结核病防治实验室痰检工作――第二讲 显微镜读片检查

第三章结核病管理及最新进展第一节结核病防治实验室痰检工作第二讲显微镜读片检查准备知识显微镜简图操作步骤镜油显微镜读片检查显微镜读片玻片的保存废弃物的处理痰涂片镜检质量保证质量保证质量控制本节内容导航室间质量评估EQA的组织工作和关键技术措施推行EQA现场评价—内容实验室基本要求－布局生物安全盲法复检批量测试质量提高本节内容导航准备知识显微镜简图操作步骤准备知识镜油（immersionoil)替代香柏油香柏油易干燥凝结，损害油镜头使用擦镜纸清洁物镜，避免用二甲苯擦拭物镜易损坏镜头对人体有害准备知识镜油显微镜读片读片时，首先从痰膜一端由左至右观察相邻的视野当玻片移动到痰膜的另一端时，纵向向下转换一个视野然后从右向左观察避免跳跃或者闭合环状路线显微镜的读片检查红色、杆状、略弯曲显微镜的读片检查显微镜读片“V”-字形显微镜读片显微镜的读片检查成簇的抗酸菌显微镜的读片检查显微镜读片在淡蓝色背景下，抗酸杆菌呈红色，其它细菌和细胞呈蓝色镜检报告：涂片结果报告标准(萋－尼氏抗酸菌染色法)显微镜读片显微镜的读片检查阴性300视野0条报告菌数300视野1～8条阳性1＋100视野3～9条阳性2＋10视野1～9条阳性3＋每视野1～9条阳性4＋每视野10条玻片的保存如果使用显微镜附带的镜油，或者是购买的镜油（immersionoil），而不是香柏油（cedaroil），则不需使用二甲苯，直接使用镜头纸擦拭即可干燥后的玻片，按实验室序号及涂片编号放置在玻片盒中，存放在阴凉干燥环境中。处于潮湿炎热的环境中抗酸菌易于褪色显微镜的读片检查玻片的保存镜检后的玻片上只注明实验序号，不得标注镜检结果全部涂片按实验序号连续排列保存显微镜的读片检查显微镜的读片检查玻片的保存废弃物的处理污染源：所有可能与生物危险物接触或被污染的试验器械和物品，例如痰标本涂抹后的竹签涂片手套口罩帽等废弃物处理方法高压灭菌:高压灭菌是首选的处理方法显微镜的读片检查1废弃物的处理焚烧:如果没有焚烧炉，简单的燃烧是难以彻底杀灭病菌，可能会使病菌扩散化学消毒剂处理：避免使用化学消毒剂处理废弃污染物就直接将其丢弃，很难保证杀灭效果,痰液中的蛋白等物质对消毒剂的杀灭效果影响很大显微镜的读片检查23废弃物处理传染性废弃物对实验员和环境危险性极大在废弃物离开实验室前必须高压灭菌或去污染处理对溅出的标本应以5%石炭酸或者氯制剂进行消毒酚类对标本有效75%酒精：只能皮肤消毒、或擦拭桌椅、台面（注意防火）显微镜的读片检查痰涂片镜检质量保证中国结核病防治规划----痰涂片镜检质量保证手册结核病防治规划系统网络质量控制质量检查和评估提高业务水平痰涂片镜检质量保证质量保证是能持续提高实验室服务效率和可信度的体系，包括室内质量控制、室间质量评估和质量提高质量控制现场评价质量保证室间质量评估盲法复检质量提高批量测试痰涂片镜检质量保证质量控制也称室内质量控制：指实验室内部对实验室服务整个过程各个环节的内部检查和监测质量控制措施日常工作的自我监督染色液的质控质量控制现场评价质量保证室间质量评估盲法复检质量提高批量测试痰涂片镜检质量保证涂片制备和染色、显微镜维护、显微镜镜检、结果登记和报告、以及痰片保存等涂片的自查或互查各种工作应有详尽记录包括：操作规程、设备和耗材、痰标本收集、染色剂制备质量控制痰涂片镜检质量保证质量控制措施室间质量评估室间质量评估（EQA）是根据与其它网络实验室（中间级实验室和中心实验室）比较批量测试和盲法复检结果评价基层实验室能力的过程EQA包括实验室现场评估以评价操作质量并且也包括现场对涂片的复读。