风湿性疾病中自身抗体的意义

风湿性疾病中自身抗体的临床意义中国医学科学院，中国协和医科大学北京协和医院唐福林教授风湿性疾病诊断方法症状、体征自身抗体影像学检查病理自身抗体检测的临床意义临床疾病的诊断和鉴别诊断判断疾病的活动性和预后进一步研究和阐明疾病的发病机制风湿病相关自身抗体抗核抗体谱（ANAs）类风湿关节炎相关抗体(RF,抗CCP)抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）自身免疫性肝病相关抗体抗磷脂抗体ANA由来中性粒细胞DNP(DNA-Histone)+抗DNP+补体均质体LE细胞LE细胞：并非SLE特有，PM、SD、RA、SS等结缔组织病，药物过敏，慢活肝等亦可阳性。抗DNP取代LE细胞的检测+抗核抗体自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。ANA存在一个谱ANA新概念：抗核酸（Nucleicacid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富ANA检测的意义有助于疾病的诊断，如抗Sm是SLE标记抗体；抗ScL-70是SD的标记抗体，抗Jo-1是PM/DM的标记抗体观察疾病活动度和治疗反应研究发病机理抗核抗体谱（ANAs）ANAs抗核不溶成分抗核可溶成分（抗ENA）抗染色体DNA蛋白抗核仁抗体抗DNA抗体抗核小体抗体抗组蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4抗Sm,U1RNP,SSA,SSB抗Scl-70,Jo-1,PM-1抗rRNP,Sa,RA33,PCNA…….dsDNAssDNA抗着丝点抗体（ACA)抗5sRNA抗dsDNA抗体临床意义SLE血清特异性抗体活动期SLE80%-90%抗体滴度的消长与SLE疾病活动程度相关可用于SLE疾病活动期判断＆药物疗效观察抗双链DNA抗体（短膜虫免疫荧光法1:5）病例数阳性率（%）正常人1100系统性红斑狼疮64活动期3193.6缓解期333.0类风湿关节炎601.8硬皮病130多发性肌炎80干燥综合症150白塞病50非结缔组织病2221.7抗组蛋白抗体（酶联免疫吸附法X2SD)系统性红斑狼疮50%其他结缔组织病23-30%服异烟肼12月以上53%服苯妥因钠6月以上18%服他巴唑6个月0活动期SLE90.2%阳性抗H1H2AH2BH2A-H2BH3H4系统性红斑狼疮+++++++++++长期服异烟肼+++++++++++++类风湿关节炎++++++SLE以IgG型抗组蛋白抗体为主，而长期服烟肼及RA病人以IgM型为主抗组蛋白抗体（免疫印迹法）抗ENA抗体可提取性核抗原成分：核酸与核蛋白功能：参与细胞内的DNA的复制、转录以及蛋白的翻译合成来源：多种组织中获得，无种属差异，有组织不均一性意义：抗ENA抗体是ANAs中范围最广、最为重要的一簇抗体几种ENA的由来及同义词Sm：病人名：SmithRNP:u1RNP或nRNPNuclearRibonucleoproteinSSA:ROSjogren’ssyndromeASSB:La,Ha,Sjogren’ssyndromeBJo-1:病人JohnScL-70:Scleroderma小结ANA是诊断弥漫性结缔组织病的重要依据。各种抗原在其分子量、结构、功能上有所不同。抗原同DNA的转录、拼接、复制、翻译等作用有关。研究ANA有利于对结缔组织病发病机理的了解ANA滴度不一定与疾病活动性相平行，正常人、尤其老年人可有低滴度ANA。感染性疾病、肿瘤也可阳性小结抗双链DNA对诊断SLE高度特异，并与疾病活动有关。