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2020届高中生物人教版选修1实验专练:(6)分解纤维素的微生物的分离1、在分离纤维素分解菌的实验过程中,操作有误的是()A.经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B.富集培养这一步可省略,但培养的纤维素分解菌少C.经稀释培养后,用刚果红染色D.对照组可将同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上2、寻找纤维素分解菌应到()A.湿润的环境中B.富含纤维素的环境中C.富含无机盐的环境中D.池塘中3、纤维素分解菌的鉴定实验中,纤维素酶的测定方法一般是()A.对纤维素进行定量测定B.对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定C.对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定D.对纤维素分解菌进行定量测定4、下列关于刚果红染色法的说法,正确的是()A.先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,不需用氯化钠溶液洗去浮色B.倒平板时加入刚果红,可在灭菌后按照每100mL培养基加入1mL的比例加入刚果红溶液,混匀后倒平板C.刚果红染色后,纤维素分解菌菌落周围出现红色D.倒平板时就加入刚果红,长期培养,刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈5、下列有关纤维素分解菌分离实验的说法不正确的是()A.刚果红不能与纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物B.在用刚果红染色时既可以先培养微生物再加入刚果红,也可以在倒平板时直接加入C.该实验需用到选择培养基和鉴别培养基D.在用刚果红染色过程中,若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上,则出现透明圈的菌落一定为所需菌种6、分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是()①稀释倒平板法②涂布平板法③单细胞挑取法④选择培养基分离A.①②B.④③②C.②③D.①③④7、当纤维素被纤维素酶分解后,会在培养基中出现一些透明圈,这些透明圈是()A.是以纤维素分解菌为中心形成的B.是纤维素分解后的葡萄糖C.是由纤维素酶聚集在一起形成的D.是刚果红与纤维素形成的复合物8、刚果红染色时,加入刚果红应在()①制备培养基时②梯度稀释时③倒平板时④涂布时⑤长出菌落时A.①③B.②⑤C.③⑤D.④⑤9、下列关于分离纤维素分解菌的实验的叙述,错误的是()A.经选择培养后将样品直接涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B.当土壤样品中纤维素分解菌数量较多时,选择培养这一步可以省略C.可先在固体培养基上培养微生物,再用刚果红溶液染色D.鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物10、下列与分离分解纤维素的微生物实验有关的说法,错误的是()A.鉴别培养基中的CMC-Na能为纤维素分解菌提供碳源B.纤维素分解菌的选择培养基只能以纤维素粉作为唯一碳源C.两种刚果红染色法筛选出来的目的菌不一定都能分解纤维素D.实验可以通过是否产生透明圈来筛选能分解纤维素的目的菌11、植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解,回答下列问题:1.分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶.其中的葡萄糖苷酶可将__________分解成__________.2.在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成__________色复合物.用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的__________.3.为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见表):注:“+”表示有,“-”表示无.酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲++++-++培养基乙+++-+++据表判断,培养基甲__________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是__________;培养基乙__________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是__________.12、纤维素为白色、无气味的纤维状结构物质,不溶于水,也不溶于一般有机溶剂,而纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。下表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方,回答下列问题:CMC-Na酵母膏KH2PO4琼脂土豆汁5~10g1g0.25g15g100mL1.从土壤中分离纤维素分解菌,最好选择在富含__________的环境中采集土样。2.扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计三个平板,菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量约为__________个/mL。3.如图表示培养菌落的染色结果,在筛选纤维素分解菌的过程中,通常用__________染色法,这种方法可通过是否产生__________来对纤维素分解菌进行初步筛选,原因是该染料并不和纤维素水解后的__________和葡萄糖发生颜色反应。4.某研究小组培养纤维素分解菌,接种时应通过__________法接种,才可得到如图所示结果。若已知菌落2为淀粉分解菌,而菌落1和3为纤维素分解菌或色素分解菌。请你设计一个简便的方法来鉴别1和3。__________。答案以及解析1答案及解析:答案:A解析:经选择培养后,再经梯度稀释,才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,A错误;富集培养可省略,但培养分离的纤维素分解菌少,B正确;经稀释培养后,纤维素分解菌可以用刚果红染色进行鉴别,C正确;设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物,D正确。