EQA是国际肺病和防痨联合会描述的熟练度检测的扩大质量控制现场评价质量保证室间质量评估盲法复检质量提高批量测试痰涂片镜检质量保证-----EQA的组织工作和关键技术措施组织工作：实施技术措施的保障主要组织和实施单位在地市级参比室，但常常力量相对薄弱县级盲法复检的第1复检者由另一个县的实验人员担任市级盲法复验由另一市实验人员担任需策划和协调标本及复检结果的传递痰涂片镜检质量保证室间质量评估科学的抽样方法盲法提高技术水平和责任感按序号排放不分涂阳涂阴玻片不作结果标记复检者不知初检结果痰涂片镜检质量保证关键技术措施室间质量评估-----EQA的组织工作和关键技术措施-----EQA的组织工作和关键技术措施决定样本量有科学依据：全年的复检标本量，取决于前1年的阴性片数量和涂片阳性率。即：其涂片阳性率一定时，阴性片愈多，抽样量愈多（抽出阳性片的概率增高）反之，阴性片量一定时，涂片阳性率愈高，抽样量便愈少（抽到阳性片的概率较高）节省复检数量(不是一概抽取规定的阴、阳性片数量)痰涂片镜检质量保证室间质量评估随机化：决定样本量后，计算出抽样间隔，从哪一张片开始抽取，在现场用简单随机方式决定保证抽样的科学，从而保证复检结果的科学性痰涂片镜检质量保证室间质量评估-----EQA的组织工作和关键技术措施-----推行EQAEQA的实施将为各级细菌学实验室积累大量、有价值的信息（各级EQA信息如何收集应进行研究）为建立和健全细菌学服务网络，检索各实验室的质量，确定重点督导单位，培训重点县、市的实验室人员和培训内容提供可靠依据痰涂片镜检质量保证室间质量评估现场评价—内容房屋及其布局供应：水、电、耗材人力资源实验室安全防护措施显微镜等设备状况质量控制现场评价质量保证室间质量评估盲法复检质量提高批量测试痰涂片镜检质量保证试剂的可用性涂片、染色和镜检操作各个环节玻片保存登记和记录现场复检3张阳性涂片盲法复检痰片抽样痰涂片镜检质量保证现场评价—内容-----实验室基本要求－布局痰涂片镜检质量保证现场评价—内容实验室布局管理废弃物处理化学品的安全事项感染控制痰涂片镜检质量保证现场评价—内容-----生物安全痰涂片镜检质量保证现场评价—内容染色架痰涂片镜检质量保证现场评价—内容染色架痰涂片镜检质量保证现场评价—内容盲法复检原则：样本：随机性、代表性复检：盲法第二复检者最终裁决结果及时反馈和上报质量控制现场评价质量保证室间质量评估盲法复检质量提高批量测试痰涂片镜检质量保证盲法复检对地市实验室的盲法复检：组织实施者：省级参比室第一复检者：地市实验室第二复检者：省级参比室对县级实验室的盲法复检：组织实施者：地市级实验室第一复检者：县级实验室第二复检者：地市级实验室质量控制现场评价质量保证室间质量评估盲法复检质量提高批量测试痰涂片镜检质量保证批量测试指国家或省级参比室向外周实验室发送测试片，以评价外周实验室技术人员的染色和/或读片能力（熟练度测试）主要考核个人的操作技术，而不能代表实验室的整体技术水平质量控制现场评价质量保证室间质量评估盲法复检质量提高批量测试痰涂片镜检质量保证质量提高是通过分析痰涂片镜检诊断服务的各组成部分，寻找能永久清除障碍成功的过程资料收集、分析、创意思路都是这一过程的重要部分它涵盖了连续监测、明确缺陷及后续改正措施，如必要时重新培训以杜绝问题再次发生质量控制现场评价质量保证室间质量评估盲法复检质量提高批量测试痰涂片镜检质量保证