体液检验

体液检验安徽医科大学第二附属医院检验科夏东体液血液、脑脊液、胃液及各种消化液精液、唾液、泪液尿液、阴道分泌液脑脊液检查1浆膜腔积液检查2关节腔积液检查3精液检查4前列腺液检查5阴道分泌物检查6胃液和十二指肠引流液检查7羊水检查8本章内容掌握掌握脑脊液一般性状检查、脑脊液常用化学检查中的蛋白质检查、葡萄糖定量测定和氯化物定量测定、脑脊液显微镜检查的原理、方法和临床意义。熟悉熟悉脑脊液标本采集的注意事项、适应症、禁忌症；常见中枢神经系统病变的脑脊液改变特征。了解了解脑脊液其他检查的（酶学、病原生物学、免疫学）临床意义第一节脑脊液检查一、标本采集和处理（一）标本采集（二）标本转运（三）标本保存和接收二、一般检查（一）理学检查（二）化学检查（三）显微镜检查三、临床应用本节内容第一节脑脊液检查脑脊液（CSF）：存在于脑室和蛛网膜下腔的无色透明液体。1.易通过的物质:氯,钠,镁等离子;2.较易通过的物质:白蛋白,葡萄糖,钙离子,乳酸,氨基酸,尿素和肌酐;3.极难或不能通过的物质:纤维蛋白原,补体,抗体,毒素和药物,及胆红素,胆固醇.血脑屏障的通透性第一节脑脊液检查脑脊液的功能：保护脑脊髓及神经，并通过血管周围间隙供给脑部营养，维持神经细胞的渗透压，酸碱平衡和输出代谢产物。脑脊液检查对中枢神经系统疾病的诊断和预后观察有重要意义适应症①有脑膜刺激症状时，如脑膜感染性疾病。②疑有颅内出血，如蛛网脑膜下腔出血。③中枢神经系统肿瘤。④不明原因的剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪。⑤中枢神经系统疾病需椎管内给药治疗及手术前麻醉、造影等禁忌症①对疑有颅内压升高者，为避免因腰穿诱发脑疝，应先作眼底检查，如有明显视乳头水肿，忌作腰椎穿刺。②休克、衰竭或濒危状态的病人。③穿刺置局部皮肤有炎症的病人。④颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状的病人。第一节脑脊液检查第一节脑脊液检查一、标本采集和处理化学和免疫学检查细菌培养理学和显微镜检查123腰椎穿刺法二、一般检查理学检查显微镜检查化学检查第一节脑脊液检查1、颜色：2、透明度：3、凝固性4、比重第一节脑脊液检查二、一般检查：理学检查颜色正常：无色或淡黄色红色----出血（损伤、病变）黄色----陈旧性出血、黄疸白色----化脓性脑膜炎黑色----脑膜黑色素瘤项目新鲜性出血陈旧性出血外观混浊清亮、透明易凝性易凝不易凝离心后上清液无色透明红色、黄褐色或柠檬色红细胞形态无变化皱缩上清液隐血试验多为阴性阳性白细胞计数不增高继发性或反应性增高脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血鉴别第一节脑脊液检查二、一般检查：理学检查透明度：正常--透明。病毒性脑炎透明结核性脑膜炎毛玻璃样轻度混浊化脓性脑膜炎明显白色混浊第一节脑脊液检查二、一般检查：理学检查凝固性：正常—无凝块。蛛网膜下腔梗阻黄色胶冻状结核性脑膜炎有网膜化脓性脑膜炎有凝块、沉淀物1、脑脊液呈毛玻璃样混浊见于：（）A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、神经梅毒E、隐球菌性脑膜炎2、脑脊液黄色见于（）A、流行性脑膜炎B、化脓性脑膜炎C、蛛网膜下腔出血D、结核性脑膜炎E、脑肿瘤3、脑脊液呈黄色胶冻样见于（）A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、隐球菌性脑膜炎E、蛛网膜下腔梗阻4、脑脊液呈现小絮状凝块见于（）A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、神经梅毒E、蛛网膜下腔梗阻练习题BCED二、一般检查理学检查显微镜检查化学检查第一节脑脊液检查1、蛋白质定性检查2、蛋白质定量测定3、葡萄糖测定4、氯化物测定5、酶及其他成分测定6、蛋白质电泳7、免疫球蛋白分析8、髓鞘碱性蛋白测定第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查蛋白质定性试验—潘氏试验1球蛋白＋苯酚蛋白盐（白色混浊）原理结果＋：白色云雾状混浊＋＋：白色云雾状＋＋＋：＋＋＋＋：正常：阴性白色絮状沉淀立即形成白色凝块状第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查蛋白质定性试验—潘氏试验1注意事项红细胞过多时，须先离心使细胞沉淀，吸取上清液进行试验试验中所用试管应十分洁净，否则易出现假阳性结果。所用试剂苯酚如不纯，亦可引起假阳性反应；室温低于10℃，酚饱和度低，亦可引起假阳性结果。