TRACE-DSQ-Ⅱ气相色谱质谱联用仪作业指导书

本细则根据《有机质谱分析方法通则》（JY∕T003－1996）和美国THERMOFisher公司TRACEDSQⅡ气相色谱质谱仪操作说明书制定。1．适用范围本方法适用于易挥发、热稳定的液体、固体样品（溶于溶剂）的分离及定性定量分析，样品气化温度为常压下300℃以下（气化时不分解），分子量范围：1～1050Da；，高分子材料的定性分析（采用裂解器进样）。2．引用标准《有机质谱分析方法通则》（JY∕T003－1996）3．术语、符号、代号详见《有机质谱分析方法通则》（JY∕T003－1996）4．方法、原理详见《有机质谱分析方法通则》（JY∕T003－1996）5．常用试剂和材料试剂：分析纯乙醇、正己烷、丙酮、乙醚、甲醇。6．检测、分析步骤6.1检测仪器仪器名称：TRACEDSQⅡ气相色谱质谱联用仪分子量范围：1～1050Da质量稳定性：0.1amu/12hr灵敏度：EI全扫描1pg八氟萘S/N100:1附件：PyrojectorII裂解器、固体直接进样杆6.2仪器环境要求室内温度：18℃～25℃相对湿度：30％～60％电源电压：200V10V，频率50Hz6.3试样制备方法6.3.1固体样品和高沸点液体用适当溶剂将样品溶解，浓度为0.01～1g/ml，用微量注射器取0.2～1l，进样。6.3.3直接进样杆进样取适量样品于取样量杯中，按仪器设定条件进行分析。6.3.4裂解器进样取适量样品于进样器中按仪器设定条件进行分析。6.4操作过程6.4.1准备与开机6.4.1.1依次开启氦气(0.4~0.5MPa)、计算机电源、GC电源、MS电源。6.4.1.2启动计算机桌面的Tune程序；PC会与MSD自动联机，开始抽真空。6.4.2调谐6.4.2.1开机后仪器稳定2小时以上，选择合适的调谐条件，并观察参考气的质谱峰情况。6.4.2.2选择Tune程序中的Instrument/Diagnostics/AutoTune命令进行自动调谐。6.4.3GC/MS联用时的样品测试6.4.3.1点击图标，Xcalibur工作站，设定气相色谱条件：选定色谱柱，进样口温度，柱箱温度，传输线温度，载气流量、压力，进样量，分流比等；质谱条件：电离方式和条件、离子源温度、数据采集模式(全扫描和选择离子监测)和范围，保存编辑方法。6.4.3.2用样品洗注射器5～10次，每次0.2～1l。在电脑上调用上述编辑好的方法，待色谱及质谱均为“WaitingforContactClosure”时，从气相色谱进样口进样。按“Start”键，电脑自动采集数据；6.4.4固体直接进样杆的样品测试6.4.4.1安装固体直接进样离子源，并选择Tune程序中的固体直接进样杆控制部分。6.4.4.2打开循环冷却用氮气、固体直接进样杆控制器。6.4.4.3将少量样品(肉眼可见)放入固体直接进样杆的小试管中；固体直接进样杆插入固体直接进样离子源的进样孔，打开球阀；在Tune程序中的Insert/RemoveProbe窗口中观察真空度；当真空度显示小于50mTorr将固体直接进样杆推到底，按“Start”键，电脑自动采集数据。6.4.4.4样品测试结束后，仪器自动降温；待固体直接进样杆控制器的温度显示小于100℃时；拉出固体直接进样杆，关闭球阀。6.4.5裂解进样器的样品测试用进样器取10mg样品插入裂解器进样口，在裂解器上设置好裂解炉炉温及载气压力。在电脑上调用上述编辑好的方法，待裂解温度达到设定温度、色谱及质谱均为“WaitingforContactClosure”时，可以进样。按“Start”键，电脑自动采集数据。6.4.6关机：（1）先把离子源温度设定到100℃，让其先冷却。在Tune/instrument点击shutdown，等待Ionsource温度降到目标值；生物论坛,生物秀论坛,中国生物（2）等待GC上传输线（off）、柱温箱（50℃）、进样口温度（off）都降下来；（3）关闭Tune窗口，关闭MS总电源；(4)关闭GC总电源，最后关闭氦气钢瓶。6.5测试结果分析6.5.1定性分析调出谱图，根据需要分别打开离子色谱图窗口和质谱图窗口。选择要分析的离子色谱峰，将其放大，扣本底后取其质谱图。