急性白血病免疫分型

讲座急性白血病免疫学分型急性白血病的免疫分型MICM分型:细胞形态学(包括细胞组化)为基础，细胞免疫学(免疫表型)为主体，细胞遗传学为辅助，分子生物学为补充的原则。免疫学分型对ALL更重要。免疫学与FAB分型可不一致。白血病免疫分型原理白血病细胞表面有大量的抗原,这些抗原的性质与正常白细胞的抗原性质相同，目前尚未发现特异的白血病抗原。但白血病细胞可能具有:1.特异性的联合抗原;2.某些抗原表达于某个特定系列的发育阶段上,而正常造血细胞不存在这种现象或极为罕见。——这些抗原称为白细胞分化抗原或分化群CD（clusterdesignations）.白血病免疫分型原理白血病免疫分型的意义：1。有助于白血病亚型的诊断，特别对用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源时及杂合性白血病；2。指导临床治疗；3。有助于判断白血病的预后；4。可进行疾病的监测如ＭＲＤ检测。细胞系列抗原的表达---B细胞系抗原B细胞根据发育阶段可分为：B祖细胞TdT、CD34、HLA-DR前B细胞（可再分为前前B、前B）TdT、CD34、CD10、CD19、CD24未成熟B细胞CD19、CD24、CD20、CyCD22成熟B细胞CD19、CD24、CD20、CyCD22活化B细胞CD19、CD24、CD20、CyCD22浆细胞CD38细胞系列抗原的表达---T细胞系抗原T细胞发育的路径为：骨髓（骨髓祖细胞→前胸腺细胞，亦称T祖细胞）--→胸腺（早→中→晚）--→外周血（成熟）骨髓T祖细胞CD34+、TdT+、CD10+、CD7+CD7出现最早并贯穿于T细胞发育全程T细胞系抗原T细胞进入胸腺后：（早）CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR-（中）CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR-（晚）CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+，CD7+CD2+CD3+CD4-CD8+TCR+CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-TCR+进入血液及淋巴结T细胞系抗原---外周血T细胞血液中T细胞主要有以下亚型：1.CD3+、CD4+、CD8-—辅助性T细胞/诱导性T细胞，TH/TI占T细胞总数的60-70%2.CD3+、CD4-、CD8+—抑制性T细胞/细胞毒性T细胞，TS/TC，占T细胞总数的20-30%3.CD3+、CD4+、CD8+—占T细胞总数的1-3%4.CD3+、CD4-、CD8-—占T细胞总数的1-10%T细胞系抗原---CD4+T细胞亚群1．根据产生淋巴因子的差异分为：TH1—产生IL-2、IFN-γ、TNF-βTH2—产生IL-4、IL-5、IL-6、IL-102．根据功能分为：TSI（suppressorinducerT-cell）—诱导TS功能，CD31+、CD45RA+THI（helperinducerT-cell）—辅助B细胞产生抗体，CD31-、CD45RO+3．分为记忆T细胞、天然T细胞、活化T细胞天然T细胞记忆T细胞活化T细胞表型天然T细胞记忆T细胞活化T细胞CD4CD8CD45RA+-++--+--CD45RO-++CD25CD54CD58-/++/+++++髓系抗原根据髓系抗原表达大致分为7类：1．粒细胞和单核细胞上都有较强表达的抗原：CD13、CDw17、CD32、CD87、CD88、CD89、CDw92、CD93、CD156、CD157、CD163。2．以粒细胞为主，也存在于单核细胞上的抗原：CD15、CD65。3.以单核细胞为主，也表达在粒细胞上的抗原：CD14、CD33。髓系抗原3．基本只表达在单核细胞上的抗原：CD16、CD64、CD68、CD91、CDw136、CD155。基本只表达在粒细胞上的抗原：CD16b、CD66。