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第二章临床血液学检测第四节血型鉴定与交叉配血试验第四节血型鉴定与交叉配血试验2•各种血液成分包括红细胞、白细胞、血小板及某种血浆蛋白在个体之间均具有抗原成分的差异,受独特的遗传基因控制。•血型是各种血液成分的遗传多态性标记。•血型系统:由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系。~1983年,已发现20多个人类红细胞血型系统,400多种血型抗原。•“免疫血液学”•重点讲述与输血工作有密切联系的红细胞血型系统。第四节血型鉴定与交叉配血试验3血型系统•红细胞血型系统–ABO血型系统,1900年,Landsteiner发现–Rh血型系统,1940年,Landsteiner和Weiner发现•其他血型系统–白细胞抗原系统–血小板抗原及抗体–血清蛋白成分的抗原特异性第四节血型鉴定与交叉配血试验4(一)ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体•根据红细胞表面是否具有A或B抗原,血清中是否存在抗A或抗B抗体,ABO血型系统可分为四型:•ABO三个基因组成六种基因型:AA、AO、BB、BO、AB、OO;A、B为显性基因,O为隐性基因,所以只有四种表现型A、B、O、AB。一、红细胞血型系统血型红细胞上抗原血清中抗体基因型AA抗BAA或AOBB抗ABB或BOO无抗A,抗BABABA、B无OO第四节血型鉴定与交叉配血试验5一、红细胞血型系统(一)ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体•A或B抗原在胚胎期及出生时便能检出,但敏感性较低,到20岁左右时才达高峰。抗原性终身不变,但到老年敏感性有所下降。•A和B血型物质除存在于红细胞和其他组织细胞表面外,还广泛存在于体液和分泌液中,以唾液中含量最丰富,脑脊液中无。案例一第四节血型鉴定与交叉配血试验6(一)ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体•人在出生前尚未产生抗体,出生后3-6个月才开始出现,至青春期达高峰。产生抗体的功能可延续终身,但其效价随着年龄增长而逐渐降低。•天然抗体:无明确的抗原刺激而天然存在的抗体,主要是IgM。–环境中广泛存在的微生物、花粉、粉尘等与A或B血型抗原相似,通过隐性刺激产生血型抗体。•免疫性抗体:由已知抗原刺激产生的抗体,主要是IgG。–一般通过输血、妊娠、注射三种途径接触同种异体抗原。一、红细胞血型系统第四节血型鉴定与交叉配血试验7天然抗体和免疫性抗体的区别第四节血型鉴定与交叉配血试验8(一)ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体•抗A、抗B抗体:–抗A与抗B主要是IgM,也有少量的IgG和IgA类抗体。–分泌液和体液中多为IgA类抗体。•抗A、B抗体:–O型人血清中,以IgG为主。–不是抗A和抗B的混合物。–识别A抗原和B抗原的共同表位。一、红细胞血型系统第四节血型鉴定与交叉配血试验9(一)ABO血型系统2、ABO血型的亚型•(1)A亚型–A1亚型红细胞上有A1和A抗原,其血清中含有抗B抗体。–A2亚型红细胞上只有A抗原,血清中含有抗B抗体和少量抗A1抗体。–AX亚型红细胞与B型血清不发生凝集或凝集反应甚弱,但却能与O型血清发生凝集。血型鉴定时,应加O型血清,以防将AX型误定为O型。•(2)B亚型–亚型不多见,临床意义不大。一、红细胞血型系统第四节血型鉴定与交叉配血试验10ABO血型的亚型第四节血型鉴定与交叉配血试验11(一)ABO血型系统3、ABO血型鉴定和交叉配血试验(1)ABO血型鉴定:ABO血型抗体能在生理盐水中与相应红细胞抗原结合而发生凝集反应。由于血液持续存在ABO抗体,所以血型鉴定必须正反定型。•直接试验(正定型、细胞定型):用标准的抗A及抗B血清以鉴定被检者红细胞上的抗原。•反转试验(反定型、血清定型):用标准的A型及B型红细胞鉴定被检者血清中的抗体。•只有抗原鉴定和抗体鉴定完全相符才能肯定其血型类别。