酒精生产半成品质量以及检测方法

1半成品质量及试验方法一、糖化醪1.技术要求：2.采样3.糖化醪冷却到规定温度入发酵池前，取样。料管取样。3.试验方法3.1外观糖3.1.1仪器婆美计0~12%3.1.2分析步骤取糖化醪滤液于100ml量筒中，用婆美计测量，查糖度温度校正表，校正为20℃的糖度。3.2酸度3.2.1原理糖化醪中的有机酸，以酚酞为指示剂，采用氢氧化钠进行中和滴定，其反应式为：项目指标外观糖Bx酸度ml使用硫酸调酸时：还原糖g/100ml总糖g/100ml糖化率%2RCOON＋NaOH→RCOONa＋H2O3.2.2试剂3.2.2.11%酚酞指示剂：称取酚酞1.0克，溶于60ml乙醇中，用水稀释至100ml。3.2.2.20.1mol/l氢氧化钠标准溶液。a、配制将氢氧化钠配成饱合溶液，注入塑料瓶中，封闭放置至溶液清亮，使用前虹吸上清液。量取5ml氢氧化钠饱和溶液，注入1000ml不含二氧化碳的水中，摇匀。b、标定称取于105~1100C烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾0.6g(称准至0.0001g)，溶于50ml不含二氧化碳的水中，加入酚酞指示液2滴，以新制备的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红色为终点。同时做空白试验。c、计算氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度（c）按下式计算c=m÷〖(v-v1)×204.2〗÷1000式中：c——氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度mol/lm——基准邻苯二甲酸氢钾的质量gv——滴定时消耗氢氧化钠溶液的体积mlv1——空白试验消耗氢氧化钠溶液的体积ml204.2——邻苯二甲酸氢钾质量mg3.2.3分析步骤吸取糖化醪滤液10.0ml于250ml三角瓶中，加中性蒸馏水30ml和1%酚酞指示3剂2滴，用0.1mol/l氢氧化钠滴定至微红色在30秒内不消失为终点。3.2.4计算以10ml试样消耗0.1000mol/l氢氧化钠溶液毫升数表示酸度=VC÷〖V1×10×0.1〗式中：V——氢氧化钠标准溶液体积mlC——氢氧化钠标准溶液浓度mol/lV1——试样量ml3.3还原糖3.3.1原理还原糖在特定的条件下，能定量地还原斐林氏溶液中的二价铜为氧化亚铜（Cu2O）红色沉淀，从而可以算出试样中的还原糖含量。以次甲基兰作指示剂，斐林氏溶液中的Cu2+氧化力比次甲基兰强，当溶液中尚有未被还原的Cu2+时，所滴入的糖液首先使未被还原的Cu2+被还原完毕，糖液才使次甲基本兰还原为无色，即为终点。3.3.2试剂3.3.2.1斐林氏溶液配制:甲液：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）69.278克，加水定容至1000ml乙液：称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g，加水溶解后，定容至1000ml3.3.2.20.25%葡萄糖溶液称取于105~1100C烘干至恒重（1.5~2小时）的无水葡萄糖2.5000克，加水溶解后，定容至1000ml3.3.2.30.5%次甲基兰指示剂4称取次甲基兰0.5克，加水溶解，稀释至100ml3.3.3试验步骤3.3.3.1吸取糖化醪滤液10ml，加水定容至250毫升，摇匀，用脱脂棉过滤备用。3.3.3.2定糖a、预备试验吸取斐林氏甲、乙液各2.5毫升，于250毫升三角瓶中，加水20毫升，摇匀，置于有石棉铁丝网的电炉上，加热至沸腾，用滴定管逐滴滴入糖液，滴定时应保持沸腾，待试液蓝色即将消失时，滴入0.5%次甲基兰2滴，试液复呈蓝色，摇匀，继续滴入糖液至蓝色消失呈现红色时为终点，全部滴定应在3分钟内完成。b、正式试验吸取斐林氏甲、乙液各2.5毫升，于250毫升三角瓶中，加水20毫升，摇匀，一次加入少于预备试验消耗糖液约1毫升的糖液，加热沸腾2分钟，加入0.5%次甲基兰2滴，摇匀，继续滴入糖液至蓝色消失呈现红色时为终点，自沸腾开始应在3分钟内结束。