DNA-抗DNA免疫复合物在狼疮肾炎中起重要作用抗Sm:是SLE标记抗体，帮助前瞻性和回顾性诊断，常与nRNP抗体共存小结抗nRNP在多种结缔组织病中存在，高滴度有利于MCTD的诊断。nRNP抗原与rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而rRNP是主要在胞浆内的磷酸蛋白，抗rRNP抗体与SLE有关，尤其有精神神经症状的SLE阳性率较高小结抗SSA和抗SSB与Sjogren’sSyndrome相关,并可造成新生儿狼疮和先天性心脏传导阻滞抗ScL-70:SD的标记抗体抗Centromere与雷诺现象和CREST(Calcinosis,Raynaud’sphenomena,Esophagealdysmotility,Sclerodactyly,Telangiectasia)有关，但并非标记抗体，在干燥综合征，某些慢性肝病中亦可阳性小结抗Jo-1是PM/DM的标记抗体，抗Jo-1阳性的肌炎患者，伴关节炎、“技工手”、雷诺症、肺间质变等称合成酶抗体综合征。抗组蛋白抗体与多种结缔组织病有关，有助于药物性狼疮的诊断抗核仁型抗体常与SD有关抗磷脂抗体综合征抗磷脂抗体综合征(Anti-phosholipidsyndrome,APS)：抗磷脂抗体（ACL）阳性，反复血管内栓塞，血小板减少，习惯性流产或胎死宫内。临床上可有肺动脉高压，脑病，高凝状态等APS诊断主要临床表现：反复流产，静脉血栓，动脉闭塞，下肢溃疡，网状青斑，溶贫，血小板减少高水平抗磷脂抗体加一项表现，或低水平抗磷脂抗体加2项或2项以上表现则疑似APS抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)靶抗原：中性蛋白酶3（PR3），髓过氧化物酶（MPO），杀菌/通透性增高蛋白（BPI），丝氨酸蛋白酶，人白细胞弹性蛋白酶（HLE），乳铁蛋白（LF），组织蛋白酶G，β葡萄糖醛酸酶，溶菌酶抗中性粒细胞胞浆抗体（Anti-NeutrophilCytoplasmicAntibody,ANCA）cANCA(PR3蛋白酶)中性粒细胞胞浆内荧光染色，其抗原是中性粒细胞颗粒内的和单核细胞溶酶体的丝氨酸蛋白酶，此种抗体主要与Wegener’s肉芽肿相关，且与疾病活动性相平行，结节性多动脉炎也可阳性。抗中性粒细胞胞浆抗体（Anti-NeutrophilCytoplasmicAntibody,ANCA）pANCA（MPO）指核周染色，并非周边型核抗体。其抗原是胞浆内髓过氧化物酶，弹力蛋白酶及某些成分，此种抗体与特发性新月体肾小球肾炎相关，且与疾病活动度相平行。显微镜下多动脉炎，结节性多动脉炎也与之有关下列临床表现拟行ANCA检测¤肾小球肾炎，尤其是急进性肾小球肾炎¤肺出血，尤其是肺—肾综合征¤皮肤血管炎，尤其是伴发全身表现¤多发性肺结节¤上呼吸道慢性破坏性疾病¤长期鼻窦炎或中耳炎¤声门下气管狭窄¤多发性单神经炎或外周神经病变¤眼眶后肿物类风湿关节炎相关抗体RFAPFAKA抗Sa抗CCP类风湿因子（RheumatoidFactor）抗人或动物的IgG的FC片段抗体。其本身是免疫球蛋白，因此，RF有IgG、IgM、IgA型等。RF无种族和种属特异性与DNP及半抗原（二硝基苯）有交叉反应。7SIgM(IgG)-RF主要参与关节外症状的免疫复合物形成，且与疾病活动性有关类风湿因子（RheumatoidFactor）RF由外周淋巴结、关节滑膜、扁桃体淋巴滤泡和骨髓产生。（CD5+B淋巴细胞是产生IgM-RF主要细胞。）