活性污泥中菌胶团及生物相的观察b04d5d59b7360b4c2e3f64fa

活性污泥中菌胶团及生物相的观察一、实验目的1.观察活性污泥（或生物膜）的微生物种类及性状。2.测定污泥沉降比及活性污泥（或生物膜）中动物的数目。3.初步判断污水处理的运行状况是否正常。二、实验原理活性污泥中生物相较复杂，以细菌，原生动物为主。还有真菌、后生动物等。某些细菌能分泌胶粘物质形成菌胶团，进而组成污泥絮绒体（绒粒）。三、实验材料1.活性污泥（或生物膜）取自污水处理厂曝气池2.其他量简（100mL），载玻片，盖玻片，滴管，镊子，计数板等。3.仪器显微镜采用厚玻璃割成9cm长，4cm宽的长方形，玻璃厚度以0.3～0.4cm为宜。利用氢氟酸腐蚀法，使玻板中央刻上10×10=100个小方格，小方格的大小没有严格规定，只要一片大号盖玻片能盖格子有余和便于在显微镜下计数就可以了。用大号盖玻片切成宽约0.7cm的玻条，用阿拉伯树胶粘在计数用的小方格的四周，便呈一周凸起的边框。这样，就制成了一块微型动物计数板。四、实验方法1.测污泥沉降比（SV30）肉眼观察，取曝气池的混合液置于100mL量筒内，直接观察活性污泥在量筒中呈现的絮绒体外观及沉降性能。2.观察活性污泥生物相（1）制备水浸片取活性污泥混合液1～2滴于载玻片上，加盖玻片制成水浸标本片。（2）低倍镜观察观察生物相的全貌，要注意污泥结构松紧程度，菌胶团和丝状菌的比例及生长状况，观察微型动物的种类及活动状况。①污泥絮粒污泥絮粒性状是指污泥絮粒的形状、结构、紧密度及污泥中丝状菌的数量。镜检时可把近似圆形的絮粒称为圆形絮粒，与圆形截然不同的称为不规则形状絮粒。絮粒中网状空隙与絮粒外面悬液相连的称为开放结构；无开放空隙的称为封闭结构。絮粒中菌胶团细菌排列致密，絮粒边缘与外部悬液界限清晰的称为紧密的絮粒；边缘界线不清的称为疏松的絮粒。②丝状微生物活性污泥中的丝状菌数量是影响污泥沉降性能最重要的因素。当污泥中丝状菌占优势时，可从絮粒中向外伸展，阻碍了絮粒间的浓缩，使污泥SV30值和SVI值升高，造成活性污泥膨胀，根据污泥中丝状菌与菌胶团细菌的比例，可将丝状菌分成如下五个等级：0级：污泥中几乎无丝状菌存在；±级：污泥中存在少量丝状菌；＋级：存在中等数量的丝状菌，总量少于菌胶团细菌；＋＋级：存在大量丝状菌，总量与菌胶团细菌大致相等；＋＋＋级：污泥絮粒以丝状菌为骨架，数量超过菌胶团而占优势。（3）高倍镜或油镜观察鉴别丝状微生物的种类，常见丝状微生物的形态特征如下：①球衣菌由许多圆柱形细胞排列成链,外面包围一层衣鞘。②贝氏硫菌具无色而宽度均匀的丝状体，与球衣菌不同的是外面无衣鞘，各丝状体分散不相连接，丝状体由圆柱形细胞紧密排列而成，有时可见硫粒。③发硫菌由细胞排列成丝状体，具薄鞘，但一般镜检时不可见，其丝状体基部有吸盘，可使菌体固着于基质上生长。④霉菌霉菌菌丝有隔膜和直分枝，而且较丝状细菌的丝状体粗。（4）鉴定动物种类在高倍镜下画出动物种类的形态草图，同时注意观察原生动物的形态特征和运动方式，如钟虫体是否存在食物泡，纤毛环的摆动情况。3.动物的计数步骤如下：（1）取活性污泥曝气池混合液盛于烧杯内，用玻棒轻轻搅匀，如混合液较浓，可稀释一倍后观察。（2）取洁净的滴管一支（滴管每滴水的体积应预先测定），一般可选用一滴水的体积为1/20mL的滴管，吸取搅匀的混合液，加一滴（1/20mL）到计数板的中央方格内，然后加上一块洁净的大号盖玻片，使其四周正好搁在计数板四周凸起的边框上。（3）用低倍镜进行计数，注意所滴加的液体不一定布满整个100格小方格，计数时，只要把充有污泥混合液的小方格挨着次序一行行计算即可，若是群体，则需将群体和群体上的个体分别计数。（4）计算，假定在稀释了一倍的一滴水样中测得钟虫50只，则每毫升活性污泥混合液中含钟虫数应为：50只×20×2=2000只五、实验报告1.将镜检和计数结果填入表5-2。2.绘出所见原生动物和微型后生动物形态图。3.试对污水厂活性污泥质量作出初步评价。注意事项：①如果用油镜观察，最好将污泥絮体制成染色片。②如无计数板，则可用下法进行计数：a.取洗净的滴管一支吸取混合均匀的曝气池混合液或已稀释的混合液，滴1滴在载玻片的中央，以盖玻片轻轻盖好水滴，要避免玻片内形成气泡。b.将标本放在显微镜低倍镜下计数。计数时，先将视野放在盖玻片的右上角（可根据各人的习惯放在另一角）然后移动玻片，视野即可随之从上而下，从右到左通过。c.生物滤池和生物转盘上的生物膜形成胶状，浓度大，一般都须稀释后计数，其适当的稀释比可在实践中摸索。d.上述计数方法仅适用于原生动物和轮虫，对个体较大的微型动物和线虫等，则须加大计数容量，以免造成误差。表5-2活性污泥的镜检和计数结果絮体形态圆形、不规则形絮体结构开放；封闭絮体紧密度紧密；疏松丝状菌数量0；±；+；++；+++游离细菌几乎不见；少；多优势种动物名称及状态描述其它动物种名称每滴稀释液中的动物数每毫升混合液中的动物数