一、红细胞血型系统第四节血型鉴定与交叉配血试验12•患者在生病进行治疗的过程中,身体状况不是始终保持一致的,当血型抗原有一方表达减弱,有可能AB型就成了A型,或者B型就变异成了O型。因此,也许三家医院存在验错血型的可能,也可能三家医院都没有验错,而是病人血型出现了变异。•某些病人特别是肿瘤病人在生病治疗时可能发生血型变异。案例二第四节血型鉴定与交叉配血试验13用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果标准血清+被检者红细胞标准红细胞+被检者血清抗A血清抗B血清抗AB血清(O型血清)A型红细胞B型红细胞O型红细胞被鉴定血的血型+-+-+-A型-+++--B型+++---AB型---++-O型加入O型血清:检出抗原性较弱的AX亚型红细胞。加入O型红细胞:检出被检者血清中是否含有与ABO血型系统无关的红细胞异常抗体。第四节血型鉴定与交叉配血试验14血型鉴定方法--玻片法第四节血型鉴定与交叉配血试验15血型鉴定方法--微柱凝胶法•凝胶为填充物,只允许游离红细胞通过•抗A管、抗B管、抗D管:含抗体的凝胶,用于红细胞上A、B及D抗原检测•A细胞、B细胞及Ctl管:不含血型抗体凝胶•A细胞、B细胞用于检测血浆中的抗体•Ctl管用于自身对照ABO/D血型正反定型卡第四节血型鉴定与交叉配血试验16一、红细胞血型系统(一)ABO血型系统3、ABO血型鉴定和交叉配血试验(2)交叉配血试验•输血前必须进行交叉配血实验。•分别将供血者的RBC与受血者的血清及供血者的血清与受血者的RBC进行的配合试验。•交叉配血试验的意义–(1)检验血型鉴定是否有误。–(2)检验血清中是否有不规则抗体。第四节血型鉴定与交叉配血试验17案例三第四节血型鉴定与交叉配血试验18凝集凝集不凝集不凝集交叉配血试验交叉配血的主侧:供血者红细胞+受血者血清交叉配血的次侧:供血者血清+受血者红细胞配血不合,不能输血配血相合,可以输血紧急情况少量缓慢输血,密切观察,如有输血反应,立即停止不凝集第四节血型鉴定与交叉配血试验19一、红细胞血型系统(一)ABO血型系统3、ABO血型鉴定和交叉配血试验(2)交叉配血试验•配血方法–1、生理盐水法:无输血史及妊娠史–2、间接抗人球蛋白法:有反复输血史及妊娠史,尤其是有输血反应史、生育过新生儿溶血病婴儿的妇女、大量输血时须同时做供血者之间的交叉配血实验。–3、卡式微柱凝胶法第四节血型鉴定与交叉配血试验20一、红细胞血型系统(一)ABO血型系统4、ABO血型系统的临床意义•(1)输血:坚持同型输血。•(2)新生儿同种免疫溶血病:母亲与胎儿血型不合引起血型抗原免疫所致的一种溶血疾病。主要见于O型母亲、A或B型胎儿,可发生在第一胎。•(3)ABO血型与器官移植•(4)亲缘鉴定、法医鉴定、疾病相关性调查等案例四案例七案例八、九案例五、六第四节血型鉴定与交叉配血试验21案例四第四节血型鉴定与交叉配血试验22案例五•孕妇陈某,24岁,血型O型RhD阳性;丈夫A型RhD阳性,预产期日入院。次日孕妇肝功能检查异常:ALT:369U/L,TBIL:54µmol/L。剖腹生1子。3h后婴儿皮肤、巩膜黄染明显。肝功能检查:ALT:41U/L,TBIL:298µmol/L。•用蓝光照射及白蛋白注射治疗黄疸进行性加深,全身重度黄染,送上级医院,已错过换血治疗的最佳时间,婴儿病情进展成核黄疸,大脑运动中枢受损。•实验室检查见下表。盐水法木瓜酶法抗人球蛋白试验抗体放散试验直接法间接法患儿-++/放散出IgG-A抗体产妇-+/+第四节血型鉴定与交叉配血试验23案例六•孕妇华某,28岁,血型O型RhD阳性,3年前曾因IgG-抗A抗体效价1:256致死胎。丈夫血型A型,基因型AA型,RhD阳性。怀孕前数月口服甘草、黄芩、茵陈、大茵等中药。•怀孕1个月,测IgG-抗A效价1:8,继续服中药,每半个月复查,孕期IgG-抗A抗体效价控制在1:32内。孕8个月剖腹产。婴儿出生后肝功能检查见表。ALT(U/L)TBil(µmol/L)治疗出生时1010观察2d1215观察5d2637蓝光照10d2245蓝光照20d3220观察30d128出院正常值4010案例七第四节血型鉴定与交叉配血试验25案例八父母子子ABOABO第四节血型鉴定与交叉配血试验26案例九•父母O型→孩子B型?