布鲁克核磁培训电子版文档

核磁应用培训笔记一、一维H谱实验操作流程1、新建一个实验，可以直接输入New命令，name：样品名称；PROCNO:处理号；Solvent：不代表锁场的溶剂，只影响最后打印谱图参数中溶剂项的显示；ExpenrimentDirs：标准实验，不代表脉冲系列；User下，可以建立自己的标准实验；H谱的标准实验名称是：proton2、getprosol：把相关的脉冲参数保存在Acqupars表中:Acqupars→PL13、锁场，可以直接点击Lock图表选择溶剂后锁场，或者输入命令LOCK空格溶剂名称直接锁场；锁场的目的？4、atma：topshim5、NS输入数值6、rga7、za即zerogo的简写Notice：（1）调谐：做同一样品的不同谱图时需要重新做一次调谐。（2）当第一次匀场不好的时候，可以输入命令topshim+空格+tunea进行二次匀场，若多次匀场后仍然不能达到好的状态则需要做三维匀场。（3）同一溶剂的样品，建议在同一时段做谱，有利于匀场。（4）匀场不好的原因有以下几个方面：①样品中含有顺磁性金属离子②高粘度样品③溶液高度太低。8、部分参数的设置（1）eda采样参数设置：可以输入命令ased进入参数设置界面；①PULPROG：脉冲系列名称，zg30:30度角激发，zg：90度角激发；②AQ-mod：采样模式③TD：采样点数④NS:采样次数⑤DS:空扫：真正开始采样前先采集的次数，做一维谱时可设为0，二维谱空扫的次数设置非常重要。⑥TD0，真正采样次数，NS*TD0，如TD0设为10，NS为1024，则总采样次数为1024*10⑦SW谱宽，用默认的谱宽即可，其中SW与AQ成反比⑧O1P，O1，中心频率，其中前者是以ppm为单位，后者是以HZ为单位。最右边：谱宽/2+O1P（2）和脉冲系列有关的参数①DE值，采样结束后等待衰减的时间。做杂核时需要更改。②D1：弛豫延迟，做定量H谱时需要更改③P1激发脉宽；PL1（dB）：激发功率；9、谱图处理（1）Procpars：窗口函数①efp：指数函数，em、ft、pk三个命令的组合②gfp：高窗函数：gm、ft、pk三个命令的组合③apk：根据当前的样品来调PHC,PHC1，当谱峰有很多鼓包时使用效果不好。Notice：LB值越大信噪比越好，分辨率越差，LB值越小，分辨率越好。LB0是相对于efp函数而言的，当调节LB值为负，信噪比仍然不好时，可用gfp函数，先更改GB值，再输入GFP命令冲零也可以提高分辨率。（2）定标（3）直接输入plot命令，进入打印界面。（4）如何创建模板？C:\Bruker\Topspin\Plot\Layouts,先另取名字创建模板，再将模板文件夹下的默认模板删除，如H谱的默认模板是：1D-Hxwp，先删除该模板，再将自己创建的模板改为默认模板的名字。二、如何做H谱的定量？与标准一维氢谱相比，需要做一下变换1、将脉冲系列zg30改为zg，2、找内标，两个峰挨的很近且基线分离，一般很难找到合适的内标物。3、调整O1P,使得O1P在两个峰之间4、NS要足够大，为了保证较好的信噪比，定量最起码要做半个小时以上。5、D15T1,D1要大于5倍的T1，首先要找最大的T1，D1的时间要足够长。三、碳谱：碳谱的标准实验为C13CPD1、getprosol2、atma3、采样参数的设置：谱宽sw一般设置为250,O1P，NS，TD0,4、rga5、zg6、tr命令：保存数据，继续采样；如tr4，保存最近4次的2倍。7、efp：apk8、ppf：对碳谱的全谱进行标峰。9、Mi+数字+PPF：表示强度低于该数值的不标峰。10、go命令，样品浓度太低的情况下，过夜采集仍然不能得到理想的谱图，第二天白天需做其他谱图，可在第二天晚上将前一天晚上采集的谱图拖动到当前窗口，重新放入样品锁场调节后可以输入GO命令进行累加采集。11、和脉冲相关的参数CPDPRG2，通常情况下用Waltz16，做氢谱、碳谱的90度脉冲没有问题，做杂核时需要更改。