第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查蛋白质定量试验—磺基水杨酸-硫酸钠试验2蛋白质＋磺基水杨酸-硫酸钠A530原理结果腰池0.2~0.4g/L；小脑延髓池0.1~0.25g/L；侧脑室池：0.05~0.15g/L正常：与标准蛋白比较第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查注意事项脑脊液如有多量细胞或混浊，应先离心以除去。如蛋白质浓度过高，应先行用生理盐水稀释后重新测定。加入SS-S试剂的操作手法和速度、室温及比浊前的放置时间都会影响实验结果。故操作时应注意控制加入试剂的方式和比浊时间与标准管一致。应随气温改变，勤作标准曲线。2蛋白质定量试验—磺基水杨酸-硫酸钠试验第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查临床意义血屏通透性增高：脑膜炎；出血性脑病。脑脊液循环障碍：脑部肿瘤；椎管梗阻如脊髓肿瘤、蛛网膜下腔粘连脑脊液蛋白质含量增高。Froin综合征：脑脊液标本外观呈黄色胶冻状，且有蛋白-细胞分离现象，是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特征。2蛋白质定量试验—磺基水杨酸-硫酸钠试验第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法3原理紫红色化合物酶试剂：葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase，GOD)和辣根过氧化物酶(peroxidase，POD)及4-氨基安替比林和2-甲基苯胺显色系统测定管37℃水浴30min葡萄糖＋O2＋H2O→葡萄糖酸＋H2O2（GOD）H2O2＋还原型显色剂→H2O＋氧化型显色剂（无色）POD（紫红色）第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法3参考值成人：2.5-4.4mmol/L临床意义减低：①中枢神经系统细菌性、真菌性感染②中枢神经系统肿瘤增高：主要见于糖尿病患者。鉴别细菌性和病毒性脑膜炎：细菌性脑膜炎显著降低。病毒性脑膜炎，脑脊液葡萄糖含量正常。第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查氯化物测定-葡萄糖氧化酶法4原理2CL-＋Hg（CNS）2→HgCL2↓＋HCNS3HCNS＋Fe（NO3）3→Fe（CNS）3＋3HNO3（紫红色）参考值成人120~130mmol/L第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查氯化物测定-葡萄糖氧化酶法4临床意义减低：细菌性或真菌性脑膜炎；氯化物测定对化脓性脑膜炎和结核性脑膜炎的鉴别有重要意义，脑脊液氯化物含量减低在结核性脑膜炎时为明显。低氯血症增高：脑脊液氯化物含量增高见于尿毒症、呼吸性碱中毒等。第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查酶学检查5项目参考值（U/L）临床意义AST﹤20增高见于脑栓塞、脑萎缩、中毒性脑病、急性颅脑损伤ALT﹤15中枢神经系统转移癌LD﹤40增高见于脑组织坏死、蛛网膜下腔出血、脑出血、脑梗死、脑瘤、脱髓鞘病急性期CK0.5~2增高见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、进行性脑积水、继发性癫痫、多发性硬化症、蛛网膜下腔出血、脑瘤、脑供血不足、慢性硬膜下血肿等ADA0~8增高见于化脓性脑膜炎、脑出血、脑梗死、格林-巴利综合征等中枢神经系统疾病第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查6蛋白质电泳原理正电极负电极——————PH8.6缓冲液α2球蛋白前清蛋白β球蛋白γ球蛋白α1球蛋白清蛋白第一节脑脊液检查第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查6蛋白质电泳参考值前清蛋白2%~6%、清蛋白55%~65%、α1球蛋白3%~8%、α2球蛋白4%~9%、β球蛋白10%~18%、γ球蛋白4%~13%。第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查6蛋白质电泳临床意义前清蛋白增加见于脑萎缩、脑积水及中枢神经变性疾病。清蛋白增加见于脑血管病变、椎管阻塞。α和β球蛋白增加见于脑膜炎、脑肿瘤。β球蛋白增加可见于动脉硬化，脑血栓及脂肪代谢障碍性疾病。γ球蛋白明显增加见于脑肿瘤。