消毒灭菌监测方法

医院消毒灭菌效果监测及医院环境卫生学监测医院感染管理科xxx2018.2.7卫生部《医院感染管理规范》医院必须对消毒、灭菌效果定期进行监测；灭菌合格率必须达到100%；不合格的物品不得进入临床使用部门。医院消毒灭菌效果监测的目的：是预防医院内感染的重要措施之一。对消毒效果的监测是评价：其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段。是无菌技术操作及隔离技术的基础。因此消毒灭菌效果监测是保证医院消毒灭菌质量的重要措施。热力灭菌效果监测：包括，压力蒸汽、干热紫外线消毒效果监测；医疗器械消毒灭菌效果监测：使用中消毒剂的监测；医院环境卫生学监测：包括，空气、工作人员手、物体表面医院消毒灭菌效果监测的内容压力蒸汽灭菌器的分类：根据排放空气的方式和程度不同可分为：下排气式压力蒸汽灭菌器预真空、脉动真空压力蒸汽灭菌器一、压力蒸汽灭菌效果监测压力蒸汽灭菌效果监测方法包括：A、物理监测B、化学监测C、生物监测工艺监测的主要项目：(必须每锅进行)①物品的包装体积、重量：下排气式：≤30cm×30cm×25cm预真空：≤30cm×30cm×50cm金属包的重量不超过7kg；敷料包不超过5kg快速蒸汽：一般无包装工艺（物理）监测（程序监测）按照经过试验所确定的灭菌工艺和有关参数进行检查，以判断灭菌是否按照规定的条件进行②排气情况：灭菌温度灭菌时间压力每次灭菌应做详细记录包括：每锅锅号、压力、温度、时间、灭菌物品、灭菌操作者签名压力蒸汽灭菌所需压力、温度、灭菌时间灭菌器名称压力温度维持灭菌时间下排气102.9kpa（1.05kg/cm2）121℃20-30min预真空、脉动真空205.8kpa（2.1kg/cm2）132℃4min下排气：装量不超过柜室内容量80%B、化学监测包括：①包内指示卡(121℃、132℃）、②包外指示胶带•要求：指示胶带每包外必贴；指示卡每包包内必放。•结果判断：灭菌包，指示卡（带）由米色变成黑色，表示达到灭菌条件注意事项：包外化学指示胶带：根据变色情况，只能代表物品是否已经灭菌，仅仅起到一个鉴别作用，不能代表灭菌是否彻底。包内化学指示卡：可以准确反映灭菌的时间、温度和饱和蒸汽的综合变化，是鉴定每一个包裹内部的情况，指示卡（米黄色区域）与对照色块颜色相符，表示灭菌彻底。C、生物监测1）压力蒸汽灭菌器：采用“自含式生物指示剂”每周每台灭菌器进行一次（指示菌株采用耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢）2）新灭菌设备和维修后在投入使用前，应进行生物监测，合格后方可以投入使用。【方法】1、使用时，将生物指示剂放入标准检测包（16条41*66cm全棉手术巾叠放成23*23*15cm）的中心或待灭菌物品包的中心，置于灭菌器的难消毒的位置按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。2、灭菌完毕，即刻将生物指示剂取出，盖朝上垂直握于手中，用专门工具夹碎管内安瓶，让培养液流出浸没菌片，置于56℃恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果，48小时观察最终结果。生物监测二、紫外线消毒效果监测•紫外线消毒的监测，必须进行：A、日常监测B、化学监测C、生物监测日常监测：使用时记录：新灯管启用日期、灯管使用照射时间、累计照射时间、擦管时间、化学及生物监测结果记录二、紫外线消毒效果监测紫外线灯在使用过程中，应该保持清洁，一般每周一次用75%酒精棉球擦拭一次，发现灯管表面有灰尘、油污时应该及时擦拭；二、紫外线消毒效果监测B、化学监测及方法要求：每季度1次主要监测使用中灯管的照射强度。新灯管要进行抽样监测。监测方法：①采用紫外线消毒灯强度监测化学指示卡（必须经过卫生部批准认可，并在有效期内使用）；注意擦干净紫外线消毒灯管并将其打开5分钟；将紫外线消毒灯强度监测化学指示卡垂直平放于灯管一米处，有图案一面朝上，照射1分钟，（照射后，图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色，）观察指示卡色块的颜色与其标准色块比较，读出照射强度。结果判定：普通30W直管型紫外线灯，新灯辐照强度≥90µW/cm2，为合格；使用中紫外线灯辐照强度≥70µW/cm2，为合格；30W高强度紫外线新灯的辐照强度≥180µW/cm2，为合格。C、生物监测：经紫外线消毒后的物品或空气中的自然菌应减少90.00%以上，人工染菌杀灭率达到90.00%。⑴空气消毒效果的监测：空气培养⑵表面消毒效果的监测：物体表面采样各种医疗用品消毒灭菌后国家卫生标准：1、进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。2、接触粘膜的医疗用品，细菌菌落总数应≤20cfu/g或≤20cfu/100cm2；不得检出致病性微生物。3、接触皮肤的医疗用品，细菌菌落总数应≤200cfu/g或≤200cfu/100cm2；不得检出致病性微生物。卫生部《医院感染管理规范》规定：必须对使用中的消毒剂、灭菌剂，进行生物和化学的监测。使用中的消毒剂国家卫生标准：细菌菌落总数应≤100cfu/ml，致病性微生物不得检出。三、消毒灭菌剂监测化学监测要求应该根据消毒剂、灭菌剂的性能定期监测。含氯消毒剂、过氧乙酸、戊二醛（作为消毒剂使用）等：应该每日监测浓度，并做好记录；消毒剂使用的时间不得超过产品说明书规定的使用期限戊二醛（作为灭菌剂使用）：每周不少于1次监测浓度；应同时对消毒、灭菌的物品进行消毒灭菌效果的监测消毒物品，不得检出致病性微生物；灭菌物品，不得检出任何微生物①含氯消毒剂浓度测试纸：测定时，半分钟内，在自然光下与标准色块比较，读出溶液所含的有效成分浓度值。时间超过1分钟，颜色即逐渐消退。化学监测①戊二醛浓度测试纸操作方法：从小瓶中取出一条试纸，并旋紧瓶盖；将指示色块完全浸没于戊二醛溶液，并及时取出；用吸水纸吸取多余的液体；横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝下；等候3~8分钟的颜色变化，判读结果。（低于3分钟，颜色变化不彻底结果不正确；超过8分钟，颜色逐渐褪去，也使判读困难）化学监测戊二醛浓度试纸操作操作结果判定：指示色块变成均匀黄色时，说明溶液的有效浓度高于所测最低有效浓度。指示色块全部或仍有部分白色，说明溶液的有效浓度低于最低有效浓度。