Notice：看到碳谱有裂分，首先要考虑是否有同分异构体，再考虑更改CPDPRG2，选择带bi的参数。四、碳谱定量实验（实验时间相对很长，需要加弛豫试剂以减短实验时间。）1、标准实验选择CBIG，new→ok2、将zgig30改为zgig3、DS:0加弛豫试剂后会影响锁场和匀场。五、DEPT实验（45°、90°、135°）1、New→C13DEPT90→OK2、getprosol3、修改参数：(1)改动参数NS，采样次数是普通碳谱采样次数的1/4.(2)Pulseprog查看与脉冲相关的参数，其中NS是4的倍数。(3)DS=8，NS=4，SW:谱宽，O1P.4、rga：zgNotice：（1）DEPT45，只出现季碳；DEPT135：只出现CH（2）HALT空格数字（3）SR值，从校正后的普通碳谱的处理参数中copySR值，复制到DEPT谱图中，可将DEPT谱图中的化学位移与普通C谱的化学位移对齐。六、如何将多种谱图打印在同一张图上？方法一：1、先将全谱图调出并标好化学位移。2、选择1D+1D+1Dxwp打印模板3、在data中，点击ADD，选择实验数据现在的位置，将需要的数据拖入，点击Apply，确定。此方法的优点是可以对每一张谱图进行修改。、方法二：1、随意拖入一张谱图，输入plot2、全选中，并删除原有谱图3、在DATA里面选谱图，APPLY→OK;4、在右侧选择多个谱图叠加的图标，三条重叠的折线；5、在空白处拖动鼠标，出现第一张谱图6、右击选择Edit，选择steaked，输入谱图张数。Spectra：0*5,0表示左右偏移量，5表示上下偏移量。此方法的缺点是不能单独修改每一张谱图。七、一些补充注意事项1、BBf，探头。2、新安装仪器可以做的核有H、C、P、F、N,可以直接选择标准实验，直接调用标准模板。P31CPD,全去偶，zgpg30；P31：zg。LOCK之后可以直接输入一系列命令，点击ENTER直接完成。3、做杂核前要先确认两件事情：（1）有无脉宽和功率（2）有无标准实验；4、P的化学位移的标定：外标法。把标准品（查找网上文献）放到P样品中测定核磁，将标准品的化学位移定位为0后看SR值，再将SR值复制粘贴到后续做的P谱图上，再标定化学位移。标准品：85%磷酸溶液。不锁场、不匀场，直接调谐、prosol。不锁场实验：（1）打开BSMS键盘，将lock变成灰色。（2）sweep要变成灰色（即将（1）（2）的ON-OFF都OFF掉）（3）atma；rga；zg；八、对于没有标准实验、没有脉宽和功率的杂核如何入手做？以B11为例。1、首先查询该杂核的旋磁比、天然丰度，对于天然丰度太低的要求浓度高些，或者很难做出来。Help→NMRGuid→eNMREncyclopedia→NMRApplication→NMRpenddicTable→点击要做的元素查看旋磁比和天然丰度。2、先借用C谱的标准实验，新建一个实验，当旋磁比为正时标准实验选择C13CPD，当旋磁比为负时标准实验选择C13IG。点ok。3、更改参数查看Acqpar参数（都是C13的参数）→getprosol（读取C的脉宽和功率）→输入edsp命令→把F1维中的C13改为B11,F2维不变→Default→Save→再次回到Acqupars参数中→NS（扫描次数）、SW(谱宽，尽量设宽些400)，O1P（先赋予0）+-200位置找峰，D1（经验值）2S，对0也适合，（事先查D1值，太大可加弛豫试剂）→lock，topshim→输入atmm（不能用atma，手动调谐，第一次做核时必须用手动调谐。）→出现Tuning对话框，若点》《找不到会动的倒峰，则点击▽图标，放大范围，都调好后点①File②Saveposition③Exit→输入atma；rga；zg，弹出rga对话框，点OK，输入密码Bruker，接着弹出zg警告→halt8，efp；apk→输入sref弹出警告，close（将O1P放在最佳位置）→edmac（宏命令）+空格+名称（随意命名）。