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3酶化学3.4米氏方程3.4米氏方程酶反应速度与底物浓度的关系中间络合物学说米氏方程推导设定的4个条件:反应速率为初速率,因为此时反应速率与酶浓度呈正比关系,避免了反应产物以及其他因素的干扰酶底物复合物处于稳态即ES浓度不发生变化[S]远大于[E]符合质量作用定律3.4米氏方程3.4米氏方程3.4米氏方程1.解读米氏常数KmKm是酶反应初速率为Vmax一半时底物的浓度。解读米氏方程3.4米氏方程米氏常数的单位为浓度单位。1.解读米氏常数Km解读米氏方程3.4米氏方程•鉴定酶--在指定的实验中进行。•判断酶的最适底物或称天然底物。蔗糖果糖+葡萄糖蔗糖酶(Km为28mmol/L)棉籽糖果糖+半乳糖-葡萄糖蔗糖酶(Km为350mmol/L)1.解读米氏常数Km解读米氏方程3.4米氏方程•可根据米氏方程计算一定速率下的底物浓度或一定底物浓度下反应速率相当于最大反应速率的百分率。如某一反应要求的反应速率达到最大反应速度的99%,则[S]=?Km如:当[S]=3Km时,可求反应速率相当于Vmax的百分数为?%。1.解读米氏常数Km解读米氏方程3.4米氏方程•判别某一代谢物的反应方向和途径。例:丙酮酸可被乳酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶催化,Km分别为1.7×10-5、1.3×10-3和1.0×10-3mol/L,当丙酮酸浓度较低时,走哪条途径?2.解读VmaxVmax也是酶的特征常数,但随着酶浓度的变化而变化。Vmax与Km相似,同一种酶对不同底物的Vmax也不同,pH、温度和离子强度等因素也影响Vmax的数值。解读米氏方程3.4米氏方程3.4米氏方程米氏常数的测定3.4米氏方程双倒数作图法的局限
本文标题:米氏方程
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