30医学微生物学课件--第8章-肠杆菌科

第8章肠杆菌科是一大群生物学性状相似的革兰氏阴性短小杆菌，有的为致病菌，多为肠道内正常菌群，可引起医院感染。肠道杆菌共同特点形态结构G—小杆菌，钝圆杆菌，无芽孢，多数有鞭毛及菌毛培养特性需氧或兼性厌氧营养要求不高，普通培养基可生长，菌落相似，形成灰白色中等大小S型菌落。肠道选择培养基：2020/6/24医学微生物学2020/6/24医学微生物学EMB（伊红——美兰培养基），乳糖、伊红、美兰选择作用（弱选）大肠埃希菌（非致病菌）乳糖发酵产酸伊红结合美兰形成紫黑色金属光泽化合物有色的乳糖发酵菌落伤寒沙门菌等（致病菌）乳糖不发酵伊红美兰不能结合无色的乳糖不发酵菌落2020/6/24医学微生物学EMB平板上的E.coliSS培养基（沙门志贺培养基）乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂选择抑制作用（强选）大肠埃希菌产酸桃红色乳糖发酵菌落伤寒沙门菌无色乳糖不发酵菌落胆盐、煌绿：抑制大肠埃希菌及G+菌，提高肠道致病菌检出率乳糖发酵中性红呈红色乳糖不发酵生化反应活跃，常用于鉴别肠道杆菌抵抗力不强，60℃30min即可灭活抗原结构复杂菌体（O）抗原鞭毛（H）抗原表面（K、Vi）抗原易出现各种变异第一节大肠杆菌（埃希菌属）生物学性状形态染色符合肠杆菌特点，周毛菌，有菌毛培养特性符合肠杆菌特点EMB——紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落S-S——桃红色生化反应IMViC（++--）抗原O抗原（O1---O173）H抗原（H1---H56）K抗原（K1---K100）血清型表示法：O：K：H致病性致病物质除内毒素、荚膜肠杆菌科共有的毒力因子外，大肠埃希菌具有独特的毒力因子有：•黏附素——具有高度特异性吸附、定植、致病•外毒素（由ETEC产生的肠毒素）（1）不耐热肠毒素（LT），分LT-I和LT-Ⅱ两型蛋白质对热不稳定，与霍乱肠毒素相似A亚单位——毒素活性成分机制B亚单位——与肠上皮细胞受体（GM1神经节苷脂）结合B单位与受体结合→导致A进入细胞内→激活腺苷酸环化酶ATPCAMP↑小肠液过度分泌肠腔积液、腹泻（2）耐热肠毒素（ST），分STa、STb两型为低分子多肽，对热稳定机制为激活细胞鸟苷酸环化酶，使cGMP↑导致腹泻LT和ST同时存在，致病性更强E.coli的不耐热肠毒素所致疾病：•肠道外感染（内源性感染）化脓性感染——定位转移腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、败血症、新生儿脑膜炎等泌尿道感染——病原菌来自病人肠道（上行性）占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等）•肠道感染——胃肠炎（腹泻），（外源性感染）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）：婴幼儿、旅游者腹泻，与霍乱功能相似肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）：成人腹泻，与菌痢相似肠致病性大肠埃希菌（EPEC）：婴儿腹泻（水样腹泻）肠出血性大肠埃希菌（EHEC，O157）：出血性结肠炎，溶血性尿毒综合征（HUS）肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）：婴儿腹泻（持续性）微生物学检查与防治肠道外感染标本→涂片、染色→分离培养→鉴定尿路感染时每ml尿含菌≥10万，有诊断价值肠道内感染用弱选择性培养基分离培养+生化反应+血清分型+毒素测定+核酸检测等卫生细菌学检查每1000ml水中大肠杆菌≤3个，每100ml瓶装汽水、果汁中，大肠杆菌≤5个第二节志贺菌（痢疾杆菌）生物学性状形态染色符合肠杆菌特征，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区别点培养特性肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落生化反应葡萄糖（+）、乳糖（-）（宋内志贺菌迟缓发酵乳糖）、H2S-、尿素（-）抗原分类——根据O抗原分4群，40余型A群——痢疾志贺菌（10）B群——福氏志贺菌（13）C群——鲍氏志贺菌（18）D群——宋氏志贺菌（1）抵抗力比其它肠杆菌弱，尤其对酸敏感致病性与免疫性致病物质侵袭力——黏附肠黏膜上皮细胞——Ⅲ型分泌系统—穿透上皮细胞并扩散、传播内毒素——强烈内毒素，作用于局部并可吸附入血引