医学微生物学课件--第22章-病毒感染的检查方法与防治原则

2020/6/29医学微生物学第22章病毒感染的检查方法与防治原则2020/6/29医学微生物学第一节病毒感染的检查方法一标本的采集与送检（principleofcollectionspecimen）1、采集急性期标本2、污染标本应用抗生素抑制标本中细菌或真菌的生长3、低温保存，快速送检4、血清学实验检查抗体（双分血清）2020/6/29医学微生物学二、病毒的分离培养与鉴定（virusisolationanddetermination）（一）病毒的分离培养•动物接种选择易感动物及接种部位，观察发病情况•鸡胚培养不同病毒选择不同接种部位（绒毛尿囊膜，尿囊腔，羊膜腔，卵黄囊），分离流感病毒最常用。•细胞培养：分离病毒最常用的方法（1）原代细胞—来源于动物、鸡胚、人胚组织细胞，对多种病毒敏感，但只能传2-3代。（2）二倍体细胞—在体外分裂50-100代后仍保持2倍体染色体数目的单层细胞。（3）传代细胞—能在体外无限传代的细胞多由癌细胞或二倍体细胞突变而来。2020/6/29医学微生物学病毒在培养细胞中增殖的指标•细胞病变效应（CPE）：即某些病毒在细胞内增殖引起的特有的细胞病变（细胞变圆、聚集、坏死、脱落等）•红细胞吸附•干扰现象•细胞代谢改变（pH）2020/6/29医学微生物学正常细胞病变细胞2020/6/29医学微生物学（二）病毒的鉴定核酸类型、理化性状、形态、血清学鉴定、基因测序和生物对比。（三）病毒的数量与感染性测定1.50％组织细胞感染量2.红细胞凝集试验3.空斑形成试验2020/6/29医学微生物学三、病毒感染的血清学诊断用已知病毒抗原检测病人血清中相应抗体以诊断病毒性疾病（中和实验、补体结合实验、血凝抑制实验、凝胶免疫扩散等）2020/6/29医学微生物学四、病毒感染的快速诊断(一)形态学电镜和免疫电镜——直接观察病毒光镜——大病毒和包涵体2020/6/29医学微生物学2020/6/29医学微生物学2020/6/29医学微生物学2020/6/29医学微生物学2020/6/29医学微生物学2020/6/29医学微生物学2020/6/29医学微生物学（二）检测病毒蛋白抗原用已知特异性抗体直接检测病毒蛋白抗原（简便、敏感、特异）常用方法：免疫荧光技术（IF）固相放射免疫测定（SPRIT）酶免疫技术（EIA）等。2020/6/29医学微生物学（三）检测病毒特异性IgM抗体检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染或证明病毒复制。2020/6/29医学微生物学（四）检测病毒核酸1核酸杂交–斑点杂交（dothybridization）–原位杂交（insitehybridization）–DNA印迹杂交（Southernblot）–RNA印迹杂交（northernblot）2核酸扩增–聚合酶链反应（polymerasechainreaction，PCRDNA）–连接酶链反应（ligasechainreaction，LCR）–反转录PCR（ReversetranscrptasePCR，RT—PCR(RNA)3基因芯片技术（genechip）2020/6/29医学微生物学第二节病毒感染的特异性预防一、人工主动免疫1、灭活疫苗2、活疫苗3、重组载体疫苗4、亚单位疫苗二、人工被动免疫1、免疫球蛋白2、细胞免疫制剂2020/6/29医学微生物学第三节病毒感染的治疗•药物治疗–核苷类药物——抑制病毒基因复制——抑制病毒基因转录–蛋白酶抑制剂–天然药物（中草药）–其他药物（金刚烷胺）•干扰素及干扰素诱生剂治疗•基因治疗（反义寡核苷酸、抑制病毒复制）•免疫治疗（特异性抗体、免疫调节剂、治疗性疫苗等