维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定结果

维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定分类:仪器分析实验报告一、实验目的(略)二、实验原理1、定性鉴别利用VB在278nm。、361nm、550nm处的特征峰，进行定性鉴别:A361/A550=3.15~3.452、定量分析根据朗伯-比尔定律，用吸光系数法测定。对某一确定的物质，在一定的波长下，某吸光系数为一定值(查表得)，测得吸光度A后，即可计算浓度:维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定三、实验步骤1.精密移取VB12注射液1.00mL于25.00容量瓶，以蒸馏水定容2.用上述稀释液在200.0-650.0nm扫描，记录特征峰波长3.做定性鉴别4.以最大吸收峰处的吸光度计算VB12的含量及标示百分量注:VB12标示量百分含量在90%~110.0%内均为合格。四、仪器与试剂(注意:紫外-可见光光度计记得写明厂家、型号)五、实验结果与数据处理(一)计算式VB12浓度:维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定(二)实验数据:1维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定结果(三)计算分析维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定结论:A361/A550在3.15~3.45范围内，所以溶液中含有VB12该VB12含量合格六、思考题1.利用邻组的实验结果，比较同一溶液在不同仪器上测得的吸收曲线的形状、吸收峰波长以及相同浓度的吸光度等有无不同，试作解释。答:(1)、本组和邻组的吸收曲线和吸收波长大致相同，但相同的浓度吸收度稍微不同，本组各波长吸收度偏低。原因包括:1、同仪器的灵敏度不同;(2)、配制溶液时定容等操作导致的误差。2、比较用吸光系数和工作曲线定量方法，你认为哪种方法更好?为什么?吸光系数法需要从文献、药典等资料查得吸光系数(单位浓度的吸光度)，所以只能用于测定有吸光系数的已知物质，并且测定吸光度的仪器与自身的仪器灵敏度和实验条件均存在差异，所以比标准曲线法存在更大的误差。工作曲线法是指通过多个标准浓度的溶液来确定溶度与吸光度的线性规律，利用这一线性规律求得样品的溶度。工作曲线可以消除仪器误差和操作误差，此外，出标准曲线与样品测定是在同一台仪器和相同的实验条件。所以工作曲线法更好。