医院环境卫生学监测内容包括：A、定期进行空气培养B、定期进行物体表面培养C、定期进行工作人员手培养四、医院环境卫生学监测医院环境分类：Ⅰ类：层流手术室、层流洁净病房Ⅱ类：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房Ⅲ类：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、检验科、各类普通病房和房间Ⅳ类：传染病科及病房四、医院环境卫生学监测卫生部《医院感染管理规范》规定：医院应每月（季度）对手术室、产房、母婴室、供应室无菌区、治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。当有医院感染流行时，怀疑医院环境卫生学因素有关时，应该及时进行监测。四、医院环境卫生学监测A、空气消毒效果监测方法1、采样时间：在消毒处理后、操作前进行采样。2、采样方法：平板暴露法；（或空气采样机）1）布点方法：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1M处；室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1M处。2）采样方法：将普通营养琼脂肪平板（直径9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5m，采样时将平板打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。四、医院环境卫生学监测空气监测：（用直径9cm平皿）空气监测：（平皿打开方式）4、判断结果：非洁净手术室、产房、烧伤病房≤4cfu/（15min•直径9cm平皿）儿科、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、消毒供应室、急诊室、化验室、各类普通病室及其病房空气中的细菌菌落数总数≤4cfu/（5min•直径9cm平皿）5、注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样B、物体表面消毒效果监测方法1、采样时间：在消毒处理后进行采样。2、采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个；用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子；剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml的无菌洗脱液试管中，立即送检。门把手等不规则物体表面直接用棉拭子涂擦采样。四、医院环境卫生学监测四、医院环境卫生学监测B、物体表面消毒效果监测方法3、检测方法：1）细菌总数检测：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次；用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿；平皿内加入已熔化的45℃-48℃的营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固；置36℃±1℃温箱培养48小时，计算菌落数。四、医院环境卫生学监测B.物体表面消毒效果监测方法2）致病菌检测：原则：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。(常规检测如：金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌）四、医院环境卫生学监测B、物体表面消毒效果监测方法4、结果判定：儿科、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、消毒供应室、急诊室、化验室、各类普通病室及其病房物体表面的细菌菌落数总数≤10cfu/（5min•直径9cm平皿）并不得检出致病性微生物为消毒合格。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。C、工作人员手消毒效果监测方法1、采样时间：在消毒后立即采样。2、手采样方法：被检人五指并拢，用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2）；并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位；将棉拭子投入10ml的（或含有相应中和剂）无菌洗脱液试管内，立即送检。四、医院环境卫生学监测四、医院环境卫生学监测C、工作人员手消毒效果监测方法3、检测方法：1）细菌总数检测：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次；用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿；内加入已熔化的45℃~48℃的营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固；置36℃±1℃温箱培养48小时，计算菌落数。四、医院环境卫生学监测C、工作人员手消毒效果监测方法3、检测方法：2）致病菌检测：原则：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。四、医院环境卫生学监测C、工作人员手消毒效果监测方法4、结果判断：母婴同室、婴儿室、新生儿及儿科病房的工作人员手不得检出沙门菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌，为消毒合格。D、皮肤粘膜消毒效果监测方法1、采样时间：在消毒后立即采样。2、皮肤粘膜采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处；用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子；剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml（或含有相应中和剂）无菌洗脱液试管中，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。四、医院环境卫生学监测D、皮肤粘膜消毒效果监测方法3、检测方法：同工作人员手。4、判断结果：参照工作人员手的卫生学标准5、注意事项：皮肤粘膜采样处，若表面不足5cm×5cm可用相应面积的规格板采样。四、医院环境卫生学监测谢谢大家！