抗重金属菌种保藏方法

甘油管保藏法1）用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平板上划线分离单菌落；2）平板倒置与28℃恒温培养箱，培养过夜至长出单菌落大小为3mm左右3）挑取单菌落接种于液体培养基中28℃震荡培养至菌落OD为1.0-1.54）用灭菌的40%甘油：种子液为1:1（V:V）的量混合分装保存注意：如果菌悬液密度不够，可用离心机法现将菌液离心后去除上清液，再加入少量菌液后支撑较高浓度菌悬液石蜡保存法[1]将菌种接种于斜面培养基中，培养好备用。[2]将液体石蜡分装于三角瓶中，加棉塞，并用纸包扎，121℃高压灭菌30min，取出置40℃温箱内除去液体石蜡中的水分。[3]将上述液体石蜡加入已培养好的菌种斜面上，液体石蜡液面以高出培养基最上端1cm为宜，将试管直立，入4℃冰箱中保藏。注意事项。[1]保藏时，用新鲜培养物接种，应检查纯度和特征无误后，方可进行保藏。[2]在保藏过程中，须经常观察斜面是否干燥，如干燥，需要新接种。[3]使用菌种时，先将菌种管倾斜，再用接种针挑取培养物接种到新鲜斜面上培养，待长出新培养物后，再移接一次到新斜面上即可使用。[4]液体石蜡在菌种管中高出培养基的高度一般以高出斜面1cm为宜。[5]制备无菌液体石蜡时，每管装量不能太多，否则分装到菌种培养管中易造成污染。