实验四家兔动脉血压的神经、体液调节解读

实验四家兔动脉血压的神经、体液调节【目的要求】1、学习直接测定和记录家兔动脉血压的急性实验方法．2、观察神经，体液因素对心血管活动的影响．【基本原理】在生理情况下，人和其它哺乳动物的血压处于相对稳定状态，这种相对稳定是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中以颈动脉窦－主动脉弓压力感受性反射尤为重要。此反射既可在血压升高时降压，又可在血压降低时升压，反射的传入神经为主动脉神经与窦神经。家兔的主动脉神经为独立的一条神经，也称减压神经，易于分离和观察其作用。在人、犬等动物，主动脉神经与迷走神经混为一条，不能分离。反射的传出神经为心交感神经、心迷走神经和交感缩血管纤维，心交感神经兴奋，其末梢释放去甲肾上腺素，去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的b受体结合，引起心脏正性的变时变力变传导作用，心迷走神经兴奋，其末梢释放乙酰胆碱，乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，引起心脏负性的变时变力变传导作用，交感缩血管纤维兴奋时释放去甲肾上腺素，后者与血管平滑肌细胞的a-受体结合引起阻力血管的收缩。本实验应用液压传递系统直接测定动脉血压。即由动脉插管、测压管道及压力换能器相互连通，其内充满抗凝液体，构成液压传递系统。将动脉套管插入动脉内，动脉内的压力及其变化，可通过密闭的液压传递系统传递压力，通过压力换能器将压力变化转换为电信号，用微机生物信号采集处理系统记录动脉血压变化曲线。【预习要求】1．仪器设备知识：RM6240微机生物信号采集处理系统的使用方法。2．实验理论实验动物知识参见第三章第一节生理科学实验常用实验动物的种类；第四章第一节动物实验的基本操作、第四节实验动物手术；统计学知识参见第5章第四节常用统计指标和方法；生理学教材有关动脉血压的调节。检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。3．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。【材料】家兔，动脉插管，血压换能器，生物信号采集处理系统，200g/L氨基甲酸乙酯，1000U/ml的肝素，0.1g/L去甲肾上腺素，10-2g/L乙酰胆碱。【动物与器械】家兔、麻醉箱，兔手术台，常用手术器械，止血钳（4把）、眼科镊、支架、双凹夹、压力传感器，保护电极，气管插管，动脉插管、动脉夹、三通管、注射器（1ml、5ml、20ml），乳胶管，20%～25%氨基甲酸乙酯、肝素（200U/ml），肾上腺素（1：5000），乙酰胆碱（1：10000），纱布、棉球、生理盐水，生物机能实验系统．【方法与步骤】1．实验系统连接及参数设置（1）颈动脉血压测量记录装置。将血压换能器固定于铁支柱上，其位置应与心脏在同一平面。（2）压力换能器输出线接微机生物信号处理系统第4通道（亦可选择其它通道）。（3）微机生物信号处理系统参数设置：RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“循环”或“自定义实验项目”菜单中的“兔动脉血压调节”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：4通道时间常数为直流，滤波频率100Hz，灵敏度12Kpa，采样频率800Hz，扫描速度500ms/div。连续单刺激方式，刺激强度5~10V，刺激波宽2ms，刺激频率30Hz。2、实验仪器的准备打开计算机采集系统，接通压力传感器。从显示器的“实验项目”中找出“家兔血压的调节”实验。3、连通液导系统并制压4、动物准备（1）麻醉：家兔称重，由耳缘缓慢注射20％氨基甲酸乙脂5ml／kg。（2）固定：将家兔背位固定在手术台上，用剪毛剪将颈部和剑突部的被毛剪去即可手术。（3）手术：沿颈部正中线作一长5－7厘米的皮肤切口，用止血钳分离皮下结缔组织，再向下分离气管和血管神经束．颈部神经与颈总动脉位于气管外侧，用止血钳先将血管神经束腹面的肌肉和结缔组织分离，再用左手拇指和食指轻轻捏住分离的肌肉和皮肤，稍向外翻，即可将血管神经束翻于食指之上，然后用弯头止血钳分离颈动脉约４厘米，穿线备用．（注意：再分离颈总动脉及穿线时，切勿损伤与其伴行的神经；在颈总动脉近甲状腺处有甲状腺前动脉，分离时应稍靠其下，以免损伤）用同样方法分离另一侧颈总动脉，穿线备用．轻轻提起右侧颈总动脉下的备用线，即可清楚看到3条粗细不同的神经，迷走神经最粗，白色，一般位于外侧，易识别；交感神经较细，略显灰色，一般位于内侧；减压神经最细，常与交感神经贴在一起．识别准确后，用玻璃分针纵向小分离．顺序由细到粗，神经分离2厘米，即可穿线备用。（4）气管插管法：用止血钳由颈部正中线将肌肉结缔组织分离，暴露出气管．在气管下方用镊子穿一线，打一活结，在喉头下2－3厘米处的气管上作一“Ｔ”形切口，将气管插管向心方向插入气管中并用线结扎，并将多余的线系在气管插管的分叉处固定，以免滑脱。