起全身症状外毒素——A群（Ⅰ、Ⅱ型）产生志贺毒素（ST）,阻断蛋白质的合成细菌（菌毛）吸附肠黏膜上皮细胞穿入细胞并扩散周围及深入黏膜下层释放内毒素、外毒素肠局部黏膜炎症（变性、坏死、脱落）出血、坏死、溃疡脓血便/黏液血便刺激肠壁植物神经肠蠕动↑肠肌痉挛腺体分泌↑水分吸收↓腹痛、腹泻刺激直肠肛门括约肌里急后重便数增加吸收入血发热、白细胞↑高热、休克中毒性脑病DIC死亡毒血症中毒性菌痢所致疾病——细菌性痢疾传染源：病人、带菌者传播途径：经口临床类型急性菌痢中毒性菌痢慢性菌痢免疫力不牢固，易再感染微生物学检查与防治微生物学检查分离鉴定毒力实验快速诊断防治更有效的疫苗还在研制中，此菌极易出现耐药性，依药株。第三节沙门菌属是肠杆菌科中最复杂的菌属，有2000种以上血清型对人类有致病性肠热症——伤寒沙门菌，甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌食物中毒——鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌败血症——猪霍乱沙门菌最常见生物学性状形态染色符合肠杆菌特点，多为周毛菌，有菌毛伤寒杆菌的周身鞭毛培养特性EMB、SS上呈无色透明乳糖不发酵菌落麦康凯培养基上的伤寒杆菌菌落EMB培养基，上为E.coli，下为伤寒杆菌生化反应乳糖（-），葡萄糖（+），多数H2S+，动力+，尿素（-）抗原结构O抗原——特异性低、稳定、分群（组）H抗原——特异性高，不稳定，分型Vi抗原（毒力抗原）——不稳定，可阻止“O”凝集抵抗力不强致病性与免疫性致病物质侵袭力•菌毛——吸附•Ⅲ型分泌系统——穿入细胞，扩散•Vi抗原——微荚膜（抗吞噬）内毒素外毒素——个别（鼠伤寒沙门菌）产生，与ETEC肠毒素相似所致疾病菌毛穿入淋巴液胸导管第二次菌血症迟发型变态反应肠壁坏死、溃疡高热、肝脾肿大、玫瑰疹、白细胞↓等全身中毒症状肝脾肾淋巴结胆囊尿排菌粪便排菌发病期（1-4W）潜伏期2W肠热症伤寒沙门菌等经口吸附小肠黏膜细胞上在肠壁、肠系膜淋巴组织中繁殖（致敏）血流（第一次菌血症）肠出血、肠穿孔1、肠热症临床过程潜伏期2W发病期：高热、肝脾肿大、皮疹、WBC↓等全身中毒症状，此期血液（80%）、骨髓（90%（+）有大量细菌。随着病情的发展，全身症状持续加重，此期血、骨髓中仍有菌，但粪便（60%）、尿（20%）、皮疹液中可查到细菌，由于Ⅳ型变态反应——并发症发生，血液抗体达到阳性标准——肥达反应恢复期：第四周末，体温下降，症状消失，恢复期带菌1年（粪便仍阳性），血液抗体仍高。2、胃肠炎（食物中毒）潜伏期短，6-24h，起病急，病程短2-4天，发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻3、败血症经口感染，经肠道入血，败血症症状明显而肠道症状不明显4、带菌者健康带菌者，恢复期带菌者免疫性肠热症，病后有一定免疫力，可重复感染伤寒杆菌感染示意图微生物学检查与防治分离培养与鉴定标本采取肠热症：1W取血，2W取粪便，3W取尿液，1－3W取骨髓液食物中毒：粪便、呕吐物、可疑食物败血症：血带菌者：粪便分离鉴定：增菌（血、骨髓）→EMB、SS→生化反应→血清鉴定血清学诊断——肥达反应（Widal）原理用已知伤寒沙门氏菌O抗原及H抗原，以及引起副伤寒的沙门氏菌H抗原与待检血清作凝集试验，测定待检血清中有无相应抗体及其效价。（TO、TH、PA、PB）方法：试管凝集法（定量）TO≥1：80，TH≥1：160，PA、PB均≥1：80才有意义动态观察：双份血清抗体四倍升高有诊断意义临床意义O抗体（IgM），H抗体（IgG）O、H抗体均升高，患伤寒的可能性大O、H抗体不升高，患伤寒的可能性小只有H升高，则可能是预防接种过或非特异性回忆反应，只有O升高而H不高，则可能是感染早期或其他沙门菌的交叉反应。第四节其他菌属克雷伯菌属（7个种）肺炎克氏菌（3个亚种）的肺炎亚种，俗称肺炎杆菌，与人类感染有关G-球杆菌，无动力，有较厚的荚膜，多有菌毛抵抗力低下者易感，常引起医院内感染，如肺炎、支气管炎、泌尿道感染等变形杆菌G-杆菌，有多形性，周身鞭毛，运动活泼，在普通培养基上呈扩散性生长，称为迁徙生长现象变形杆菌的周身鞭毛迁徙生长迅速分解尿素，尿素（++++）为本菌特征，乳糖（-）外斐试验（Weil-Felix）：本菌某些特殊菌株如X19、X2、XK的O抗原与某些立克次氏体有共同抗原成分，临床上应用OX19、OX2、OXK代替立克次氏体抗原与斑疹伤寒或恙虫病患者血清做凝集试验，以辅助诊断立克次体病为条件致病菌原发感染——食物中毒继发感染——尿路感染（仅次于大肠埃希菌）、创伤、腹膜炎、败血症等