校准背景信号，第一段（第一行，absf1+空格+最大值；第二行，absf2+空格+次大值；第三行，absf）；第二段（第一行，absf1+空格+最大值；第二行，absf2+空格+次大值；第三行，absf）；Notice：下一段的开始是上一段的结束，进入鼓包区域后区间要变小，节点值不能正好落在峰的最高点，从最左端分多段编辑到最右端。编辑好后保存。→输入BL命令4、如何创建标准实验模板？输入wpar→在user下，不能存在par上面→点击writenew→输入实验名称，OK→OK→close→new→不能getprosol（90%重水10%水叠代钠标样，可以用来建立O的标准实验，也可以用来建立Na的标准实验，需要做Pt的标准实验室，可打电话让工程师过来设置，另外做其他杂核的定量需用到C13IG脉冲系列，需要请工程师调90度脉冲的脉宽和功率，请工程师来做核。）九、部分二维实验温馨提示：二维谱实验最重要的就是控温。（一）、实验一1、New建立一个新实验，标准实验选择COSYGPMFSW：用梯度场进行相关路径的选择。其中GP表示梯度；MF表示多量子粒波，SW表示方波，标准波形。多量子粒波的好处：可以从对角峰上看到单峰的性质，简化对角峰，易于解析。2、lock3、atma；topshim；getprosol，调谐的目的是为了接收线圈的频率与中心频率保持一致，提高灵敏度。DS空扫16次。Pulseprog：查看脉冲系列。TD,F2维2000左右；F1维，大于256（设高一点可以提高分辨率）。采采样模式：QF；与采样相关的参数：TD、NS、DS、SW、O1P。其中NS、DS的设置可以参考限定值。输入命令ased，可以查看与脉冲系列相关的参数，基本不需要自行修改。4、rga；zg5、谱图处理（1）输入命令xfb进行变换，其中xf表示加窗函数，b表示两个维度。（2）调进一维谱①选中一维谱，右击，选择displayAs2Dprojection。②选F1+F2（3）点等高线调整图标（一个没有底边的三角弧形，中间几条平行线穿过）进行等高线调整。Levelincrement：1.2-1.3即可；Numberoflevels（等高线数）：32；Fill→Apply→OK。或者可以输入命令clev+32可得到等高线数目。（4）校准（即定标）放大谱图进行定标。（5）去除噪音，选中噪音，输入命令proj，选择UPdatarows/colsfromdisplay→ok→再选择最上面的calculatepositiveprojection→输入sub2（对正峰和负峰都去除噪音）（二）、实验二1、New，标准实验选择：MLEVPHSW,PH表示相位；MLEV表示自旋锁定或自旋传递；SW表示方波，形状脉冲SP；①查看与脉冲系列相关的参数，其中NS=8*n，DS=16*n；②TD(F2=2048，F1≥256)③SW,O1P;④D9：自旋锁定时间，默认值为0.08S，即混合时间（设短的话可能会无法调整相位）2、lock3、atma；topshim；getprosol；4、谱图处理（1）输入命令xfb变换谱图（2）调等高线（3）调相位，先调0级相位，再调1级相位。（4）校准（三）实验三1、New→NOESYPHSW→适用于大分子2、①NS：8*N；DS:16*N;②D8混合时间，空间＜5À，峰的强度与距离的六次方成正比。对于大分子，D8=0.1～0.3S；对于小分子：D8=0.6～0.8。Notice：分子量越大，弛豫时间越短，分子量越小，弛豫时间越长，温度越高弛豫时间越短。3、lock4、getprosol5、atma；topshim；rga；zg（四）实验四1、new，标准实验选择ROESYPHSW,PH：通过相位循环可以减掉一些峰。2、具体实验步骤与前面的实验步骤大致相同，通过查看与脉冲系列相关的参数对参数进行设置。接着LOCK,getprosol；atma；t