RF的临床意义是诊断RA的标准之一，不是唯一标准，并非RA特有作为血清阴性脊柱关节病区分标准正常人2%阳性，老年人可达5%阳性RA50-90%、SS75-95%、MCTD50-60%、IgA肾病25-40%、SLE15-30%、SSc20-30%、DM/PM5-10%RF的临床意义病毒性肝炎、慢性感染性疾病、结核、SBE、肿瘤、高球蛋白血症、寄生虫感染、肝硬化、结节病、弥漫肺间质纤维化等均可阳性。在RA病后半年才产生。有关节外表现者，滴度高。持续高滴度RF预示疾病严重，预后差。RF的诊断特异性高滴度2次或多次阳性多种方法检测均阳性与人或动物IgG分子反应，但不与其它相关抗原反应除IgM-RF外，还有IgG-RF和IgA-RF特异性随上述因素增多而增强抗环瓜氨酸肽（CycliccitrullinatedpeptideCCP）抗体1.ELISA：人工合成的“环瓜氨酸肽”为抗原。2.诊断RA的敏感性：46.6%，特异性：96.6%。3.与APF、AKA相关（CCP是filaggrin的一段肽链），但不完全重叠。4.与HLA-DR4相关，提示抗CCP（+）病情重，骨破坏明显。自身免疫性肝病自身免疫性肝炎(Autoimmunehepatitis,AIH)原发性胆汁性肝硬化（Primarybiliarycirrhosis,PBC）原发性硬化性胆管炎（Primarysclerosingcholangitis,PSC）AIH相关抗体I型ANASMA(抗平滑肌抗体)II型抗LKM1(抗肝肾微粒体抗体1)III型抗SLA(可溶性肝脏抗原)自身免疫性肝病自身免疫性肝炎(Autoimmunehepatitis,AIH)原发性胆汁性肝硬化（Primarybiliarycirrhosis,PBC）原发性硬化性胆管炎（Primarysclerosingcholangitis,PSC）AMA亚型抗体种类及其疾病相关性AMA亚型抗体相关疾病阳性率M1梅毒100%SLE50%进行性系统性硬化症,SS,RA5—15%血栓形成,习惯性流产常见M2PBC(高滴度)96%其他慢性肝病(低滴度)30%进行性系统性硬化症(低滴度)7—25%M3药物性狼疮100%M4PBC(常伴M2阳性,活动期,晚期PBC)55%M5SLE,自身免疫性溶血性贫血少见M6药物性肝炎100%M7急性心肌炎,心肌病60%,30%M8PBC(常伴M2阳性,活动期PBC)55%M9PBC—M2阴性患者(早期PBC)82%PBC—M2阳性患者37—44%自身免疫性肝病自身免疫性肝炎(Autoimmunehepatitis,AIH)原发性胆汁性肝硬化（Primarybiliarycirrhosis,PBC）原发性硬化性胆管炎（Primarysclerosingcholangitis,PSC）PSC(Primarysclerosingcholangitis)Ig↑（IgM↑）AMA（-）ANCA(+)、IgG—ANCA、IgG1—ANCA自身抗体进展北京协和医院研究了抗内皮细胞抗体（AECA）对系统性血管炎的诊断作用AECA主要见于免疫性血管炎疾病，有潜在致病性，该抗体对血管炎的诊断和判断疾病的活动性、预后有一定意义。以永生内皮细胞株（Eaby926）提取抗原，由免疫印迹法检测AECA，并以双向电泳、免疫印迹和质谱分析发现AECA的共同靶抗原主要是分子量为47000内皮细胞蛋白，其成分为α-烯醇化酶AECA在不同疾病中的阳性率组别总例数AECA阳性例数阳性率（%）系统性血管炎1137869.0*SLE573866.7*RA1516.7正常人2000注：与RA和正常人相比，*P0.01抗M3受体抗体在不同风湿性疾病的阳性率组别例数抗M3受体阳性例数%SS组806783.8SLE组4025.0RA组4000正常对照组4012.5