulti-CheckControl淋巴细胞免疫表型:CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD19+CD3-CD16+56+CD3+HLA-DR+靶值及质控范围:%TotalLymphAbsoluteNumber/μL上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206BDMulti-CheckControlBDMulti-CheckControlCat.No3409111×2.5mlCat.No3409122×2.5mlCat.No3409135×2.5mlBDMulti-CheckCD4LowControlCat.No3409141×2.5mlCat.No3409152×2.5mlCat.No3409165×2.5ml上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206BDRetic-COUNTControlCat.No3409991×1.5ml,Low1×1.5ml,Med1×1.5ml,HighCat.No3410001×1.5ml,Low1×1.5ml,Med1×1.5ml,High流式细胞术网织红细胞分析与计数的全血质控物荧光染色流式细胞仪设置及运行状况分析数据,计数网织红细胞上一页上一页下一页下一页返回返回样本制备样本制备研究生免疫学研究生免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿流流式式专专题题制作:姚新生审校:孙万邦联系:yxspah@sina.com;0852-82044198562206BDLeucoCOUNTControl血制品的残留白细胞计数的质控物荧光染色流式细胞仪设置及运行状况分析数据,计数残留白细胞TruCOUNT绝对计数Cat.No341001:血小板制品的质控品1×3.0ml,Low;1×3.0ml,HighCat.No341001:红细胞制品的质控品1×3.0ml,Low;1×3.0ml,High
本文标题:流式细胞术样本制备
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