Agilent-2100实验标准操作说明

Agilent2100实验标准操作规程1.2.准备凝胶染料混合液Gel-DyeMix1.2.1.取出AgilentDNA1000试剂盒中的DNA浓缩染料(蓝色)和DNA凝胶（红色），平衡试剂到室温。大约30min。1.2.2.涡旋DNA浓缩染料（蓝色），然后用移液器吸取25ul染料，添加到一管DNA凝胶中（红色）。1.2.3.充分涡旋混合液，离心。转移到过滤柱中。1.2.4.2240g±20%，离心15min。溶液避光保存在4°C。1.3.加载凝胶染料混合液Gel-DyeMix1.3.1.在实验操作前30min取出凝胶染料混合液室温平衡。1.3.2.取一块新的DNA芯片，放在芯片注胶平台上。1.3.3.吸取9ul凝胶染料混合液加到标记有G的孔内。1.3.4.确保注射器柱塞定位在1ml然后关闭芯片注胶平台。1.3.5.按压柱塞，直到被夹子卡住。1.3.6.等待计时60S，然后松开夹子。1.3.7.等待5S，然后拉回柱塞到1ml的位置。1.3.8.打开芯片注胶平台，吸取9ul凝胶染料混合液加到其他标记有G的孔内。1.4.加载标记物Markers吸取5ulMarker（绿色）加到12个样品孔内和Ladder孔内，不要让任何孔空着。1.5.加Ladder和加样1.5.1.吸取1ulDNALadder（黄色）到标记有梯子的孔内。1.5.2.其他12个样品孔内，需要使用的孔内添加1ul样品，不需要使用的孔内，添加1ul去离子水。1.5.3.将芯片水平的放在芯片涡旋振荡器上，2400rpm涡旋1min（计时器计时）。1.5.4.5min之内芯片必须放在Agilent2100上，按照软件提示进行DNA电泳操作。1.6.上机1.6.1.打开电脑电源和仪器的电源。1.6.2.双击桌面上Agilent2100的软件图标，进入系统。1.6.3.在实验开始之前，先将清洗电极用的CleanerChip注满超纯水，放在芯片平台上，盖上仪器的盖子，清洗15s左右，打开仪器盖子，取出CleanerChip。、1.6.4.将之前加完样本的芯片放在仪器芯片平台上，盖上仪器的盖子，按照软件提示点击软件上的Start按钮，进行DNA电泳操作。2.维护保养2.1.实验结束后，将芯片从仪器中取出，换上注满超纯水的CleanerChip，清洗电极15s，然后打开仪器盖子，取出CleanerChip。2.2.关闭Agilent2100的软件，关闭仪器电源，电脑关机并拔出电源插头。2.3.常规清洁。用沾有纯化水的清洁布将仪器表面擦拭干净。2.4.维护保养。用清洁布将仪器表面擦拭干净；再用沾有清洁剂的的清洁布将仪器擦拭一遍，清洁剂用0.05%84消毒液或0.1%新洁尔灭；然后再用沾有纯化水的清洁布擦拭三遍；最后用清洁白布擦干，且无不洁痕迹。必要时可用75％的乙醇对仪器的外壳、芯片平台及电极进行消毒。建议每月一次。3.参考资料3.1.《Agilent2100_UserGuide》