脂滴尼罗红染色

1GENMEDSCIENTIFICSINC.U.S.AGMS12196v.AGENMED尼罗红荧光染色溶液产品说明书（中文版）主要用途GENMED尼罗红荧光染色溶液是一种旨在通过与脂类物质的结合并发出荧光检测信号，快速、敏感、可靠地活体定量测定细胞内脂类成分的常用荧光染料。适用于各种细胞包括细菌细胞，也用于蛋白质电泳染色。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，着色清晰灵敏。技术背景尼罗红染色剂（9-diethylamino-5H-benzo[alpha]-phenoxazine-5-one；Nilered）是一种亲脂性的恶嗪类荧光染料。与脂类物质包括腊酯（waxester）和三酰甘油（triacylglycerol）以及各种脂肪酸结合后，在激发波长543nm的激发下，显示强烈桔红色荧光（散发波长598nm）。同时在紫外光的照射下显示红色。产品内容GENMED染色液（ReagentA）（0.5毫克/毫升）1毫升产品说明书1份保存方式保存GENMED染色液（ReagentA）在－20℃冰箱里，避免光照，有效保证6月用户自备HANK平衡盐缓冲溶液（GMS12028）或PBS缓冲溶液（GMS12033）：用于清理细胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（GMS12024）：用于细胞脱离完全细胞培养液（GMS12052）：用于细胞处理所需的培养基15毫升锥形离心管：用于细胞收集的存放微型台式离心机：用于细胞沉淀收集台式离心机：用于细胞沉淀收集1.5毫升离心管：用于细胞检测操作的容器2毫升离心管：用于染色工作液配制的容器37℃培养箱：用于孵育反应物比色皿：用于荧光定量分析荧光显微镜：用于观察荧光细胞荧光分光光度仪：用于定量检测荧光细胞和脂类产量2实验提示方法一、间接法实验开始前，将试剂盒里的GENMED染色液（ReagentA）冻融，置入冰槽里。然后进行下列操作。1．开启荧光显微镜或荧光分光光度仪2．小心抽掉25cm2细胞培养瓶里的培养液3．加入3毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面4．小心抽掉清洗液5．加入1毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，铺满整个培养平面6．置入37℃培养箱1分种7．振动培养瓶，使细胞脱落8．加入5毫升用户自备的完全细胞培养液9．移入15毫升锥形离心管10．放进台式离心机离心10分钟，速度为300g11．小心抽去上清液12．加入1毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液，充分混匀13．移入到新的1.5毫升离心管14．加入微升GENMED染色液（ReagentA）到离心管15．用手指轻轻弹动离心管，使其充分混匀16．在37℃培养箱孵育10分钟，避免光照17．放进微型台式离心机离心30秒，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）18．小心抽去上清液19．加入1毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液，充分混匀20．（选择步骤）放进微型台式离心机离心30秒，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）21．（选择步骤）小心抽去上清液22．（选择步骤）加入1毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液，充分混匀23．检测方法A）荧光显微镜定性分析1）移出10微升离心管中的混匀物到载玻片上2）放上盖玻片或封片3）在荧光显微镜下观察荧光细胞：激发波长543nm，散发波长598nm――显示强烈桔红色荧光细胞的为脂类丰富的阳性细胞B）荧光分光光度计定量分析1）移取1毫升细胞悬液到1毫升比色皿2）放进荧光分光光度计测读：激发波长543nm，散发波长598nm――确定活体细胞脂类产量方法二：直接法实验开始前，将试剂盒里的GENMED染色液（ReagentA）冻融，然后移出2毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到2毫升离心管，加入微升GENMED染色液（ReagentA），混匀后，置入冰槽里，标记为GENMED染色工作液。然后进行下列操作。31．开启荧光显微镜2．小心抽掉25cm2细胞培养瓶里的培养液3．加入3毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面4．小心抽掉清洗液5．加入毫升GENMED染色工作液6．在37℃培养箱孵育10分钟，避免光照7．在荧光显微镜下观察荧光细胞：激发波长543nm，散发波长598nm――显示强烈桔红色荧光细胞的为脂类丰富的阳性细胞注意事项1．本产品为1毫升（0.5毫克/毫升）规格2．操作时须戴手套3．用户可以参考本产品的操作步骤用于细胞分析4．本产品可用于识别、定量、以及动态观察细胞脂类物质变化5．尼罗红为通透性的染料，可以自由进入细胞6．根据细胞株的差异，可以适当调整染料剂量，以增强或降低荧光强度7．细胞培养液里避免使用脂类物质8．孵育时，必须避免光照9．使用时，避免污染母液10．建议细胞染色完成后，即刻进行荧光检测分析11．荧光波长可以用激发波长475nm，散发波长580nm替代12．建议使用本公司的相关产品进行细菌或蛋白方面的尼罗红染色分析13．本公司提供系列尼罗红检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定荧光清晰使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。友情提醒IFITDOESN’TWORK，RECHECKYOUREXPERIMENTTOSEEWHATYOUDIDWRONG。4订购信息编号名称规格GMS12196GENMED尼罗红荧光染色溶液（0.5毫克/毫升）1毫升GMS12024GENMED胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液100/500毫升GMS12028GENMEDHANKS平衡盐缓冲溶液500毫升GMS12033GENMEDPBS缓冲溶液500毫升GMS12052GENMEDDMEM完全细胞培养基500毫升产品编号名称规格GMS30007蛋白电泳尼罗红染色试剂盒20次GMS60038细菌尼罗红染色试剂盒100次GMS80050.1细胞脂质尼罗红染色试剂盒50次GMS80050.2石蜡切片脂质尼罗红染色试剂盒50次GMS80050.3冰冻切片脂质尼罗红染色试剂盒50次GMS12196尼罗红（NILERED）溶液（0.5毫克/毫升）1毫升联系我们关于订购详情或技术支持，欢迎来电、来函、传真或电邮――GENMEDSCIENTIFICSINC.U.S.A大中华区上海分公司上海杰美基因医药科技有限公司上海市浦东新区张江高科技园区哈雷路1011号301室邮编：201203技术部电话：[phone]X101；13661801385市场部电话：[phone]X102；13311661756订购电话：[phone]X104传真：[phone]Email：[e-mail]主页：，SUITE223ARLINGTON，MA02474U.S.A.TEL：[phone]