2答案及解析:答案:B解析:在寻找目的菌株时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找,因此寻找纤维素分解菌应到富含纤维素的环境中寻找。3答案及解析:答案:B解析:在纤维素分解菌的鉴定实验中,纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定,B正确。4答案及解析:答案:D解析:A项,先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,需用氯化钠溶液洗去浮色,若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红,则不需要用氯化钠溶液洗去浮色;B项,倒平板时加入刚果红,可配制质量浓度为10mg/mL刚果红溶液,灭菌后按照每200mL培养基加入1mL的比例加入刚果红溶液,混匀后倒平板;C项,在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈;D项,倒平板时就加入刚果红,因为有些微生物能降解色素,长期培养,刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈。5答案及解析:答案:D解析:刚果红可以与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解成纤维二糖和葡萄糖后,红色复合物无法形成,A正确;刚果红染色有两种方法,一种是先培养微生物再加入刚果红,另一种是在倒平板时就将刚果红染液加入培养基中,然后再培养微生物,B正确;该实验富集纤维素分解菌时需要选择培养基,筛选时需要鉴别培养基,C正确;有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈,因此出现透明圈的菌落不一定为所需菌种,D错误。6答案及解析:答案:B解析:分离土壤中纤维素分解菌,先进行选择培养,增大纤维素分解菌的浓度,再经梯度稀释、涂布平板、单细胞挑取以获得纯培养物。稀释倒平板法是先将土壤浸出液进行梯度稀释,然后分别取不同稀释液少许,与已熔化并冷却到50℃左右的琼脂培养基混合、摇匀,倒入灭菌的培养皿中,制成可能含菌的琼脂平板,保温一定时间即可出现菌落。稀释涂布平板法是先将配制好的培养基倒入无菌培养皿,制成无菌平板,冷却凝固后,将一定量的某一稀释度的样品涂布在整个平板表面,经培养后形成单个的菌落。7答案及解析:答案:A解析:8答案及解析:答案:C解析:常用的刚果红染色法有两种,一种先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红,故选C。(1)先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应优点:显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用缺点:操作繁琐,加入的刚果红会使菌落之间发生混杂(2)在倒平板时就加入刚果红优点:不存在菌落的混杂问题缺点:1)在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物产生假阳性反应2)有些微生物有降解色素的功能9答案及解析:答案:A解析:分离纤维素分解菌时,经选择培养后,样品应稀释后涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,A项错误;选择培养的目的是增加菌体浓度,当土壤样品中纤维素分解菌数量较多时,选择培养这一步可以省略,B项正确;可先在固体培养基上培养微生物,再用刚果红溶液染色,也可以在倒平板时加入刚果红,C项正确;鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物,D项正确。10答案及解析:答案:B解析:11答案及解析:答案:1.纤维二糖;葡萄糖;2.红;透明圈;3.不能;液体培养基不能用于分离单菌落;不能;培养基中没有纤维素,不会形成CR—纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌解析:1.本题主要考查纤维素分解菌的分离和鉴别实验,意在考查考生的识记能力、理解能力和实验分析能力。纤维素酶包括三种组分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,C1酶、CX酶催化纤维素分解成纤维二糖,葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖。2.CR能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,CR—纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌的菌落为中心的透明圈。3.培养基甲中未添加琼脂,为液体培养基,液体培养基上不能形成单菌落,故不能用于分离和鉴别纤维素分解菌。培养基乙中未添加纤维素,不能和CR形成红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌。12答案及解析:答案:1.纤维素;2.1000;3.刚果红;透明圈;纤维二糖;4.稀释涂布平板;向1和3滴加一定量的刚果红染料溶液,右1(或3)中不显出红色,则1(或3)为纤维素分解菌;反之,若显出红色,则为色素分解菌解析:1.一般选择在富含纤维素的环境中采集土样,来获得纤维素分解菌。2.统计微生物数量是通过计算菌落数来计算^的,一般选取菌落数在30〜300范围内的平板进行计数,200、180、220符合要求,则取他们的平均数,即0.2mL样品中含微生物数200个故每毫升样品中微生物的数量约为200/0.2=1000(个)。3.通常用刚果红染色法来筛选纤维素分解菌,观察是否产生透明圈来确定是否有纤维素分解菌的存在,这是因为刚果红不会与纤维素分解后产生的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。4.通过观察图中菌落情况可以确定本实验是通过稀释涂布平板法进行接种的。向1和3中滴加一定量的刚果红染料溶液,若1(或3)中不显示红色,则1(或3)为纤维素分解菌反之若显出红色,则为色素分解菌。
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