生物实验报告(不同水果中的维生素C的含量比较)

湖北大学湖北大学生命科学学院生物化学实验报告不同水果中维生素C的含量比较（间接碘量法）杨勇2014级生物技术产业班2015/5/192一.实验目的1.掌握间接碘量法测定维生素C的原理和方法；2.了解维生素C的功能及测定意义；3.了解不同水果中的维生素C的含量，给维生素C的摄入提供有价值的建议；二.实验原理维生素C又称作抗坏血酸。在1928年，从牛的肾上腺皮质质中提取出来的结晶物质，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效，因此称作抗坏血酸。维生素C，六碳多羟基，酸性化合物，白色针状结晶，有酸味,可溶于水。在弱酸性条件下,可被碘氧化为脱氢抗坏血酸。维生素C的分子式为C6H8O6，分子量为176，分子中的烯二醇基具有还原性，易被氧化为烯二酮基。碘溶液具有氧化性质，可以用标准碘溶液对维生素C进行直接滴定和间接滴定，本实验，我们采用间接滴定法，测定不通水多种水果中的维生素C的含量。反应1.C6H8O6+I2=C6H6O6+2HI；反应2.I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI三.实验器材1.实验仪器：组织搅碎机、容量瓶（50ML）（四只）、电子分析天平、锥形瓶（100ML）（四只）、酸式滴定管、胶头滴管、漏斗（四只）、滤纸、移液枪（带移液枪头）、烧杯（四只）2.实验试剂：2%草酸溶液、1%草酸溶液、0.5%淀粉溶液、2mol/L醋酸溶液、0.01mol/L标准碘溶液、0.01mol/L标准Na2S2O3溶液、新鲜水果（苹果、橙子、柚子、香蕉）四.实验步骤1.提取样品：将新鲜水果用水洗净，用纱布或者吸水纸拭去表面的水。然后各称取20.0g，加2%草酸100ML置于组织搅碎机中打成浆状。然后各称取桨状物5.0g,倒入50ML容量瓶中以2%的草酸溶液稀释到刻度（若浆状物中泡沫较多，可以加入数滴辛醇或者丁醇）。静置10min，过滤(最初的数ML不要）。过滤液体备用。2.完全反应；取四只干净的锥形瓶，分别标上序号或者字样，再分别取过滤试样2.0ML到50ML锥形瓶中，加入9ML1%草酸溶液，加入2mol/L的醋酸溶液2~3ML（调节溶液的ph为5-6弱酸性），然后每个锥形瓶中加入10ML标准碘液，将每个锥形瓶都摇匀，静置1min,待滴定；33.样品滴定：静置后，用0.01mol/L的Na2S2O3溶液滴定溶液中剩余的碘，滴定到浅黄色时，加入2-3滴0.5%淀粉溶液作为指示剂，然后继续滴定到蓝色消失，并且在30s内溶液不变色，此时即为滴定终点，记录下每一组的实验数据，完成下面的表格(表-1)。4.计算。根据实验数据计算每种水果中维生素C的含量（mg/100g）。5.实验分析和评估6.实验小组讨论（为摄入适量维生素C提出有价值的意见）五.数据记录表-1不同水果中维生素C的含量测定苹果橙子梨子香蕉样品过滤液/ml1.01.01.01.01%草酸/ml9.09.09.09.0标准碘溶液/ml10.010.010.010.0滴定前示数0000滴定后示数8.02.410.83.6消耗标准0.01mol/lNa2S4O6溶液8.02.410.83.6维生素C含量（mg/100g）4.87.63.47.0六．计算m=(v1*c1-v2*c2/2)*M*25*100/1000mo式中m：100g水果样品中抗环血酸的含量（mg）；V1:样品溶液中加入的标准碘溶液的体积（ML）；C1:标准碘溶液的浓度（mol/L）;V2：滴定溶液中剩余碘消耗的标准Na2S2O3溶液的体积（ML）；C2:标准Na2S4O6溶液的物质的量浓度（mol/L）；25：稀释倍数25；M：维生素C的摩尔质量；100:水果样品100g；m0:所取水果样品匀浆质量为m0=5.0g；1000:将最终的单位统一为升；2:单质碘和硫代硫酸钠的反应关系为，I2—2Na2S2O3七．实验信息搜集水果种类维生素的含量（mg/100g）苹果5.0梨子4.0香蕉8.0-10.0橙子33.0八．实验分析与思考1.1.维生素C属于不稳定维生素，尤其是在溶液状态下，容易被热、碱、氧和光破坏，在酸性条件下较为稳定。提取维生素C应该迅速，以防样品暴露于空气中被氧化破坏。2.滴定速度应该迅速，并且要注意碘的挥发性。3．有的水果细胞色素对滴定实验可能造成干扰，可以使用一定的脱色剂，再加入指示剂4方面，要把握好时机，判断滴定终点要准确。4.本次试验中，我们所用到的实验试剂均为本组成员自己配制的，在配制过程中，也出现了一些不足或者缺陷，例如，配置溶液，没有是固体完全溶解就进行定容；在提取样品进行过滤时，没有严格静置10min，也没有完全过滤水果匀浆；滴定只进行了一次，没有进行平行滴定以减小偶然误差等；5.在设计实验时，也存在考虑不周方面，经过查阅资料获知100g橙子中的维生素含量大约为33mg，而在设计实验时，将标准碘的加入量定位为10ML，面临着可能不能足的情形；但最终我们的实验结果显示，橙子中维生素C的含量为7.6mg/100g;我们组的橙子实验结果与资料中的有较大的偏差，经分析思考，我们得到，我们组购买的橙子实验样品不够新鲜，在制作组织匀浆时，我们没有采用组织搅碎机，并且在研磨时，没有及时的加入2%草酸，这样可能使得我们组所得到的橙子样品研磨不够充分或维生素C遭到一定程度的破坏，最终这些因素影响着我们所得到的维生素含量；对比资料显示，其他的三类水果中的维生素含量测定比较准确；6.这次生物化学实验对我们提出了要求，涉及到的实验技能也贯穿我们平时实验学习过程中。要掌握基本的实验原理和常用到实验方法，掌握样品制作、一定浓度的溶液配制、溶液的移取、滴定等实验操作；还要求了对整体实验的把握，团体实验的分工配合，还要求我们态度严谨认真；九．实验总结1.对于测定维生素C，我们已经有多种方法和途径，有紫外可见分光光度法、荧光法、2,6-二氯酚靛酚滴定法、碘量法（直接碘量法、间接碘量法）等；2.根据我们这次实验和平时的相关了解，对于我们生活摄入维生素C可以提出一定的意见或者建议，在我们日常生活中应该注意到维生素C对于我们的生理重要性，对于苹果、橙子、梨子、香蕉这几种常见常食用的水果，我们可以选择维生素C含量高的橙子、香蕉，但是我们也应该使用其他水果，不同种水果中维生素的种类和含量不相同，这样就不易出现维生素摄入不足的情形；