根据质谱仪得到的重要碎片离子、重要的特征离子、分子离子进行可能结构的推测，结合谱库（NIST或WILEY等）中标准图谱搜寻相应信息以提供化合物的可能结构。6.5.2定量分析用质谱法进行定量测定时，要准备标准样品（各待测成分的纯物质或检测用混合物）和待测定样品，在一定的条件下测定其色谱和质谱；根据需要分别打开离子色谱图窗口和质谱图窗口。根据色谱图中保留时间和质谱数据确定分析物质，选择要定量的总离子流色谱、选择离子色谱进行峰面积积分，并结合标准溶液浓度进行定量。定量测定的精密度以多次色谱测定值的相对标准偏差RSD%表示。同一样品平行测定不少于3次，取置信度95%，进行数据处理，计算平均值，标准偏差SD和相对标准偏差RSD%。6.6检测结果报告6.6.1按照测定方法要求计算结果，定量分析应标出分析重复性误差。6.6.2测定数据及计算结果必须经过校核。6.6.3原始记录，测定数据及计算结果记录必须整齐清洁，符合规范，与检测报告及存档件一起，由校核人员校核，送交中心业务办公室，最后由中心授权签字人审核签发。7．注意事项7.1仪器参数设定时要注意不超过色谱柱的最高使用温度。7.2使用的溶剂具有易燃性和毒性，仪器室里要保持通风或安装通风设施，否则，易引起中毒或火灾。7.3在GC背面的柱温箱排气口附近，请勿放置易燃品，以免引起火灾。7.4进样分析进样针要垂直、迅速插入进样口，进样动作要快、准。进样量一般少于两微升，使用微量进样针注射，浓度太低应浓缩。7.5仪器每次使用应检查运行是否正常，发现问题要认真记录。7.6若出现异常现象，应停止采集，检测软件运行情况。如果不能解决，作好故障现象的记录；报有机室负责人，找维修人员进行检查。7.7在运行过程中若突然断电，应立即关闭仪器上所有开关，等供电恢复后再重新开机。在高温下烘烤色谱柱至少1小时，再检查是否有残留化合物留在柱中，若有，则再升温烘烤直至干净为止。8．仪器维护8.1出现载气泄漏时，按使用说明书来检漏。8.2离子源要不定期清洗。清洗、更换质谱部分零件需戴手套，所有工具需干净。8.3溶剂切割时间一般在3分钟左右，以免烧断灯丝。8.4真空泵的专用油6个月更换一次，最多一年更换一次；油泵在潮湿地区计算所频率要增加。仪器开机时，要检查泵运转声音是否正常，油泵排气的含水量是否过大。泵油是否够，排气是否通畅，泵是否漏油等。1-2周开泵的放气阀至1号位，放气10-15min，以放走小分子；放气后需把开关阀门调到0号位。8.5进样垫：①在注入次数约100次时，或保留时间、面积重现性变差检测出现鬼峰时，需要进行进样垫检修和维护和更换；②在进行高灵敏度分析时，需要进行硅橡胶进样垫的调整，去除进样垫的杂质。调整方法：将进样垫浸于己烷中，放置10～15h，然后将进样垫取出放置到干净的容器内，在干净大气中自然干燥，然后在130～150℃的柱温箱中热烘2h。8.6玻璃衬管：在一系列分析前，或保留时间、面积重现性变差检测出现鬼峰时，需要对玻璃衬管进行清洗维护。清洗方法：将石英棉用细棒捅出，然后用蘸丙酮等溶剂的纱布擦洗内壁，再把玻璃衬管放置于装有丙酮的小试管内，超声1h，凉干，在5%DMCS/n-正己烷溶液中浸泡一夜，取出立即用甲醇清洗2-3次，然后再在甲醇中浸1h左右，从甲醇中取出，凉干，置于干燥器中保存。8.7色谱柱：①色谱柱取下暂时不用时，两端要密封以防污染；②柱的老化：使用新色谱或旧色谱柱长时间末用、基线不稳定，出现鬼峰时，需要进行色谱柱的老化。老化方法：从室温开始，以10℃每分钟程序升温到柱最高使用温度-20℃，保持数小时。在新柱老化时，最好不用连接检测器(把检测器接口堵住)。老化前，需要设定检测器温度比柱温高20℃左右；③可以不启动真空泵，如气相色谱一样老化柱，老化时间4-6h，MS柱2-3h；④因难于挥发的成分碳化，用老化的方法不能除去柱内残留的难于挥发的成分时，在注入口侧切掉30～50cm色谱柱。8.8微量注射器：使用前后都需要用丙酮等溶剂洗净20次，以免沾污样品或样品中的高沸点物质沾污注射器。8.9仪器出现较大的波动或故障要报告技术负责人，然后进行处理。9．期间检查为了保证仪器随时处于良好状态，在两次仪器检定之间至少对仪器进行一次期间检查。期间检查的主要参数包括：(1)分辨力，(2)质量范围，(3)信噪比，(4)测量重复性，(5)质量准确性。