交叉配血

交叉配血交叉配血的定义交叉配血试验也称配合性试验，使病人，献血者血液之间没有可测到的不相配合的抗原、抗体成分，试验应在37℃下进行。在配血的任何步骤中均不产生溶血或凝集的献血者的血液才能输注给病人。交叉配血的目的交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。尽可能确保任何一个病人，在输了供血者的血之后不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间。交叉配血标本要求交叉配血标本一般选用EDTA抗凝血标本，也可以是血清标本，但鉴于交叉配血需要患者红细胞，临床多选用EDTA抗凝血标本；标本凝块、溶血、严重脂血、标本被细菌污染等应为不合格标本应拒收。交叉配血试验的内容•主侧配血用患者血清与供者红细胞进行试验•次测配血供血者血清与患者红细胞进行试验患者供血者主侧次侧交叉配血的“交叉”含义交叉配血的要求主侧配血要求：不可以有凝集或溶血现象。次测配血要求：供血者血清加受血者红细胞在允许范围内，可以有凝集现象，但不可以有溶血。凝集不凝集★特殊说明：输血不一定要主次侧都相合，主侧不合在有些病种、病情下也可以输血，严格按照相应的配血原则即可。常见交叉配血试验方法盐水介质配血聚凝胺配血抗人球蛋白检测卡配血生理盐水法生理盐水法盐水介质中红细胞上的抗原决定簇与相应抗体分子上的抗原结合位点结合，交叉连接形成肉眼可见的凝集块。盐水介质凝集试验用于IgM抗体的检出。盐水介质配血方法患者献血者主侧次侧离心看结果阳性阴性2%-5%红细胞悬液聚凝胺试验聚凝胺试验原理凝聚胺法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合。再加入带高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。最后加入悬浮液具有中和凝聚胺阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则凝集不散开，试验结果为阳性。操作步骤1.取试管两支，标明主侧次侧，主侧管加受血者血清(血浆)2滴，和供血者3～5％红细胞悬液1滴，次侧管反之。2.各加低离子溶液0.65ml，混合均匀后，再各加凝聚胺溶液溶液2滴，并混合均匀。3．用离心机3400转/min离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。4．轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。聚凝胺试验5．最后加入悬浮液2滴，轻轻转摇动试管混匀并同时观察结果。6.结果判定：如果在60秒内凝集散开，代表是由凝聚胺引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。凝聚胺配血方法患者献血者主侧次侧混合均匀主次侧均加低离子溶液混匀后再加凝聚胺混匀凝聚胺配血方法离心凝聚胺引起红细胞非特异性凝集阳性阴性主次侧均加悬浮液看结果抗人球蛋白检测卡抗人球蛋白检测卡（微柱凝胶法）检验原理抗人球蛋白检测卡利用微柱凝胶卡中的微管来代替传统意义上血型血清学试验用的试管，采用凝胶作为微柱凝胶卡的填充物，利用凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过的特性，将生物化学的凝胶过滤技术、离心技术和血型血清学的抗原抗体特异性反应结合在一起，专供血型血清学试验使用。将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心后观察。凝集的红细胞，被阻挡在凝胶的上部或中央，判断凝集反应阳性；游离的红细胞，可通过凝胶间隙而沉积在凝胶的底部，判断凝集反应阴性。抗人球蛋白检测卡—交叉配血操作示意图1%受血者红细胞稀释10ul压积红细胞＋1ml低离子介质受血者全血供血者全血1%供血者红细胞受血者全血供血者全血25ul血浆50ul25ul血浆50ul抗人球蛋白检测卡——交叉配血操作示意图离心判读孵育阳性：表示受（供）血者血浆或血清中含供（受）血者红细胞血型抗原相应的抗体（IgG或IgM），供受血者不相容；阴性：表示供受血者相容。孵育器离心机检测卡凝集强度示意图及结果判断表4+3+2+1+±dcpPHH-阳性4+表示RBC绝大部分凝聚于凝胶表层。3+表示RBC多数凝聚于凝胶表层，少数RBC凝集颗粒悬浮于近胶表层。2+表示部分RBC沉积于胶底，部分RBC凝集颗粒悬浮于凝胶中。1+表示RBC多数沉积于胶底，可见少数RBC凝集颗粒悬浮于凝胶中。±表示RBC绝大多数沉积于胶底，极少数RBC凝集颗粒悬浮于近胶底。dcp表示混合凝集外观，部分红细胞凝集颗粒集结于凝胶表层，部分红细胞沉于胶底。PH表示部分溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中有残留红细胞。H表示完全溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中无红细胞。阴性—表示RBC全部沉积于胶底。结果判断表几种交叉配血方法的比较方法优点缺点盐水法操作方便,费用低廉只能检出不相配合完全抗体,不能检出不相配合的不完全抗体聚凝胺法方便、应用最广，实用于急诊对罕见不规则抗体抗K敏感性低，且肝素对其有影响,易引起假阴性。抗人球蛋白检测卡（微柱凝胶法）国际安全输血检查的推荐方法，灵敏度高、重复性好、特异性好、检测结果可较长时间保存费用高24配血注意事项在抗体筛查或交叉配血试验时出现弱凝集时，一定要考虑是否有临床意义，有时一些简单的方法可解决问题。如将试管放入37℃水浴数分钟，凝集消散，则很可能该抗体为无临床意义抗体；对有妊娠史（包括流产）、输血史或有过器官移植的病例输用血液时，受血者血清抗体筛查、交叉配血等检查一定要进行不完全抗体的检测；配血注意事项日常工作中，交叉配血，包括ABO血型正反定型、RHD血型定型、受血者血清中不规则抗体检测最好使用两种方法进行平行检测，结果均符合才能发出报告；尤其，在交叉配血时，盐水法、聚凝胺法或微柱凝胶法，一起使用保障输血安全。在分析输血前血型血清学检测结果时，还要注意受血者的一些疾病状况：严重感染、低血浆蛋白血症、肿瘤和器官移植等情况时，患者的血型抗原抗体会发生变化，尤其在治疗前后会出现检测结果不一致。输血前标本采集时间限制：采集患者血液标本与输血时间的间隔越短，与其体内血液真实情况越能相符合。谢谢各位聆听