第四节血型鉴定与交叉配血试验27一、红细胞血型系统(二)Rh血型系统1、Rh血型系统的抗原和抗体•抗原–主要有5种。抗原性强弱依次为D、E、C、c、e,以D抗原性最强。–粗略地称含D抗原的红细胞为Rh阳性,不含D抗原的为Rh阴性。我国Rh阴性者甚为少见。•Rh抗体主要是不完全抗体–抗D抗体最常见–主要为免疫性抗体,Rh阴性者接受Rh阳性血后通过免疫产生。–绝大多数为IgG抗体第四节血型鉴定与交叉配血试验28一、红细胞血型系统(二)Rh血型系统1、Rh血型系统的抗原和抗体•Rh血型的亚型•弱D最有临床意义。弱D是D抗原的变异体,其免疫原性较弱。不能与所有的抗D血清发生反应,易被误定为Rh阴性。•做为供血者,弱D是Rh阳性。–如果将弱D血输给Rh阴性受血者时,仍有产生抗D抗体的可能性,因此不能将弱D输给Rh阴性的受血者。•做为受血者,弱D是Rh阴性。–当弱D型人接受输血时应是Rh阴性血,否则可能产生抗D。第四节血型鉴定与交叉配血试验29一、红细胞血型系统(二)Rh血型系统2、Rh血型系统的鉴定•仅用抗D血清进行鉴定,粗略地分为Rh阳性和阴性两类。•鉴定方法–完全抗体:生理盐水凝集试验–不完全抗体:胶体介质法、木瓜酶法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法等第四节血型鉴定与交叉配血试验30一、红细胞血型系统(二)Rh血型系统3、Rh血型系统的临床意义(1)Rh血型系统所致的溶血性输血反应:•Rh血型系统一般不存在天然抗体,故在第一次输血时,不会发现Rh血型不合,Rh阴性的受血者接受了Rh阳性血液输入后便可产生免疫性抗Rh抗体,再次输入Rh阳性血液时,发生溶血性输血反应。•第一次输血不必考虑Rh血型,第二次输血需考虑Rh血型是否相同。第四节血型鉴定与交叉配血试验31•谢小榕AB型Rh阴性•1997年5月30日,车祸。•天津医院抢救时未做Rh血型鉴定,输入了AB型Rh阳性的血。•第二次取钢板的手术不能再输AB型Rh阳性血。•以后存在生育障碍。•2002年9月3日,二审判决要求天津医院对谢小榕因输血引起的损害后果承担60%的责任,肇事司机承担40%的责任。•但判决也同时要求谢小容有防止损害结果发生的注意义务。即尽量注意保护自身安全,防止各种危险情况发生,避免各种医学文献上记载的损害结果出现。案例十第四节血型鉴定与交叉配血试验32案例十一第四节血型鉴定与交叉配血试验33(二)Rh血型系统3、Rh血型系统的临床意义(2)新生儿Rh溶血病•母亲为RhD阴性,胎儿RhD阳性•Rh溶血病一般不发生在第一胎–由于自然界无Rh血型物质–第一次孕儿为Rh+,胎儿的RBC因某种原因(如胎盘绒毛脱落)进入母体,或分娩时进行胎盘剥离过程中血液挤入母体,孕妇体内产生抗Rh的抗体。第二次妊娠时,孕妇体内的抗Rh的抗体,通过胎盘导致胎儿溶血–Rh阴性母亲输过Rh阳性血、有流产或人工流产史,也可发生在第一胎一、红细胞血型系统第四节血型鉴定与交叉配血试验34第四节血型鉴定与交叉配血试验35案例十二•孕妇王某,25岁,孕7个月后死胎。病史:10岁时因贫血曾输血多次。•实验室枪查:孕妇血型为O型RhD阴性,抗D强阳性,滴度1:128。•脐血检查见表。谱细胞Rh-hr盐水法抗人球蛋白试验DCEce1+0+++-+2+00++-+3++00+-+4+++0+-+5+0+++-+6++0++-+7++++0-+80+0++--900+++--10000++--第四节血型鉴定与交叉配血试验40思考题1.ABO血型系统的分类?2.ABO血型系统的临床意义?3.输血前为什么要进行交叉配血试验?4.交叉配血试验的结果判断?5.输血的原则?6.配血方法的选择?7.名词解释血型;交叉配血;直接试验;反转试验第四节血型鉴定与交叉配血试验41测试题1.与O型血易混淆的A亚型是A.A1B.A2C.A3D.AmE.Ax2.A亚型之间输血可能引起输血反应的是:A.A1与A2B.A1与A3C.A1与AmD
本文标题:[诊断学]血型与交叉配血
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