第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查7免疫球蛋白质分析原理抗原和抗体在凝胶中或特殊缓冲液中特意结合，形成抗原抗体复合物。通过测定凝胶中抗原抗体复合物沉淀环直径或特殊缓冲液中抗原抗体复合物浊度计算出免疫球蛋白的含量。参考值IgG：10-40mg/L；IgA：0-6mg/L；IgM：0-13mg/L；IgE：极少量。报告方式公式参考值IgG与总蛋白比值IgGcsf/TPcsf≤0.105IgG与白蛋白比值IgGcsf/Albcsf≤0.28IgG指数(IgGcsf/Albcsf)/(IgGS*/Albs)≤0.7IgG合成率*5×[(IgGcsf-IgGs/369)–(Albcsf–Albs/230)×(IgGs/Albs)×0.43]≤3.3mg/d脑脊液免疫球蛋白的报告方式及参考值s:血清csf:脑脊液TP:总蛋白Alb:白蛋白Ig指数:IgG、IgA、IgM计算公式相同。第一节脑脊液检查二、一般检查：化学检查7免疫球蛋白质分析临床意义IgG增高：常见于神经梅毒、化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、小舞蹈病、神经系统肿瘤。IgA增高：常见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤等。IgM增高：常见于化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤、多发性硬化症等。IgE增高：常见于脑寄生虫病等。1、脑脊液蛋白质定性的方法有、、、2、脑脊液蛋白质定量的方法有、、。临床常用的方法是。3、脑脊液氯化物检测方法有、、。临床常用方法为，其参考方法为。练习题4、结核性脑膜炎病人的脑脊液中酶增高程度最显著，可用于结核性脑膜炎的诊断与鉴别诊断。5、化脓性脑膜炎病人的脑脊液典型变化是葡萄糖，蛋白质、氯化物。6、病毒性脑膜炎脑脊液中葡萄糖含量通常为A、减低B、增高C、正常D、明显增高E、明显减低7、脑脊液蛋白质增高最明显的疾病是A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎Ｃ、病毒性脑膜炎D、脊髓肿瘤E、脑动脉硬化练习题练习题8、脑脊液葡萄糖减低最明显的疾病是（）A、化脓性脑膜炎B、真菌性脑膜炎C、结核性脑膜炎D、脑囊虫病E、神经梅毒9、CSF氯化物明显降低见于（）A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、乙型脑炎E、新型隐球菌性脑膜炎10、引起CSF中葡萄糖浓度减低的疾病．除外()A、结核性脑膜炎B、隐球菌性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、化脓性脑膜炎E．脑膜瘤二、一般检查理学检查显微镜检查化学检查第一节脑脊液检查1、细胞学检查2、病原体形态学第一节脑脊液检查二、一般检查：显微镜检查红细胞：无；白细胞：成人（0-8）×106/L；儿童为（0-15）×106/L，新生儿为（0-30）×106/L。白细胞分类以单个核细胞为主，多为淋巴细胞和单核细胞。细胞计数第一节脑脊液检查二、一般检查：显微镜检查细胞检查[方法学评价]一般用脑脊液离心沉渣涂片，经瑞特染色后用油镜分类，但细胞形态常受影响。为了尽可能多地收集细胞和保持完好的细胞结构，国内一些单位已将细胞玻片离心沉淀仪运用于细胞学检查，提高了癌细胞的检出率，在细胞染色技术上也采用了多种方法。二、一般检查：显微镜检查第一节脑脊液检查细胞检查临床意义①红细胞增多见于脑出血、蛛网膜下腔出血、脑脊髓外伤、肿瘤、脑膜炎等。②白细胞增多见于中枢神经系统感染、肿瘤、脑膜白血病等。病毒性脑(膜)炎、脊髓灰质炎等轻度增加（数十1000×106/L），结核性脑膜炎中度增加（＜500×106/L，以混合性细胞为主，中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞同时存在），化脓性脑膜炎显著增加（＞1000×106/L，以中性粒细胞为主）。③中性粒细胞增多：见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎破溃期、乙型脑炎早期、脑出血等。二、一般检查：显微镜检查第一节脑脊液检查④淋巴细胞增多：见于各种病毒性脑膜炎、真菌性脑膜炎（新型隐球菌性脑膜炎白细胞数可达数百×106/L，以淋巴细胞为主）结核性脑膜炎早期及恢复期等。⑤嗜酸性粒细胞增多：见于脑部寄生虫感染(如脑囊虫病)、变态反应等。⑥肿瘤细胞和白血病细胞用细胞浓集法制备涂片，染色后查肿瘤细胞和白血病细胞，对中枢神经系统恶性肿瘤和脑膜白血病的诊断具有重要价值。细胞