水样测定方法及仪器使用

水样检测方法及实验仪器使用说明目录第一部分水样检测方法..........................................1五日生化需氧量（BOD5）.................................1化学需氧量（COD）：COD快速测定仪测样方法..............5纳氏试剂光度法测定水中氨氮............................7亚硝酸盐氮：N-（1-萘基）-乙二胺光度法................9麝香草酚法测定水中硝酸盐氮...........................12过硫酸钾氧化-紫外分光光度法测总氮....................13钼锑抗分光光度法测定水中磷（溶解性正磷酸盐）.........15过硫酸钾消解－钼锑抗分光光度法测总磷.................16总大肠菌群数的测定...................................17粪大肠菌群的检验.....................................20第二部分实验仪器使用说明................................21显微镜的使用.........................................21反射光荧光观察及反射光观察..................................................21OlympusBX51系统显微镜.........................................................29multiN/C3000分析仪操作和应用......................33溶解氧（DO）测试仪应用说明...........................45PH测试原理及使用说明.................................50ORP测试原理及使用说明................................55离子色谱原理与使用...................................57水样检测方法及实验仪器使用说明第1页共65页第一部分水样检测方法五日生化需氧量（BOD5）人们常常利用水中在一定条件下有机物分解所消耗的氧量，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。水样的采集与保存：水样采集时应充满并密封于瓶中。0—4℃下进行保存。一般应在6h内进行分析。在任何情况下，贮存时间不应超过24h。一、稀释接种法生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。1.方法原理目前国内外普遍规定于20土1℃培养5d，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升(mg/L)表示。不同废水应采取的处理方法：某些地面水及大多数工业废水，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1mg/L以上。2.仪器(1)恒温培养箱(20℃土1℃)。(2)5-20L细口玻璃瓶(3)1000ml量筒。(4)玻璃搅捧：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定-小直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。(5)溶解氧瓶：200—300ml带有磨口玻璃塞，且有供水封用的钟形口(6)虹吸管(7)YSI溶解氧测定仪3.试剂(1)磷酸盐缓冲溶液将8.5g磷酸二氢钾(KH2P04)，21.75g磷酸氢二钾，33.4g七水合磷酸氢二钠水样检测方法及实验仪器使用说明第2页共65页(Na2HP04·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4Cl)溶于水中，稀释至1000ml。此溶液的pH应为7.2。(2)硫酸镁溶液将22.5g七水合硫酸镁(MgS04·7H20)溶于水中，稀释至1000m1。(3)氯化钙溶液将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000m1。(4)氯化铁溶液将0.25g六水合氯化铁(FeC13·6H2O)溶于水，稀释至1000m1。(5)盐酸溶液(0.5mol/L)将40m1（ρ=1.18g/ml)盐酸溶于水，稀释至1000ml。(6)氢氧化钠溶液(0.5mol/L)将20g氢氧化钠溶于水，稀择至1000m1。(7)亚硫酸钠溶液(1/2Na2SO3=0.025mol/L)将1.575g亚硫酸纳溶于水，稀释至1000ml，此溶液不稳定，需每天配制。(8)葡萄糖-谷氨酸标准溶液将葡萄糖(C6H12O6)和谷氨酸(HOOC—CH2—CH2—CHNH3—COOH)在103℃干燥1h后，各称取150mg溶于水中，移入1000ml容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。4.步骤(1)准备所需配制的药剂（1）—（8），配制稀释水。(2)将各种玻璃器皿洗净、烘干，检查、校准溶解氧测定仪及培养箱。(3)水样的预处理：水样的pH值若超出6.5—7.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节pH近于7，但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸进行中和。(4)需经稀释水样的测定1)稀释倍数的确定：①地面水，由测得的高锰酸盐指数与一定的系数的乘积，即求得稀释倍数。水样检测方法及实验仪器使用说明第3页共65页高锰酸盐指数（mg/L）系数5—5—100.2、0.310—200.4、0.6200.5、0.7、1.0②工业废水，由COD值来确定，通常需作三个稀释比。由COD值分别乘以系数0.075，0.15，0.225，即获得三个稀释倍数。