4．造血干、祖细胞抗原：CD34、CD90。5．其他髓系相关抗原：主要存在于其他系细胞上，髓系细胞上也有表达：CD4、CD7、CD9、CD10、CD11b、CD11c、CD31、CD36、CD386．血小板相关抗原：CD36、CD41、CD42、CD61、CD62。7..红细胞抗原：CD36、GPAＡＬＬ免疫分型从70年代开始试图进行免疫学分型：1986年前五分法1986年后两大类九分法1994年四型21类法ＡＬＬ免疫分型－－五分法：五分法：Common型未分化型T细胞型前B细胞型B细胞型表型DR/CD9/CD10+复杂CD2/CD5+CyIgSmIg+发生率：国外60-70%30%15-25%2--3%2--3%国内50%30%20%0.5%1.5%预后：儿童最好次之再次最次最次成人次之再次最好最次最次ＡＬＬ免疫分型－－两类九型法:非T亚型HLA-DRCD9CD10CD20μ链SmIg发生率%I+-----5II++----15III+++---30IV++++--50V+++/-+/-+-5VI++-+-+2ＡＬＬ免疫分型－－两类九型法T亚型CD7CD5CD2CD3CD4CD8CD1a发生率I+++----55II++++25%+90%+90%+25III+++++#+#-20#:二者之一阳性ALL免疫分型--四型21类法第一型：裸型-未分化型,干细胞型第二型：纯型-Pre-B1,Pre-B2,Pre-B3,Pre-B4,B,T1,T2,T3第三型：变异型-Pre-B1-4/My+,Pre-B1-4/CD15+,PRE-B1-4/T+,T1-4/My+,T1-4/CD15+,T1-4/B+第四型：多表型-Pre-B1-4/M+,T1-4/M,Pre-B+T,Pre-B+T+M.ALL免疫分型--FAB的MIC分型B-ALLCD19TdTDRCD10CyIgSmIgFAB亚型早期前B+++---L1,L2t(4;11)t(9;22)普通-ALL++++--L1,L26q-近单倍体t/del(12p)t(9;22)前B-ALL+++++-L1t(1;19)t(9;22)B-ALL++-+/-+/-+L3t(8;14)t(2;8)t(8;22)6q-ALL免疫分型--FAB的MIC分型T-ALLCD7CD2TdTFAB亚型早期前T+-+L1,L2t/del(9q-)T-ALL+++L1,L2t(11;14)6q-白血病系列积分方法１．单表型：某个系列积分大于2分，其他系列为0分：纯B-ALL，纯T-ALL，纯AML（M0-5），纯AML-M6，纯AML-M7。２．表达某一系列抗原为主型：某一个系列积分大于2分，伴另一系列抗原的表达，但小于或等于2：1、My+-B-ALL，My+-T-ALL，My+：CD13+/14+/33+和15±，2、CD15+B-ALL，CD15+T-ALL，CD15+：CD15+（CD13/14/33-）3、CD2+B-ALLCD5+B-ALLCD7+B-ALL，4、CD20+T-ALLCD24+T-ALL5、Ly+AML。3.双表型：至少二个系列积分大于2分:B-ALL-粒单型（形态ALL），B-ALL-粒单型（形态AML），T-ALL-粒单型（形态ALL），B-ALL-粒单型（形态AML）。4.未分化型，所有系列积分均小于或等于2。急性白血病免疫学系列分型的积分方案分数B系T系粒单系巨核系红系2M/cCD22M/cCD3MPOCD41CD42血型蛋白AcCD79aM/cTCRα/βCcd13CD61RhDHbFcμsIgM/cTCRγ/δFVIII1CD19CD20CD2CD5Mcd13CD33CD36ABHCD36ABHCD36CDw65cCd680.5CD10CD24CD7CD1aCD11a/cCD14TdTCD4CD15CD65CD117免疫学分型与FABAML分型的相关性M1：CD34+、MPO+、DR+、TdT+、CD33+、CD13+、CD15-、CD11b-、无淋、红、巨核系抗原M2：CD34+、CD33+、CD13+、DR+、CD15+M3：CD33+、CD13+、DR-、CD34-M4：CD34+、CD33+、CD13+、CD14+、CD15+M5：CD34+CD33+、CD13+、CD14+、CD15+M6：血型糖蛋白+、CD34-，DR-、CD33-、CD13-、CD15-M7：CD34+、CD33+、DR+、CD41+、CD42+、CD61+M0：FAB：形态学为L2型，MPO、SBB组化阴性，淋系抗原阴性，CD33、CD11、CD15及antiMPO单抗阳性。