ProGRP检测及临床应用-继教

2020/8/101胃泌素释放肽前体(ProGRP)检测及临床应用蚌医一附院检验科朱安友2020/8/102ProGRP生物学特性ProGRP实验室检测ProGRP临床应用内容2020/8/103•是一种神经内分泌激素。•普遍存在于非胃窦组织、脑和肺的神经内分泌细胞、神经纤维中。1.ProGRP分布特点和功能一、ProGRP生物学特性•参与刺激胃的G细胞分泌胃泌素；参与平滑肌细胞的收缩、促进细胞间的相互作用，如上皮细胞分裂、增殖等。胃窦2020/8/1042.ProGRP是GRP稳定的前体*aa=aminoacid115,118,125proGRP1273198GRPaa*血液中不稳定t1/2~2min根据其部分氨基酸的变异可分为3种生物大分子，它们具有共同的C末端序列(31-98)，能够在血浆中稳定表达多个裂解产物氨基酸链一、ProGRP生物学特性GRP未被识别的序列GRP稳定的前体2020/8/105GRP在成人和胎儿肺组织和SCLC中发现(Yamaguchietal.)GRP成为SCLC的标志物（Marunoetal.)1983201319891995二、ProGRP实验室检测2009Productionandmolecularsizeheterogeneityofimmunoreactivegastrin-releasingpeptideinfetalandadultlungsandprimarylungtumors.YamaguchiK,AbeK,KameyaT,etal.CancerRes.1983;43(8):3932-9.1、ProGRP检测发展历程雅培化学发光法ProGRP试剂盒国食药监械(进)字2012第3400277号第一个ELISA方法的ProGRP上市ElecsysProGRP检测试剂盒Immunoreactivegastrin-releasingpeptideasaspecifictumormarkerinpatientswithsmallcelllungcarcinoma.MarunoK,YamaguchiK,AbeK,etal.CancerRes.1989Feb1;49(3):629-32.Enzymeimmunoassayofimmunoreactiveprogastrin-releasingpeptide(31-98)astumormarkerforsmall-celllungcarcinoma:developmentandevaluation.AoyagiK,MiyakeY,UrakamiK,etal.ClinChem.1995;41(4):537-43.Developmentandanalyticalperformanceevaluationofanautomatedchemiluminescentimmunoassayforpro-gastrinreleasingpeptide(ProGRP).YoshimuraT,FujitaK,KinukawaH,etal.ClinChemLabMed.2009;47(12):1557-63.Multicenterevaluationofanewprogastrin-releasingpeptide(ProGRP)immunoassayacrossEuropeandChina.KorseCM,HoldenriederS,ZhiXY,etal.ClinChimActa.2015;438:388-95.北京科美化学发光ProGRP试剂盒，并申请了国家专利。2020/8/1062、ProGRP检测原理二、ProGRP实验室检测GRPProGRP31-981—273198115118125采用双抗体夹心法固相载体标记抗体包被抗体2020/8/1073、ProGRP检测原理二、ProGRP实验室检测GRPProGRP31-981—273198115118125双抗体夹心法吖啶酯标记抗体磁性微粒子包被抗体71-7584-8840-60雅培化学发光2020/8/1084、ProGRP检测原理二、ProGRP实验室检测GRPProGRP31-981—273198115118125双抗体夹心法三联吡锭钌标记抗体磁性微粒子包被抗体？-？？-？罗氏电化学发光二者结合区均为不易降解区2020/8/1095、标本要求二、ProGRP实验室检测首选血浆样本，EDTA和肝素锂抗凝血浆都适用。血清中的ProGRP可被在凝集进程中形成的丝氨酸蛋白酶降解。罗氏电化学发光法也可采用血清标本。稳定性：2-8℃保存72小时，20℃保存9小时，-20℃保存12周。勿使用添加叠氮化合物作为稳定剂的样本。2020/8/10106、影响因素二、ProGRP实验室检测ProGRP在血液中的浓度受活动、饮食和精神等因素影响较小。日内和日间波动不大。随着年龄增长而升高，同龄女性高于男性;吸烟人群显著高于非吸烟人群;体重指数(BMI)是一个重要影响因素，肥胖人群ProGRP水平较高;溶血对ProGRP浓度影响不大;肾衰可以导致血浆ProGRP假阳性。2020/8/10117、检测性能二、ProGRP实验室检测ELISA和化学发光两种方法检测ProGRP的灵敏度和特异性均较好，能够满足实验需要。ARCHITECTi2000SR化学发光分析仪检测胃泌素释放肽前体的性能评价结果表明，各项分析性能指标均达到要求，能满足临床需要2020/8/10128、Architect和Roche检测系统的结果比对二、ProGRP实验室检测Multicenterevaluationofanewprogastrin-releasingpeptide(ProGRP)immunoassayacrossEuropeandChina.KorseCM,HoldenriederS,ZhiXY,etal.ClinChimActa.2015;438:388-95.Roche检测可溯源至Architect的ProGRP检测2020/8/10139、参考范围和临界值二、ProGRP实验室检测AbbotARCHITECTi2000分析系统中国人群参考范围：18岁~50岁ProGRP≤57.26pg/mL50岁ProGRP≤81.42pg/mLReferenceintervalsforplasmapro-gastrinreleasingpeptide(ProGRP)levelsinhealthyadultsofChineseHanethnicity.ZhangJ,ZhaoY,ChenY.ZhangJ,ZhaoY,ChenY.IntJBiolMarkers.2014;29(4):436-9Bubanovi等的研究认为以65.89pg/mL作为SCLC诊断的最佳临界值2020/8/1014ProGRP是诊断神经内分泌癌的肿瘤标志物三、ProGRP临床应用小细胞神经内分泌癌（SCNEC)大细胞神经内分泌癌（LCNEC)2020/8/1015病理生理学诊断监测预后ProGRPSCLC是一种神经内分泌癌ProGRP——SCLC的特异性标志物三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)继续关注......?2020/8/1016ProGRP对SCLC诊断有很高的特异性SCLC存在ProGRP显著释放和升高source:PetraStieber,Inst.F.Klin.Chemie,KlinikumderUniversitätMünchen–Grosshadern，2010cut-offProGRP:50pg/mLProGRP在各种肿瘤升高的频率SCLC三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)2020/8/1017ProGRP对SCLC诊断的敏感性最高!肺癌标志物SCLC和NSCLC的敏感性.结果来自Molinaetal.2009等人的研究.CopiedfromabookfromMolinaRetal.„Clinicalvalueoftumormarkers–currentstatusandfutureprospectsProGRP与其他标志物的比较三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)2020/8/1018ProGRP与其他标志物的比较ProGRP与其他标志物相比ROC曲线下面积最大source:Molinaetal.TumorBiol.2008;30,121–129ProGRP对SCLC鉴别诊断价值最高三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)ProGRP150，敏感性65%，特异性94%ProGRP300，敏感性60%，特异性98%2020/8/1019source:Sunagaetal.Oncology1999,57,143–148如果治疗有效，ProGRP水平显著下降；如果治疗无效ProGRP保持稳定或升高。ProGRP监测SCLC的疗效价值三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)2020/8/1020source:Sunagaetal.Oncology1999,57,143–148ProGRP评估SCLC的复发能够反映患者是否出现疾病的复发三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)复发的患者，ProGRP显著升高ProGRP是复发监测敏感性最高的标志物（74%）2020/8/1021ProGRP是SCLC生存的独立预后因子可对高危患者进行密切的监测！SCLC的生存与治疗后ProGRP的水平存在相关性如果SCLC治疗后ProGRP升高，提示患者生存不佳或预后不良。source:Shibayamaetal.LungCancer2001,32,61–69三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)2020/8/1022ProGRPvs.NSE在SCLC鉴别诊断的作用NSE的局限性在局限期SCLC低敏感性神经内分泌肿瘤特异的肿瘤标志物，其他恶性肿瘤也可出现一场升高，10-15%的NSCLC升高红细胞和血小板含有NSE溶血易出现假阳性溶血的样本检测没有意义血清快速分离是必须的标本需要快速储存在+4℃(短期储存，不能超过1h)或-30℃(长期储存）source:MolinaR.EJCMO2009,1,25-32andreferencescitedtherein三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)2020/8/1023ProGRP的优势在正常人和SCLC人群存在较大差异在SCLC的中位值显著高于NSE临床更容易进行决策比NSE敏感性高，包括对局限期溶血样本不会出现假阳性对其他恶性肿瘤，有更高的特异性source:MolinaR.EJCMO2009,1,25-32andreferencescitedtherein三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)ProGRPvs.NSE在SCLC鉴别诊断的作用2020/8/1024ProGRP和NSE具有互补性同时使用两个标志物…•局限期敏感性增加约13%•广泛期的敏感性增加约15%source:MolinaR.EJCMO2009,1,25-32andreferencescitedthereinProGRP不能完全替代NSE在SCLC的应用价值三、ProGRP临床应用—小细胞肺癌（SCLC)ProGRPvs.NSE在SCLC鉴别诊断的作用2020/8/1025肺癌标志物临床指南NACB推荐组织学治疗前治疗后和随访未知CYFRA21-1,NSE,ProGRP,CEA术后：根据组织学结果选择标志物晚期肿瘤：选择首选的标志物腺癌CYFRA21-1和CEACYFRA21-1和/或CEA鳞癌CYFRA21-1和CEA(andSCC)CYFRA21-1和/或CEA大细胞癌CYFRA21-1和CEACYFRA21-1和/或CEA小细胞癌NSE和ProGRPNSE和/或ProGRPsource:NACB:PracticeGuidelinesAndRecommendationsForUseOfTumorMar