环境微生物技能训练任务书2012完整版

1环境微生物技能训练任务书适用专业：环境工程指导老师：陶雪琴、郭琇、童英林、刘洁萍2012年12月一、实验性质和学时数实验性质：技能训练学时：一周（第16周）二、实验名称多管发酵法测定某水域中的大肠菌群数三、实验程序技能训练实验程序图否否是是待测定的水样小组讨论、设计实验方案指导老师参与讨论方案的可行性及存在的问题进行实验方案可行性论证实验结果评估实验总结，实验报告2四、实验目的与要求使学生综合应用微生物学基本原理和基本实验技术，独立完成培养基的制备与灭菌操作及微生物的分离、观察、描述。可以为污水、垃圾等生物处理进行相关的实验研究独立思考，进行实验设计，提高实验操作技能，并能进行实验结果分析。五、实验内容[基本内容]（1）学习水样的采取方法，采用多管发酵法（MPN）测定水中大肠菌群。[基本要求]（1）掌握测定水中大肠菌群数量的多管发酵法的原理和操作过程；（2）了解大肠菌群数量与水质状况的关系；（3）掌握革兰氏染色的实验原理和染色方法。六、实验分组情况及时间安排1.时间安排周一~周四英东楼415实验室8：00~11：00环工10113：00~16：00环工10216：30~19：30环工103周五总结2.内容安排：第一天初发酵第二天看初发酵结果+平板分离第三天革兰氏染色+复发酵第四天看复发酵结果3.分组安排3个人一个小组，全班10小组。每个小组指定1个小组长，由小组长统筹安排，分工要明确，不要1人包干，每个人都要有事情做。4.程序安排某个河、池或湖水样品→预习建议的参考书→预习所选择的微生物类群的生理特点(教材)→分组→从建议的参考书中选择合适的培养基种类→计算培养基需要量→配置培养基→灭菌待用。每个小组要写一份详细的实验方案，包括要什么仪器，要多少药品，要配多少培养基，水样接种量如何选择。3七、实验操作步骤本实验需要的基本操作训练已经在前面的一些实验中学习过，在这里不再一一列出每一操作步骤。为了帮助预习，将有关操作名称列出，这些操作在建议参考书中都可以找到。1．培养基配置和灭菌2．无菌操作3．细菌染色和显微镜使用4．菌落特征观察和描述5．系列稀释方法八、实习报告（参考论文格式书写）（一人一份）使用统一的封面。主要内容应包括：一、实验名称二、实验目的三、实验步骤（建议按照每天的实验内容去写）四、实验结果与分析（要有图、有数据、有分析）1．接种用水量水样种类接种量（mL）1001010.110-210-310-410-52．大肠菌群数的结果初发酵出现阳性管数复发酵出现阳性管数10mL/管1mL/管0.1mL/管10mL/管1mL/管0.1mL/管3.平板分离编号来源于哪个初发酵管？肉眼观察什么形态、颜色菌落？初步类别判断显微镜观察什么形状菌体？革兰氏染色结果阴性、阳性？1234……计算结果：1L水样中大肠菌群数为（要有计算过程）结果分析：你的平板上观察到了几种典型大肠菌群的菌落？经检查，水样是否合乎相对应的功能标准？五、实验的心得体会（用自己的话写，如有雷同或抄袭，一律扣20分）实验中遇到哪些问题？你是如何解决的？……4注意：1.实习报告需附上小组讨论时的设计实验方案原稿，即手写稿。2.图片最好用彩色打印，可以作为附件放在后面。3.有关标题设置、字体及大小、行距、页面设置等格式请参照《毕业论文格式要求》。摘要、目录、参考文献等不做要求。九、主要仪器设备及试剂光学显微镜、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、电炉、电子天平、移液枪（1mL）、移液管（10mL）洗耳球、试管、三角瓶、烧杯、玻棒、称量纸、培养皿、接种环、载玻片、酒精灯、革兰氏染色液、棉塞、橡皮筋、报纸、纸巾、标签纸十、使用教材及参考书[1]任南琪，马放编著.污染控制微生物学（第四版），哈尔滨：哈尔滨工业大学出版社，2011[2]陶雪琴，郭琇自编.环境微生物学实验指导书，2010十一、注意事项1、要认真对待；2、注意安全；3、节约药品；4、实验要小心细致，不能损坏用具；5、有问题、有困难请找老师；6、实验完后，所有用具清洗干净后，交回给老师清点。十二、考核办法技能训练考核的内容应包括：学生对理论知识的应用能力；动手能力，对实验现象的观察能力，分析问题、解决问题的能力；工作态度、学习态度、团队合作精神、提出问题的能力；实验方案的合理性；实验方法、实验结果表达的正确性；实验预报告、实验报告的正确性、完整性等多方面。（1）各小组成员工作表现、工作量大小、实验技能熟练程度等，占20%，（2）技能训练实验报告总成绩，占80%。总成绩：100分，迟到1次扣5分，缺勤1次扣20分，缺勤2次本课程没有成绩。最后按照优（90分以上）、良（80-89分）、中（70-79分）、及格（60-69分）和不及格（60分以下）五级评分标准综合评定。5附件1可能观察到的典型大肠菌群的菌落照片及描述序号菌落描述（包括颜色、大小、形状、隆起形状、边缘情况、表面状态、表面光泽、质地、透明程度）初步类别判断（疑似）1深紫黑色有金属光泽、直径约3mm、圆形、……、大肠埃希氏杆菌2紫红色……、高凸起、……、柠檬酸盐杆菌3淡红色，中心较深、……、产气杆菌4无色透明、……、副大肠杆菌教学实习报告实习计划名称：环境微生物技能训练学院：环境科学与工程学院实习班级：姓名：学号：指导教师：陶雪琴、郭琇起止时间：2012.12.17—2012.12.23二○一二年十二月