3.3.4计算还原糖%=VM×250×100÷〖10×V1〗式中：M——滴定1毫升斐林氏液相当的葡萄糖质量g250——试样定容体积ml10——称取试样质量gV1——滴定消耗稀释试样的体积mlV——滴定所用斐林氏溶液的体积ml3.4总糖53.4.1原理还原糖在特定的条件下，能定量地还原斐林氏溶液中的二价铜为氧化亚铜（Cu2O）红色沉淀，从而可以算出试样中的还原糖含量。3.4.2试剂3.4.2.1（1：4）硫酸溶液量取浓硫酸100毫升，沿玻璃棒慢慢导入400毫升水中，边加边搅匀。3.4.2.220%氢氧化钠溶液称取NaOH20g，加水稀释至100毫升。3.4.2.3斐林氏溶液见3.3.2.1条。3.4.2.40.5%次甲基兰指示剂见3.3.2.3条。3.4.3试验步骤3.4.3.1称取糖化醪试样10ml，加水30毫升，加入浓硫酸7ml，摇匀，塞上带有1米和玻璃管的橡皮塞，置于带石棉网的电炉上加热，至试液沸腾后开始计时，煮沸5分钟，立即取出冷却，用20%氢氧化钠溶液中和到微酸性（用PH试纸检查），过滤于250毫升容量瓶中，用水多次冼涤滤渣，定容至250毫升。3.4.3.2定糖见3.3.3.2条4.4.4计算见3.3.4条3.5糖化率的计算6糖化率%=还原糖÷总糖×1004.精密度计算数据保留一位小数，报告其结果。5.检验规则每罐每班次化验两次，报告其结果。二、发酵醪1.技术要求：2.采样用自制铁筒从发酵罐中取样。3.试验方法3.1酒精份的测定3.1.1原理利用酒精沸点较低、易挥发的特性，通过加热蒸馏，将酒精--水混合蒸汽和醪液分离，再将蒸汽冷却为液体，用酒精计测量其馏液的酒精含量。3.1.2仪器酒精计0~12%3.1.3试验步骤量取发酵醪100.0ml，注入500ml三角瓶中，加水100ml，将三角瓶和冷凝器连接好，注意勿使其漏气，在电炉上加热蒸馏，馏出液收集于100ml容量瓶或100ml项目指标酒精含量%（v/v）还原糖%总糖%挥发酸ml总酸ml7量筒中，待馏出液达到刻度为止。摇匀，倒入100ml量筒中，以酒精计与温度计同时测其酒度和温度，然后查酒精度和温度校正表，校正为200C时的酒度。注：有直接蒸馏法所得馏出液，通常会有微量醛、酯和挥发酸等杂质，影响酒精读数，可在蒸馏前加入1mol/l氢氧化钠4ml，中和挥发酸类，以消除影响，但测定挥发酸时需另制蒸馏液。3.2挥发酸3.2.1原理糖化醪中的有机酸，以酚酞为指示剂，采用氢氧化钠进行中和滴定，其反应式为：RCOON＋NaOH→RCOONa＋H2O3.2.2试剂3.2.2.11%酚酞指示剂称取酚酞1.0克，溶于60ml乙醇中，用水稀释至100ml。3.2.2.20.1mol/l氢氧化钠标准溶液。a、配制将氢氧化钠配成饱合溶液，注入塑料瓶中，封闭放置至溶液清亮，使用前虹吸上清液。量取5ml氢氧化钠饱和溶液，注入1000ml不含二氧化碳的水中，摇匀。b、标定称取于105~1100C烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾0.6g(称准至0.0001g)，溶于50ml不含二氧化碳的水中，加入酚酞指示液2滴，以新制备的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红色为终点。同时做空白试验。c、计算8氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度（c）按下式计算c=m÷〖(v-v1)×204.2×1000〗式中：c——氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度mol/lm——基准邻苯二甲酸氢钾的质量gv——滴定时消耗氢氧化钠溶液的体积mlv1——空白试验消耗氢氧化钠溶液的体积ml204.2——邻苯二甲酸氢钾摩尔浓度mg3.2.3试验步骤吸取测定酒精份的馏液10.00ml，于250ml三角瓶中，加1%酚酞指示剂2滴，用0.1mol/l氢氧化钠溶液滴定至微红色在30秒内不消失为终点。3.2.4计算以10ml试样消耗0.1mol/l氢氧化钠溶液毫升数表示酸度=VC÷〖V1×10×0.1〗式中：V——氢氧化钠标准溶液浓度。mol/lC——氢氧化钠标准溶液体积。mlV1——试样量。ml3.3还原糖3.3.1试剂3.3.1.1（1：4）硫酸溶液量取浓硫酸100毫升，沿玻璃棒慢慢导入400毫升水中，边加边搅匀。