（5）动脉插管法：在分离出来后右侧颈动脉的远心端（尽量靠近头端）用棉线将动脉结扎，在颈总动脉近心端用动脉夹将动脉夹住．与两者之间另穿一线，打一活结备用．在远心端结扎线下方用剪膜剪在动脉上作一斜形切口，向心脏方向插入动脉插管，用备用线将插管尖端固定于动脉管内，并将余线结扎于插管的侧枝上以防滑脱．注意插管与血管方向一致，防止扭转或插管尖端刺破动脉管壁。5、实验观察与记录：实验装置准备妥当，手术完毕后，慢慢放开动脉夹，即可看到少量血自颈总动脉冲向动脉插管，随后可按照以下实验项目进行观察与描记。（1）记录正常血压曲线。调节扫描速度与增益，可以明显地观察的心室射血与主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化，心搏为一级波，呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢。（2）轻轻提起对侧完好颈总动脉的备用线，阻断动脉内血流，观察并记录血压的变化。（3）用手指压迫颈内动脉和颈外动脉的分叉处，观察血压的变化。（4）刺激减压神经．用中等强度的电刺激通过保护电极刺激减压神经，记录血压变化，然后进行双结扎剪断，再分别刺激中枢端和外周端。记录血压变化。（5）用同样强度刺激迷走神经，双结扎剪断一侧迷走神经分别刺中枢端和外周端，记血压变化．再结扎并剪断另一侧迷左神经，并观察对比剪断迷走神经，前后呼吸频率与深度的变化．（6）耳缘注射肾上腺素0.2－0.3ml，记录BP变化．（7）耳缘注射乙酰胆碱0.2－0.3ml，记录BP变化．6、整理实验记录，并将实验结果打印。【注意事项】1、每项实验后，需将血压基本恢复后，再进行下一项实验．2、随时注意插管位置，特别在挣扎时，避免扭转而阻塞血流或刺破血管．3、随时注意动物麻醉情况，若挣扎厉害时可补少量麻醉剂．兔动脉血压的神经体液调节一、实验准备：实验器械和药品：、血压换能器、塑料动脉插管、试管夹、双凹夹、铁支柱、动脉夹、三通管、保护电极、兔手术台、哺乳动物手术器械、照明灯、注射器（1毫升、2毫升、10毫升）、有色丝线、纱布、棉花、20%氨基甲酸乙酯、0.5%肝素(或5%柠檬酸钠)0.01%肾上腺素、0.01%去甲肾上腺素。注意：动脉插管稍长。MedLab系统二、理论复习：血压的神经体液调节。三、参数设置：（一）RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“循环”或“自定义实验项目”菜单中的“兔动脉血压调节”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：4通道时间常数为直流，滤波频率100Hz，灵敏度12Kpa，采样频率800Hz，扫描速度500ms/div。连续单刺激方式，刺激强度5~10V，刺激波宽2ms，刺激频率30Hz。（二）实验内容1.正常血压曲线。2.夹闭右侧颈总动脉。3.刺激减压神经：（1）刺激完整减压神经（2）刺激减压神经中枢端（3）刺激减压神经外周端。4.刺激迷走神经外周端。5.静脉注射NE0.5ml。（三）注意事项：1.分离减压神经注意：减压神经要从向心端开始往头端分离，避免损伤神经，分离时不使神经上带有结缔组织膜，分离后滴加生理盐水以防干燥，穿2根线备用。2.连接仪器：注意避免动脉插管滑出。3.夹闭颈总动脉时勿牵拉动脉（夹闭，血压增高；牵拉，血压下降）。4.刺激减压神经，如神经损伤，向头端移动（与减压神经放电移动方向相反）。5.刺激右侧迷走神经末梢端，血压.心率变化更为明显。三、实验报告要求：（10分）1.实验结果：各种影响因素引起动脉血压变化曲线图。（不要求观察定量变化）2.实验讨论：（各1分）1）夹闭颈总动脉，血压升高：夹闭颈总动脉→颈动脉窦血压下降→颈动脉窦压力感受器受到刺激减弱→窦神经传入冲动↗心迷走中枢（抑制）→迷走神经传出冲动减少→心跳加快.加强→心输出量增多↘↑↑减少→心交感中枢（兴奋）↘↗小静脉收缩→回心血量增多→血压升高交感神经传出冲动增多↘交感缩血管中枢（兴奋）↗↘小动脉收缩→外周阻力增大↗2）刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降，而刺激该神经外周端基本不变：兔减压神经是传入神经，其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢，反射性引起血压降低。因此，刺激完整的减压神经或其中枢端，使传入中枢的冲动增加，致血压明显下降，而刺激其外周端虽又冲动传向外周，但不会引起血压变化3）刺激迷走神经末梢外周端，引起血压下降在实验中，多用刺激右迷走神经外周端，其中的副交感神经纤维兴奋，释放乙酰胆碱，乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，产生负性变时，变力，变传导作用，出现心率减慢，心输出量下降，血压下降。4）静脉注射去甲肾上腺素后血压升高：