EDTA萃取法分离自然水体中生物膜胞外聚合物康春莉

[]　2002-10-20[]　(20077011),(2000A24).[]　(1963-),,,;(1957-),,,,.[]1000-1832(2003)02-0120-03[]EDTA康春莉,董德明,李忠华,李　鱼,花修艺,郭　平(吉林大学环境与资源学院,吉林长春130023)[　]　用EDTA水溶液作为萃取剂,对自然水体中培养的生物膜胞外聚合物进行了萃取和分离.通过对糖类、蛋白质、DNA含量的测定,选择了最佳萃取分离条件.结果表明该方法萃取效率高、操作简便、重现性好.[]　生物膜;胞外聚合物;分离[]　X132　　　[]　A　　,[1].[2],,[3,4].,,..EDTA,.、DNA,,.1　1.1　仪器和试剂5810R(Eppendorf),JJ-2(),HZQ-F16(),VIS-7220(),400WATTModel(User'sGuide).、EDTA、、、、、、、、、、...1.2　生物膜的培养和实验前处理,,V(H2O)∶V(HNO3)=6∶124h.,第35卷第2期东北师大学报自然科学版Vol.35No.22003年6月JOURNALOFNORTHEASTNORMALUNIVERSITYJune2003DOI:10.16163/j.cnki.22-1123/n.2003.02.02430cm,3.20(0.15g),,200mL,(8000r/min)10min,.1.3　萃取分离方法5mL2mL2%EDTA,10mL,20℃5h,20min,0.45μm,.2　[5].,DNA.、DNA[6].2.1　EDTA浓度的影响EDTA1.1,EDTA,、DNA,2%,,DNA.,2%.2.2　萃取时间的影响2.2,,、DNA.5h,,DNA.,5h.1　EDTA　　　2　　　　　3　2.3　离心转速的影响3.3,,、DNA.6880r/min,,DNA.,6880r/min.2.4　方法的对照分析1.3[7](1.3,38000r/min,20min).F,n=5,95%,.1.、DNA121第2期康春莉等:EDTA萃取法分离自然水体中生物膜胞外聚合物(4℃,20kHz,5min)(5mL+5mL)、DNA.1,EDTADNADNA16%,16%,.EDTA2.82,,EDTA.,,,.1　mg/LEDTA　　　140.8±10.2　　　385.9±10.2　　　538.6±6.4183.7±6.0363.2±5.8612.3±13.2DNA28.8±3.744.5±9.2276.0±9.0　　:、、DNA26%,30%,10%;EDTA、、DNA72%,59%,16%.[　　　][1]　,,.[J].(),2002,34(1):58～65.[2]　,,.[J].(),2001,33(1):64～69.[3]　AkiyoshiOandHidekiH.Anovelconceptforevaluationofbiofilmadhesionstrengthbyapplyingtensileforceandshearforce[J].WatSciTech,1998,34(5-6):429～439.[4]　AzeredoJ.Methodstoextracttheexpolymericmatrixfrombiofilm:acomparativestudy[J].WatSciTech,1999,39(7):243～250.[5]　JohnAandNielsenPH.Cellbiomassandexopolymercompositioninsewerbiofilm[J].WatSciTech,1998,37(1):17～24.[6]　,,.[M].:,1991.138～153.[7]　ZhangXiaoqi.Comparisonofextractionmethodsforquantifyingextracellularpolymersinbiofilm[J].WatSciTech,1999,39(7):211～218.ExtractionofextracellularpolymersfrombiofilmsinnaturalwaterbyEDTAsolutionKANGChun-li,DONGDe-ming,LIZhong-hua,LIYu,HUAXiu-yi,GUOPing(CollegeofEnvironmentandResources,JilinUniversity,Changchun130023,China)Abstract:EDTAsolutionisappliedtoextractextracellularpolymersfrombiofilmcultivatedinnaturalwater.Theoptimumextractionconditionsareselectedbycomparingtheconcentra-tionsofcarbohydrates,proteinsandDNA.Agoodextractionefficiencyandrepeatabilityhavebeenachievedbytheproposedmethod.Also,themethodiseasytooperati.Keywords:biofilm;extracellularpolymers;extraction122东北师大学报自然科学版第35卷