人类精液检验与处理实验室手册(第五版)

1致谢本手册的出版由UNDP/UNFPA/WHO/世界银行人类生殖研究、发展和研究培训特别规划署及WHO人类生殖健康与研究部共同完成。我们对所有参与本手册筹备、编辑和校订的人员表示诚挚的感谢。另外感谢：MsCathyTreece,MsCharleneTollner和JimOverstreet教授(UniversityofCalifornia,Davis,CA,USA)提供形态学显微照片以及对媒体文件的校对；DrRuneEliasson(SophiahemmetHospital,Stockholm,Sweden)帮助定义非精子细胞；DrGaryNClarke(TheRoyalWomen´sHospital,Carlton,Australia),DrRoelofMenkveld(TygerbergAcademicHospitalandUniversityofStellenbosch,Tygerberg,SouthAfrica)和PieterWranz教授(UniversityofStellenbosch,Tygerberg,SouthAfrica)对本手册编译工作提供附注。衷心感谢国际男科学会提供的经济支持。这个版本的手册是为纪念已故前WHO男性生育调控方法学工作组负责人GeoffreyWaites(1928-2005)，他也是第二、第三和第四版实验室手册的共同编辑。编辑委员会全身心投入工作的动力来自于对Geoff诚实、公平和关心疾苦人格的欣赏。2缩写词Abantibody抗体AIartificialinsemination人工授精AIDartificialinseminationwithdonorsemen供精人工授精AIHartificialinseminationwithhusband’ssemen夫精人工授精ALHamplitudeoflateralheaddisplacement头侧摆振幅ANOVAanalysisofvariance变量分析APAAPalkalinephosphatase:anti-alkalinephosphatasecomplex碱性磷酸酶:抗碱性磷酸酶复合物ARacrosome-reacted顶体反应ARTassistedreproductivetechnology辅助生殖技术ASAanti-spermantibody抗精子抗体BCFbeat-crossfrequency(Hz)交打频率BSAbovineserumalbumin牛血清白蛋白BWWBiggers,WhittenandWhittingham试液CASAcomputer-aidedspermanalysis计算机辅助精子分析CASMAcomputeraidedspermmorphometricassessment计算机辅助精子形态评估CBAVDcongenitalbilateralabsenceofthevasdeferens先天性双侧输精管缺失CDcompactdisk压缩盘CDcytoplasmicdroplet胞质小滴CD45clusterofdetermination45(pan-leukocytemarker)决定簇45(全白细胞标记物)CD46clusterofdetermination46(acrosomalantigen)决定簇46(顶体抗原)CIconfidenceinterval可信区间CLconfidencelimits可信界限CO2carbondioxide二氧化碳DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜DNAdeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸DPBSDulbecco’sphosphate-bufferedsalineDulbecco’s磷酸缓冲盐溶液DVDdigitalversatiledisc数字多用盘EDTAethylenediaminetetra-aceticacid乙二胺四乙酸（依地酸）EQAexternalqualityassurance外质量保险EQCexternalqualitycontrol外质量控制ERCexcessresidualcytoplasm残余胞质FITCfuoresceinisothiocyanateFMLPformyl-methionyl-leucyl-phenylalanine甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸GIFTgameteintrafallopiantransfer输卵管内配子移植术GPCglycerophosphocholineH2O2hydrogenperoxide过氧化氢HBSSHanks’balancedsaltsolutionHanks’平衡盐溶液HBVhepatitisBvirus乙肝病毒hCGhumanchorionicgonadotrophin人绒毛膜促性腺激素3HCVhepatitisCvirus丙肝病毒HIVhumanimmunodefciencyvirus人免疫缺陷病毒HOPhamsteroocytepenetration仓鼠卵穿透HOShypo-osmoticswelling低渗肿胀试验HPFhighpowerfield高倍视野HRPhorseradishperoxidase辣根过氧化物酶HSAhumanserumalbuminxiv人血清白蛋白IVHTFhumantubalfuid人输卵管液IBimmunobead免疫珠IBTimmunobeadtest免疫珠试验ICSIintracytoplasmicsperminjection胞浆内精子注射Igimmunoglobulin免疫球蛋白IMimmotility不动IQCinternalqualitycontrol内质量控制IUinternationalunit国际单位IUIintrauterineinsemination宫腔内人工授精IVFinvitrofertilization体外受精KRMKrebs-RingerMediumKrebs-Ringer培养液