3.3.1.220%氢氧化钠溶液称取NaOH20克，加水稀释至100毫升。3.3.1.3斐林氏溶液9见4.3.2.1条。3.3.1.40.5%次甲基兰指示剂见4.3.2.3条。3.3.2试验步骤3.3.2.1取发酵醪液过滤，备用。3.3.2.2定糖a、预备试验吸取斐林氏甲、乙液各2.5毫升，于250毫升三角瓶中，加水20毫升，摇匀，置于有石棉铁丝网的电炉上，加热至沸腾，用滴定管逐滴滴入糖液，滴定时应保持沸腾，待试液蓝色即将消失时，滴入0.5%次甲基兰2滴，试液复呈蓝色，摇匀，继续滴入糖液至蓝色消失呈现红色时为终点，全部滴定应在3分钟内完成。b、正式试验吸取斐林氏甲、乙液各2.5毫升，于250毫升三角瓶中，加水20毫升，摇匀，一次加入少于预备试验消耗糖液约1毫升的糖液，加热沸腾2分钟，加入0.5%次甲基兰2滴，摇匀，继续滴入糖液至蓝色消失呈现红色时为终点，自沸腾开始应在3分钟内结束。3.3.3计算还原糖=MV÷〖V1×100〗式中：V——斐林氏溶液体积mlN——滴定1ml斐林氏溶液，相当的葡萄糖质量gV1——消耗糖液体积ml3.4总糖103.4.1试剂3.4.1.1（1：4）硫酸溶液量取浓硫酸100毫升，沿玻璃棒慢慢导入400毫升水中，边加边搅匀。3.4.1.220%氢氧化钠溶液称取NaOH20克，加水稀释至100毫升。3.4.1.3斐林氏溶液见4.3.2.1条。3.4.1.40.5%次甲基兰指示剂见4.3.2.3条。3.4.2试验步骤3.4.2.1称取发酵醪50ml，于250ml三角瓶中，加1：4硫酸50ml，摇匀，塞上带有1米长玻璃管的橡胶塞，置有石棉网的电炉上加热，到试液沸腾开始计时，煮沸7分钟，立即取下冷却，用20%氢氧化钠溶液中和至微酸性（用PH试纸检查），过滤于250ml容量瓶中，用水多次洗涤滤渣，定容至250ml。3.4.3计算总糖%=MV×250÷〖50×V1〗×100式中：V——斐林氏溶液体积mlN——滴定1ml斐林氏溶液相当的葡萄糖质量gV1——滴定消耗糖液体积ml4.精密度计算数据保留一位小数，报告其结果。5.检验规则发酵醪以发酵罐为单位，发酵完毕，在送蒸馏前2小时，由酒精车间化验室值11班化验员按本标准取样化验。三、酒母1.技术要求2.取样酒母接种前自酒母罐取糖化醪液，化验基础酸，方法与糖化醪酸度相同。成熟酒母在出罐前搅拌均匀，取样。取样器具应经过灭菌。3.试验方法3.1酸度3.1.2试剂3.1.2.11%酚酞指示剂：称取酚酞1.0克，溶于60ml乙醇中，用水稀释至100ml。3.1.2.20.1mol氢氧化钠标准溶液。a、配制将氢氧化钠配成饱合溶液，注入塑料瓶中，封闭放置至溶液清亮，使用前虹吸上清液。量取5ml氢氧化钠饱和溶液，注入1000ml不含二氧化碳的水中，摇匀。b、标定称取于105~1100C烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾0.6g(称准至0.0001g)，溶于50ml不含二氧化碳的水中，加入酚酞指示液2滴，以新制备的氢氧化钠溶液滴项目指标酸度ml细胞数亿/ml芽生率%12定至溶液呈微红色为终点。同时做空白试验。c、计算氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度（c）按下式计算c=m÷〖(v-v1)×204.2×1000〗式中：c——氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度mol/lm——基准邻苯二甲酸氢钾的质量gv——滴定时消耗氢氧化钠溶液的体积mlv1——空白试验消耗氢氧化钠溶液的体积ml204.2——邻苯二甲酸氢钾摩尔浓度mg3.1.3分析步骤吸取糖化醪滤液1.0ml于250ml三角瓶中，加中性蒸馏水30ml和1%酚酞指示剂2滴，用0.1mol/l氢氧化钠滴定至微红色在30秒内不消失为终点。3.1.4计算以10ml试样消耗0.1mol/l氢氧化钠溶液毫升数表示酸度=V÷〖V1×10×0.1〗式中：V——氢氧化钠标准溶液浓度。mol/lC——氢氧化钠标准溶液体积。mlV1——试样量。ml3.2细胞数3.2.1仪器3.2.1.1血球计有两个计数室，每个均刻有25个大方格，每个大方格又分为16个小方格，共计400个小方格。133.2.1.2盖玻片3.2.1.3显微镜400~1500倍3.2.2试剂0.1%次甲基兰溶液：