蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告

神经干双向动作电位的引导传导速度及不应期的测定组员：陈良鹏肖瑶伍思静袁果曼罗冰清实验目的：观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，掌握坐骨神经制备方法与引导动作电位的方法，理解与刺激和最大刺激强度的概念测定潜伏期时程和波幅，学会通过潜伏期法和潜峰法测定神经冲动的传导速度，通过测定神经干不应期理解兴奋性在兴奋过程中的变化过程。实验对象：蟾蜍实验药品和器材:蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液等。实验原理：1、神经动作电位是神经兴奋的客观标志。当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息电位；当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时水平。神经干兴奋过程所发生的膜电位变化称神经复合动作电位。如果将两个引导电极置于神经干表面时（双极引导），动作电位将先后通过两个引导电极处，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位。2、神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度。3、神经与肌肉等可兴奋组织兴奋性在一次兴奋过程中可发生系列变化，即绝对不应期相对不应期超常期和低常期，组织的兴奋性才逐渐恢复。为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可先给一个条件刺激以引起神经兴奋，然后再用另一检验性刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值以及所引起的动作电位（AP)幅度，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。在本次实验中，主要观察的是不应期的变化，而非整个兴奋性的周期性变化。实验对象：蟾蜍实验步骤及方法:1.坐骨神经—腓神经标本的制备。2.将标本放入神经屏蔽盒，（注意刺激电极端为神经干的中枢端）。3.仪器连接。4.BL-410的操作。实验内容：1、刺激坐骨神经时诱发产生的动作电位由在最适刺激强度时动作电位原图上进行区间测量可知，潜伏期为0.32ms，时程t1为1.92ms，波幅为11.08mV。2、潜峰法测量速度通过测量两个通道的动作电位波峰间的时间差，为（t1-t2）,测量并输入两对引导电极间的距离为（s2-s1），由传导速度和用公式计算传导速度：v2=(s2-s1)/(t1-t2)=v20.02m/0.00080s=25.00m/s3、绝对不应期和相对不应期的测定3、由上图可知当刺激间隔为9.00mS时，第二个刺激引起的动作电位幅度刚好开始降低，的第二个刺激已经落入第一次兴奋的相对不应期，当刺激间隔为1.85mS时,第二个动作电位完全消失，几次是第二个刺激落入第一个刺激的绝对不应期期。相对不应期=总不应期-绝对不应期=9.00ms-1.85ms=7.15ms实验讨论：1、为什么在一定范围内，用电刺激神经，动作电位随刺激强度增大而增大，并没有出现“全或无”的现象？答：一根神经纤维在受到阈值以上刺激产生动作电位不随着刺激强度增大而增大，但是坐骨神经干是有许多神经纤维组成的，在受到阈值以上刺激时，由于引起不同数目神经纤维产生动作电位，但是每个神经对刺激的兴奋性，随着刺激强度增大，神经纤维产生动作电位的数目也越多，动作电位的幅度也就越大，当全部神经纤维都产生动作电位时，动作电位的幅度就不会增大了．故在一定范围内,坐骨神经干动作电位的幅度为何随着刺激强度增大而增大．2、为什么兴奋上神经上出现单向传导？答：因为在一个神经纤维细胞上，当某点受到刺激时，形成产生动作电位，形成局部电流，双向传导，当电流传导到两个神经纤维细胞相接触的部位，即神经突触时，但是兴奋只能从突触前膜穿到突触后膜，所以兴奋上神经上是单向传导的。讨论与分析：1.神经干不能太干也不能太湿，剥离完整后在任氏液体中稳定15分钟左右，取出用滤纸吸干周围的任氏液。2.2.神经干放置在引导电极上时，尽量拉直，不能使它下垂或斜向放置，以免影响神经干长度测量准确性。3.3.神经干要尽可能长，两个引导电极之间的距离越远，测量的传导速度就越准确。