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分批培养•分批培养概念:将定量的微生物接种到封闭的具有•定量培养基的容器中,保持一定的温度、pH、DO,微生物进行生长繁殖。少多少•生长曲线•将少量菌种接种到准备妥当的培养基中,进行分批培养,并且定时取样计数。以细菌的个数或干重质量为纵坐标,以培养时间为横坐标,将取样数据描点绘图,最终可得该细菌的生长曲线。•生长曲线分期:细分可分为6个时期即停滞期(适应期)、加速期、对数期、减速期、静止期、衰亡期。•由于加速期和减速期持续时间很短,则把加速期并到停滞期,把减速期放到静止期中。故,将生长曲线粗分为四个生长期。1.停滞期•生长速率等于零•细胞合成新的成分•–补充消耗的材料•–适应新的培养基或别的培养条件••细胞形态变大或变长•对外界不良环境敏感停滞期-“万事开头难”•停滞期-“万事开头难”适应环境(合成相应的酶),营养储备(用于复制合成)细菌数目的对数值提问:为什么会出现停滞期呢?停滞期影响停滞期长短的因素•1.接种龄:•1)对数期“种子”,停滞期较短;•2)静止期期或衰亡期“种子”,停滞期较长;•2接种量。•1)接种量大,停滞期较短;•2)接种量小,停滞期较长。•3培养基成分:•1)培养基成分丰富的,停滞期较短;•2)培养基成分与种子培养基一致,停滞期较短。2.对数期•特点•生长速率最快,细胞呈对数增长•生长速率恒定•代谢旺盛,细胞成分平衡发展•群体的生理特性较一致指数生长公式:Nt=N0×2n式中N0为起始细胞数目,Nt为指数生长某个时刻t时的细胞数目,n为世代数。N0、Nt和t可由实验获得,n可通过上式计算得出。LgNt=lgN0+nlg2n=(lgNt-lgN0)/lg2=3.3(lgNt-lgN0)3静止期•特点:•活细胞总数维持不变,即新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等,菌体总数达到最高点。•细胞生理上处于衰老,代谢活力钝化,细胞成分合成缓慢。•细胞生长速率为零•营养物质被消耗不能满足生长需要•代谢废物或有害物质积累到抑制生长水平•pH、氧化还原势等物化条件越来越不适应•新生率等于死亡率4衰亡期•特点:•细胞以指数速率死亡;•细胞变形退化。影响衰亡期的因素•与菌种的遗传特性有关:有些细菌的培养经历所有的各个生长时期,几天以后死亡,有些细菌培养几个月乃至几年以后仍然有一些活的细胞;•与营养物质和有毒物质有关:补充营养和能源,以及中和环境毒性,可以减缓死亡期细胞的死亡速率,延长细菌培养物的存活时间。thankyou
本文标题:微生物分批培养
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