检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质

L/O/G/O检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质2011-10-8实验实验还原性糖的鉴定脂质的鉴定蛋白质的鉴定Clicktoaddtitleinhere4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定（一）还原糖的鉴定1、实验原理NaOH+CuSO4→Cu(OH)2蓝色沉淀+……Cu(OH)2+还原糖→Cu2O砖红色沉淀+……（水浴条件：50℃---65℃）葡萄糖等还原糖分子中存在醛基等还原性基团能与斐林试剂作用生成砖红色沉淀。斐林试剂：甲液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液乙液：质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液材料TextinhereTextinhereTextinhere①材料要含有丰富还原糖②材料颜色为白色或近于白色以免造成干扰选材原则富含还原糖富含蔗糖含淀粉但还原糖很少颜色干扰富含蔗糖富含还原糖2、实验步骤反应初始反应结束砖红色对照蓝色棕色砖红色3、注意事项要选择含还原糖丰富，颜色为白色或近于白色的植物组织斐林试剂不稳定，一般配成甲液、乙液来分别配制、储存。使用时将甲液、乙液等量混合均匀，现配现用1、材料选取2、斐林试剂对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要触及烧杯底部；试管口不要朝向实验者3、水浴加热实验还原性糖的鉴定脂肪的鉴定蛋白质的鉴定Clicktoaddtitleinhere4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定（二）淀粉鉴定1、实验原理2、选材选择淀粉含量高，颜色近于白色的生物组织，如马铃薯块茎研磨液淀粉遇碘会变成蓝色3、过程及结果向2ml组织样液中加两滴碘液，摇匀后变成蓝色（三）脂肪的鉴定1、实验原理脂肪可被苏丹Ⅲ染成橘黄色苏丹Ⅳ染成红色苏丹Ⅲ材料选择富含脂肪且比较大的种子，成熟花生种子是最好的选择，实验前浸泡3～4小时时间过长：组织太软，切下的薄片，不易成形时间过短：不容易切片2、实验步骤注意事项切片要尽可能薄，观察时要找最薄处，最好只有1～2层细胞染色后一定要用体积分数为50﹪的酒精溶液洗去浮色用苏丹Ⅲ染色时间不宜过长，否则脂肪会溶解在苏丹Ⅲ溶液中的酒精里3、注意事项实验还原性糖的鉴定脂肪的鉴定蛋白质的鉴定Clicktoaddtitleinhere4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定（四）蛋白质的鉴定1、实验原理蛋白质与双缩脲具有相同的结构------肽键，能在碱性环境下与双缩脲试剂中的Cu2+产生紫色络合物双缩脲试剂A液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液B液：质量浓度为0.01g/ml的CuSO4溶液注：双缩脲与双缩脲试剂不同。材料：浸泡1～2天的大豆种子（或豆浆）或鸡蛋蛋白，也可用鲜肝提取液2、实验步骤3、注意事项实验样液要留出一份作为对照（还原糖、淀粉的鉴定也要留出样液进行对照）使用双缩脲试剂时，应先加A液造成碱性环境，再加B液若使用蛋清，必须按要求稀释，如果稀释不够会粘附于试管壁上，不易洗刷拓展：斐林试剂与双缩脲试剂的对比斐林试剂双缩脲试剂鉴定成分还原糖蛋白质鉴定原理还原糖中的醛基在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+，从而生成砖红色Cu2O沉淀双缩脲在碱性溶液中能与Cu2+结合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键，因而也能与Cu2+作用试剂浓度甲液：质量浓度为0.1g/mol的NaOH溶液，乙液：质量浓度为0.05g/mol的CuSO4溶液A液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液B液：质量浓度为0.01g/ml的CuSO4溶液使用方法甲液、乙液等量混合均匀后再加入样液先加A液造成碱性环境后，再加B液使用条件水浴加热（50℃---65℃）不加热实验现象浅蓝色棕色砖红色紫色•唯一用到显微镜的实验——脂质的鉴定•唯一需要加热的实验——还原糖的鉴定•非还原糖中加入斐林试剂现象：不是无色而是蓝色典型例题分析：1、在“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”的实验中提供了如下备选实验材料：苹果、白萝卜、大米、韭菜的叶、核桃、油菜籽、黄豆。【分析】实验成功的关键之一是科学选择实验材料，具体分析如下：(1)检测还原糖时，为什么不选取白萝卜或韭菜的叶？提示：白萝卜含还原糖很少，不符合选材的要求；韭菜的叶中含有叶绿素，不利于实验现象的观察。(2)检测脂肪时，为什么不选取核桃？提示：核桃的种子虽然含有丰富的脂肪，但核桃的果皮坚硬，种皮又有颜色，不容易去除。(3)如果把黄豆浸泡萌发成黄豆芽，能利用黄豆芽检测蛋白质吗？提示：不能，因为黄豆萌发成黄豆芽，消耗了蛋白质。2.鉴定某脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，不需用的化学试剂是()A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲D.甲基绿【解析】选D。甲基绿是对DNA染色，染成绿色。拓展：健康人体中，能与双缩脲试剂发生紫色反应的是（）尿素胃液汗液唾液3.以花生子叶为材料进行脂肪的检测时，制作临时装片的正确步骤是()①盖盖玻片②切子叶③苏丹Ⅲ染液染色④滴加蒸馏水⑤酒精洗去浮色A.④②①③⑤B.②④①③⑤C.④②③①⑤D.②③⑤④①【解析】选D。制作临时装片的步骤包括切片、制片，其中制片过程又包括染色、洗去浮色、滴加蒸馏水和盖盖玻片。4.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机化合物的检测实验中，以下操作错误的是()A.只有脂肪的检测需要使用显微镜B.用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热C.斐林试剂和双缩脲试剂最好是现用现配D.可溶性还原糖的检测，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀【解析】选D。斐林试剂包括甲液和乙液，使用时一定要现用现配，双缩脲试剂最好也是现用现配，因为成分中的Cu2+容易沉淀；斐林试剂检测还原糖时一定要50℃～65℃水浴加热，而使用双缩脲试剂检测蛋白质时则不需要加热；这个实验中只有脂肪的检测需要使用显微镜。