致突变试验

环境污染物致突变作用及其评价化学致突变物的检测教学目的与要求2.怎样进行化学致突变物检测？1.如何进行致突变试验的选择？一、遗传学终点和试验配套1.遗传学终点（Geneticendpoint）试验观察到的现象所反映的事件。突变发生过程中的事件及遗传学终点的关系化学物接触细胞屏障DNA损伤无误修复未修复修复错误DNA完整性改变DNA交换重排基因突变染色体结构异常染色体数目异常遗传学终点正常细胞1*表示主要反映的终点，2*表示次要反映的终点常见致突变试验反映的遗传学终点试验DNA完整性改变DNA交换或重排基因突变染色体结构异常染色体数目异常微核1*2*细菌回复突变1*姐妹染色单体交换2*1*细菌DNA修复1*2.试验配套●细菌DNA修复试验（DNA完整性改变）配套原则：遗传学终点齐全配套方案:●微核试验（染色体结构异常和数目异常）●姐妹染色单体交换试验（DNA交换或重排）●细菌回复突变试验（基因突变）二、重要的致突变试验（四）细菌DNA修复试验（一）微核试验（二）姐妹染色单体交换试验（三）细菌回复突变试验（一）微核试验（Micronucleitest）★试验原理★试验设计以染色体结构异常和数目异常为遗传学终点，考察化学物对遗传物质的损伤效应。微核试验原理图小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验★实际案例分析利用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验检测大气污染物SO2的致突变性。★试验方法的确立嗜多染红细胞及其微核实例断颈处死取股骨取骨髓细胞制涂片涂片固定染色镜检：嗜多染红细胞，计数微核率试验流程图吸入SO2染毒吸入洁净空气试验结果分析结论结果1染毒组微核率高于对照组：SO2具有致突变性。结果2染毒组微核率与对照组无差别：用其他试验进一步验证。024681012对照组二氧化硫染毒组微核率（?）024681012对照组二氧化硫染毒组微核率（）结果2结果1（二）姐妹染色单体交换试验(Sisterchromatidexchangetest)以DNA交换或重排为检测终点，考察化学物对遗传物质的损伤效应。★试验原理★试验设计5-溴脱氧尿嘧啶（Brdu）参入DNA互补链造成的姐妹染色单体差示染色原理正常细胞污染物作用后小鼠骨髓细胞姐妹染色单体交换试验试验设计与微核试验类似，不同点主要在于：1.小鼠染毒处理后要接触5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu);2.试验结果中，比较染毒前后染色单体交换位点发生的比率来进行致突变性的评价。●主要知识点：1.遗传学终点及以此为基础的试验配套；2.致突变试验的原理。●知识点的应用：在掌握试验原理的基础上设计试验进行环境化学物致突变性的检测。