LINlinearity线性LLQlowerlimitofquantifcation定量下限LPFlowpowerfield低倍视野MADmeanangulardisplacement平均角位移MAImultipleanomaliesindex复合异常指数MARmixedantiglobulinreaction混合抗球蛋白反应NAnumericalaperture数值孔径NPnon-progressive(motility)非前向的（活力）PBSphosphate-bufferedsaline磷酸缓冲盐溶液PDCAplan,do,check,actPMAphorbol12-myristate13-acetate(12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐PMSGpregnantmareserumgonadotrophin孕马血清PNPGp-nitrophenolglucopyranoside对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷PRprogressive(motility)前向的（活力）PSAPisumsativumagglutinin碗豆凝集素QAqualityassurance质量保险QCqualitycontrol质量控制RCFrelativecentrifugalforce相对离心力RIrefractiveindex屈光指数RNAribonucleicacid核糖核酸ROSreactiveoxygenspecies活性氧类物质rpmrevolutionsperminute每分钟转速SDstandarddeviation标准差SDIspermdeformityindex精子畸形指数SDSsodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠SEstandarderror标准误4SOPstandardoperatingprocedure标准操作流程STRstraightness(VSL/VAP)直向TBSTris-bufferedsalineTris缓冲盐溶液TGGTyrode’sglucoseglycerolTZIteratozoospermiaindex畸形精子症指数VAPaveragepathvelocity平均轨道速率VCLcurvilinearvelocity曲线速率VSLstraight-line(rectilinear)velocity直线速率WHOWorldHealthOrganization世界卫生组织WOBwobble(VAP/VCL)摆动5第1章背景1.1导言鉴于人类精液检查标准化需求的日益增加，世界卫生组织于1980年首次出版了《世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》。至今，该手册已改版三次，被译成多国语言。过去30年中，该手册作为全球范围内的标准被世界各地的临床及科研工作者广泛使用。尽管前几版的发行很成功，但是随着新证据的出现，先前版本中的一些推荐指标需要被修正就变得更明显了。同时，对一些概念也需给出更多的解释和支持证据。出于上述考虑，WHO成立了编辑委员会，回顾手册中描述的各种方法，本版旨在修改、更新这些内容。由于按照先前版本中讲述的方法获取的数据不充分，某些情况下修正工作变得异常困难。有时，某些实验室可以获得的一致结果，在其他实验室却无法得以验证。鉴于这些情况，编辑委员会在对以往文献资料评估后，达成一致，统一标准。由于需要对先前版本中讲述的方法进行更详细的描述，技术员和科学工作者们给出了补充推荐内容。因为前几版手册缺乏对细节的描述，一些实验室采用其它方法或是发展出自己的操作规程，然而他们却仍申称是按照WHO手册进行精液分析的。为了使全球范围内的比较更容易实现，第五版手册包含了更多的细节描述。当提出不同的分析方法时，手册中对原由做了解释。参照该手册在发表论文中报道实验结果时，我们推荐各个实验室要指明所采用的是哪一种方法。1.2第5版第5版包含三部分内容：精液分析（第2-4章），精子制备（第5、6章）及质量评估（第7章）。第Ⅰ部分介绍精液分析，参照先前版本，但被分为三个小章节：标准化方法（介绍决定精液质量的常规操作流程）；可供选择的试验（这些试验用于某些特定情况下或由实验人员选择）；研究试验（这些试验目前不作为精液常规分析的方法）。由于通常在男科学实验室不能开展精液培养，因此这些内容仅在无菌化精液标本采集部分提及。精子制备章节的内容从射出精液扩展到对睾丸和附睾获得精子的制备。本手册中散在分布的方法学注释框有注解(方法学解释)、评论（结果解释）以及说明框(包括补充解释的物质)。6第5版手册的主要特点如下所列：精液分析章节包括涉及工作溶液的配制、操作流程、精子计数及对结果解释的详细描述，以使所有给出的方法学都非常完整，与手册中其它章节内容的重叠极少。扩展了精子制备部分的内容，增加了关于精子冷冻保存的新章节。与宫颈粘液分析相关的操作规程被分到可供选择的试验章节及附录中粘液特征的检查部分。与先前的版本相比，第五版的附录内容减少。这部分内容仅限于特殊的或者很少被用到的信息。精子数目的评估。对于一份精液标本的检查，精液的稀释度和评估精子数目所需观察的计数池区域的大小均有所改变，每次需计数200条精子。新版手册中强调了抽样误差的重要性及计数结果的确定性。编辑委员会认为每次排精的总数目比精子密度能更准确的评估睾丸功能，但这要求对精液量的测定需准确无误。无精子症的评估。这尽管表面看起来简单，但很多因素会影响无精子症的诊断，包括计数太少数目精子导致的明显误差，观察显微镜视野的数目，以及检验布满碎片精子沉淀物的困难度。本手册推荐改为检验固定后、未离心的标本，以及指出所用计数方法的灵敏度。然而，当需收集足够数目的精子用于治疗时，离心方法仍是必需的。另外，手册中也介绍了通过检验未固定标本中的活动精子以评估输精管切除术疗效的方法。精子活力的评估。第五版与先前版本的主要不同在于对精子活力的分级。目前推荐精子活力被分为前向运动、非前向运动的不动精子（而不再分为a,b,c和d级）。精子