农业部953号公告-9-2007

中华人民共和国国家标准农业部953号公告－9－2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻EvaluationofenvironmentalimpactofgeneticallymodifiedplantsanditsderivedproductsDisease-resistantrice2007-12-18发布2008-03-01实施ICS备案号：GB中华人民共和国农业部发布目录农业部953号公告－9.1－2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第1部分：对靶标病害的抗性农业部953号公告－9.2－2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第2部分：生存竞争能力农业部953号公告－9.3－2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第3部分：外源基因漂移农业部953号公告－9.4－2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第4部分：生物多样性影响中华人民共和国国家标准农业部953号公告－9.1－2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第1部分：对靶标病害的抗性EvaluationofenvironmentalimpactofgeneticallymodifiedplantsanditsderivedproductsDisease-resistantricePart1:resistancetotargetdisease2007-12-18发布2008-03-01实施ICS备案号：GB中华人民共和国农业部发布前言农业部953号公告－9－2007《转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻》分为以下四部分：——第1部分：对靶标病害的抗性；——第2部分：生存竞争能力；——第3部分：外源基因漂移；——第4部分：生物多样性影响。本部分是农业部953号公告－9－2007的第1部分。本部分由中华人民共和国农业部科技教育司提出。本部分由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。本部分附录A为资料性附录。本部分起草单位：中国农业科学院生物技术研究所、农业部科技发展中心、中国农业科学院植物保护研究所、中国水稻研究所。本部分主要起草人：金芜军、黄世文、傅强、彭于发、刘信、王锡锋、张永军、宛煜嵩、李宁、宋贵文、沈平、汪其怀。本部分为首次发布。转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第1部分：对靶标病害的抗性1范围本部分规定了转基因抗细菌病害白叶枯病水稻对靶标病害抗性的检测方法。本部分适用于转基因抗白叶枯病水稻在人工接种的情况下对白叶枯病的抗性水平的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分。然而，鼓励根据本部分达成协议的各研究和检测单位使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB4404.1粮食作物种子禾谷类3术语和定义下列术语和定义适用于本部分。3.1转基因抗病水稻transgenicdisease–resistantrice通过基因工程技术将外源抗病基因导入水稻基因组而培育出的抗病水稻品种（系），本标准中特指转Xa21基因或其他抗病基因的抗白叶枯病水稻。4要求4.1试验材料——转基因抗病水稻品种（系）；——对应的非转基因水稻品种（系）；——抗病对照IR26，或根据当地实际或检测要求设定的抗病对照品种；——感病对照品种广陆矮4号，或根据当地实际或检测要求设定的感病对照品种。上述材料的质量应达到GB4404.1中不低于二级水稻种子的要求。4.2资料记录4.2.1试验地名称与位置记录试验地的名称、试验的具体地点、经纬度或全球地理定位系统(GPS)地标。绘制小区示意图。4.2.2土壤资料记录土壤类型、土壤肥力、排灌情况和土壤覆盖物等内容。描述试验地近三年种植情况。4.2.3试验地周围生态类型4.2.3.1自然生态类型记录与农田生态类型地区的距离及周边植被情况。4.2.3.2农田生态类型记录试验地周围的主要栽培作物及其他植被情况，以及当地水稻田常见病、虫、草害的名称及危害情况。4.2.4气象资料记录试验期间试验地降雨(降雨类型、日降雨量，以mm表示)和温度(日平均温度、最高和最低温度、积温，以℃表示)的资料。记录影响整个试验期间试验结果的恶劣气候因素，例如严重或长期的干旱、暴雨、冰雹等。4.3试验安全控制措施4.3.1隔离措施（4.3.2.1和4.3.2.2选一）4.3.1.1空间隔离试验地四周有100m以上非水稻为隔离带。