细胞系列抗原的表达---B细胞系抗原HLA-DR意义在白血病分型中，HLA-DR特异性较差，除B系外，HLA-DR在急非淋、成人T细胞白血病亦表达，但如DR+，加上CD5-、CD7-则99%为B系。90%B系ALL表达CD10。与AL预后有的抗原1。CD34：强表达者预后差，特别是复发时CD34增强是最有意义的免疫学表型改变，CD34常与一些预后差的因素共存时有相加的作用，与CD34与Pgp或DR共存的患者，比单表达其中一个抗原的患者完全缓解率明显降低。与AL预后有的抗原2。Pgp：表达者1、预后较差，2、常出现耐药现象，3、常与预后不良的因素如CD34、CD56相伴随。与AML预后有的抗原3。髓系抗原表型越不成熟预后越差，CD33/CD15/CDw65低表达的AML一般提示治疗无反应或/和生存期较短。与AL预后有的抗原4。My+ALL：CR率低占ALL21.6%，My+ALLCR52.6%,My-ALLCR80%.5。CD34+ALL：CR率较低，占ALL53.6%CD34+ALLCR62%,CD34-ALLCR82.6%,CD34+My+ALL：CR率很低，CR33.3%,CD34-My-ALL83.3%,6。Ph+ALL：CR率低，CR41%,Ph-ALLCR83.3%与AML预后有的抗原6。Ly+AML：CR率低占AML43%，CR46%，合并CD34+38%，PgP+15%，（其中CD2+AML7.7%，CD7+AML22%，CD19+13%），Ly-AML：CR73%7。CD7+AML：CR率低，占AML22%，合并CD34+75%，PgP+55%，（M1：42%，M2：18%，M4：28%，M5：9%，M3：0%）CR35%与AML预后有的抗原8。CD19+AML：CR率较低，占AML13%，合并CD34+67%，PgP+33%，（M2：16%，M5：25%），CR50%。9。CD2+AML：CR率较高，占AML18%，合并CD34+57%，PgP+14%，（M3：36%，M5：13%），CR71%。与AML预后有的抗原10。MK+AML：CR率很低，占AML12.8%，CR33%，其中HAL：45%，M5：24%，M2：14%，M3、M6不表达，常伴CD34+、PgP+，WBC明显增高。11。Ph+AML：CR率低，占AML2—10%，见于M1，M2，M4，CD34高表达，缓解期短。从分子水平看：bcr断裂点位于M-bcr，产物为P210---CML急变而来；bcr断裂点位于m-bcr，产物为P190---原发性AML。杂合性急性白血病杂合性急性白血病（HAL）又称为混合性急性白血病（MAL）指白血病细胞表达一种系以上免疫标记的一组白血病，主要依靠免疫分型确诊。发生率占白血病的1.2%-1.5%，疗效差，预后不良。分型1。双表型：白血病细胞较均一，每个细胞同时表达淋巴系和髓系细胞的免疫学标志；2。双克隆型：白血病细胞不均一，同时存在两种恶性克隆性细胞，一般一种表达淋巴系标志，一种表达髓系细胞标志；3。双系细胞：与双克隆型相似，但这两部分白血病细胞系来自同一多能干细胞。并限定只有当两种细胞并存，或6个月之内相继发生，才属次型；4。转换型：白血病细胞由一种表型在6个月以后转为另一种表型，现已不将次型称为HAL。HAL目前多联合应用形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学等手段来确定诊断。HAL的淋系和髓系标志均大于标准，T、B淋巴细胞混合一般不作为HAL看。系统标志积分达不