2)稀释操作一般稀释法按照选定的稀释比例，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水于1000ml量筒中，加入需要量的均匀水样，再引人稀释水至800ml，用带胶板的玻棒小心上下搅匀搅拌时勿使搅棒的胶板露出水面，防止产生气泡。按不经稀释水样的测定相同操作步骤，进行装瓶、使用溶解氧测定仪测定当天溶解氧和培养5d后的溶解氧。另取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水作为空白试验。测定5d前后的溶解氧。(5)计算经稀释后培养的水样BOD5（mg/L）=[(C1－C2)－(B1－B2)f1]/f2式中，B1—稀释水(或接种稀释水)在培养前的溶解氧（mg/L）；B2一稀释水(或接种稀释水)在培养后的溶解氧(mg/L)；f1—稀释水(或接种稀释水)在培养液中所占比例；f2—水样在培养液中所占比例。注f1，f2的计算：例如培养液的稀释比为3%，即3份水样，97份稀释水，则f1=0.97，f2=0.030注意事项：(1)玻璃器皿应彻底洗净。先用洗涤剂浸泡清洗，然后用稀盐酸浸泡，最后依次用自来水、蒸馏水洗净。(2)在两个或三个稀释比的样品中，凡消耗溶解氧大于2mg/L和剩余溶解氧大于lmg/L时，计算结果时，应取其平均值。若剩余的溶解氧小于1mg/L，甚至为零时，应加大稀释比。溶解氧消耗量小于2mg/L，有两种可能，水样检测方法及实验仪器使用说明第4页共65页一是稀释倍数过大，另一种可能是微生物菌种不适应，活性差，或含毒物质浓度过大。这时可能出现在几个稀释比中，稀释倍数大的消耗溶解氧反而较多的现象。(3)水样稀释倍数超过100倍时，应预先在容量瓶中用水初步稀释后，再取适量进行;最后稀释培养。二、红外遥控测定仪1.方法原理样品瓶中加入一定体积的样品后（取样体积与测试量程有关），微生物分解有机物要消耗掉封闭的瓶子上方的氧气，呼吸产生的二氧化碳被NaOH吸收，因此，瓶子上方气压的减少与消耗的氧气量有关，由感测头感测出压力变化，并存贮下来，然后传送到控制器中，控制器把它转换成BOD值。2.仪器及其基本组成(1)恒温培养箱(20℃土1℃)；(2)OC100OxiTop®控制器（遥控器）；(3)OxiTop®-C感测头，电磁搅拌底座及其它附件。3.使用步骤：(1)按键开机；(2)按键；(3)选择startsample，按；(4)出现量程列表(BODRANGE)和污水样加入量(TILLING)；(5)用上下键选择量程；(6)按污水样加入量向样品瓶中加入污水样，搅拌磁子，NTH，两粒，NaOH颗粒，将橡胶套头放在瓶口，将测量传感器拧在样品瓶上；测定BOD（mg/L）样品体积加入NTH（滴）0-4043290-8036570-20025050-40016430-8009720-200043.51水样检测方法及实验仪器使用说明第5页共65页0-400022.71(7)按键；(8)用上下键输入样品编号；(9)将光标移至start处，按键；(10)将样品瓶和磁力搅拌器放入培养箱中，开始测量。4.采集数据步骤:(1)按键开机；(2)按键；(3)将控制器对准传感器；(4)选择Callupalldata按键。化学需氧量（COD）：COD快速测定仪测样方法一、基本原理向水样中添加特制试剂（试剂Q和试剂F），其中含有的汞与氯离子形成络合物从而掩蔽氯离子，硫酸银做催化剂，加速反应，在高温、酸性条件下，用重铬酸钾氧化水中有机物。反应后产生的三价铬离子，通过分光光度法测定其浓度，从而得出相应的COD值。二、试剂配制⑴Q试剂大瓶（500个样）：将Q1或Q试剂放于500ml烧杯中，加入348ml蒸馏水不断搅拌，加入22ml硫酸直至溶解，如难溶，可微热，备用。注：Q1用于地表水实验，Q用于污水实验。⑵F试剂大瓶（500个样）：将F试剂放于盛有2500ml硫酸（AR，比重为1.84）的小口瓶中，过夜或微热即可溶解，摇匀后备用。注：F试剂既用于污水又用于地表水，AR为分析纯。必须待硫酸中的白色水样检测方法及实验仪器使用说明第6页共65页絮状体(F)全部溶解方可使用.以上F试剂和Q试剂，如需配置小瓶的，可参考《5B-3型COD快速测定仪使用说明书》。三、测定步骤⑴测定准备①消解器预热打开消解器的开关，自动升温到165oC（大约需要20－25分钟），消解器自动恒温。②比色主机预热启动速测仪电源开关，显示器显示5-.3，按CE(启动)键，显示器显示YEA，按0%t键，显示“00-00”（一般预热15分钟左右）。③器具准备清洗COD管数和比色皿，并编号。⑵水样测定①测定污水（所测范围：50－1000mg/l；所用波长：610nm）1、用5ml移液管依次准确量取2.5ml水样，分别放于各号COD管中，同时用蒸馏水按相同方法作一空白样。2、分别向各COD管加入Q试剂0.7ml（注：加Q试剂过程中尽量不要贴壁，以保证试剂与水样完全融合）。3、接着分别向各COD管中依次加入4.8ml的F试剂（此过程不要贴壁，应先慢后快，一般在10秒内完成。加入过快或过慢都会使溶液不匀，形成上下颜色不匀，若出现此现象应重做）。4、然后依次插入消解器加热炉，按下“10分钟”键。5、当音乐响起时，依次取出COD管，放置在空气中冷却至不烫手即可（也可以放在冷却槽反应管孔中，按下“2分钟”键，待音乐再次响起时可认为冷却完成）。6、小心向各COD管加入2.5ml蒸馏水，摇匀，放置冷却至室温。7、将空白样和水样分别倒入比色皿中（注：空白样放最外，水样顺次放置），推入拉杆，使空白样比色皿对准光路。8、打开比色池盖，按MODE键，显示TXX，按0%t，直到显示T0.0。水样检测方法及实验仪器使用说明第7页共65页9、盖上比色池盖，显示TX.X，再按100%t，直到显示T100.0为止。10、盖上比色池盖，按MODE键，再按100%t键直到显示C0.000为止。11、拉出拉杆，使盛第一个水样的比色皿对准光路，显示结果即为所测水样COD值，再向外拉出拉杆，依次测定，记录显示结果。12、按上述操作步骤测定其他水样。②测定地表水（所测范围：5－140mg/l；所用波长：440nm）注：1－6步中，第2步与测定污水时不同。2、分别向各COD管加入Q1试剂0.7ml。（注意事项同）注：7－12步与测定污水时不同，改变如下：7、将空白样和水样分别倒入比色