若试验区周边有水稻制种田，隔离距离为200m以上。4.3.1.2时间隔离100m范围内与其它水稻花期间隔20d以上。4.3.2试验过程的安全管理试验过程中如发生试验材料被盗、被毁等意外事故，应立即报告行政主管部门和当地公安部门，依法处理。4.3.3试验后的材料处理转基因抗病水稻材料应单收、单脱、单贮，由专人运输和保管。试验结束后，除需要保留的材料外，剩余的试验材料一律焚毁。4.3.4试验结束后试验地的监管保留试验地的边界标记。当年和第二年不再种植水稻，由专人负责监管，及时拔除并销毁转基因抗病水稻自生苗。5试验方法5.1育秧及移栽参测品种经常规浸种催芽后，播于转基因稻种植区专用检测圃内。播种时间依检测地点和参测品种生育期不同灵活掌握，一般以水稻分蘖盛期后的3周内或孕穗期后的3周内的日平均气温为28～30℃为宜。播种15d后施尿素75kg/ha。在秧龄25-30d时移栽，每品种移栽4行，每行15株，共60株；株行距为20cm×20cm；每2个参测品种间栽插抗、感品种各2行，重复3次，参测品种间采用随机排列。在参测品种四周栽插不少于5行的保护行品种，株行距与参测品种相同。保护行品种选择高秆发病较轻的水稻品种，以避免保护行发病过重影响参测品种的发病。5.2接种时期在水稻分蘖盛期或孕穗期按上述接种方法进行人工剪叶接种。5.3接种接种IV型（籼稻）或II型（粳稻）白叶枯病菌，或按要求接种不同致病力菌株(I～VII型)。接种体在胁本哲氏马铃薯半合成培养基上培养72h，用麦法伦氏比浊法配成3×108CFU/mL菌液。在水稻分蘖盛期或孕穗期，用医用剪刀蘸菌液剪去植株新（剑）叶叶片顶部2cm长（剪口要平），每株剪接主茎3片完全展开的新叶或剑叶，总接种叶片不少于60片。5.4管理移栽至接种期间，田间水肥管理与常规生产一致；移栽后20d和接种前一周各施尿素1次，用量为75kg/ha。参测品种在全生育期内不使用杀菌剂，杀虫剂的使用根据检测圃内害虫发生种类和程度而定，接种前后避免施用任何药剂。接种时田间不积水，接种后使田间保持薄水层，3～4d后观察稻株，待大部分稻株出现初期侵染症状后，灌水保持5cm左右水层。5.5病情调查接种后21d，当感病对照品种的发病程度高于7级（含）时方可认为试验有效，并按附录A表A1调查记录发病情况并进行病情分级。每个参测品种随机调查剪叶接种过的叶片不少于50片。病情指数按公式（1）计算。100TMRNI〕（＝………………………（1）式中：I——病情指数；Σ——调查病害相对病级数值及其株数乘积的总和；N——病害某一级别的植株数，单位为株；R——病害的相对病级数值；M——病害的最高病级数值；T——调查总株数，单位为株。5.6结果分析与表述按附录A相应的病害病情分级及调查记载标准进行调查、记载、评级。用文字和抗级表述评价转基因抗病水稻与对应水稻品种和相应抗、感品种对白叶枯病的抗性差异。附录A（资料性附录）A1水稻白叶枯病的病情分级标准表A1水稻白叶枯病病情分级和调查记载标准病级抗性反应抗性评价0病斑长度小于接种叶片剩余长度5.0%；或病斑面积小于5.0%。高抗（HR）1病斑长度占接种叶片剩余长度5.1-12.0%；或病斑面积占叶面积5.1～12.0%。抗（R）3病斑长度占接种叶片剩余长度12.1-25.0%；或病斑面积占叶面积12.1～25.0%。中抗（MR）5病斑长度占接种叶片剩余长度25.1-50.0%；或病斑面积占叶面积25.1～50.0%。中感（MS）7病斑长度占接种叶片剩余长度50.1-75.0%；或病斑面积占叶面积50.1～75.0%。感（S）9病斑长度大于接种叶片剩余长度75.1%；或病斑面积大于叶面积75.1%。高感（HS）中华人民共和国国家标准农业部953号公告－9.2－2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第2部分：生存竞争能力EvaluationofenvironmentalimpactofgeneticallymodifiedplantsanditsderivedproductsDisease-resistantricePart2:survivalandcompetitiveness2007-12-18发布2008-03-01实施ICS备案号：GB中华人民共和国农业部发布农业部953号公告－9.2-2007前言农业部953号公告－9-2007《转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻》分为以下四部分：——第1部分：对靶标病害的抗性；——第2部分：生存竞争能力；——第3部分：外源基因漂移；——第4部分：生物多样性影响。本部分是农业部953号公告－9-2007的第2部分。本部分由中华人民共和国农业部科技教育司提出。本部分由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。本部分起草单位：中国农业科学院生物技术研究所、农业部科技发展中心、中国农业科学院植物保护研究所、中国水稻研究所。本部分主要起草人：金芜军、傅强、黄世文、彭于发、刘信、王锡锋、张永军、宛煜嵩、李宁、宋贵文、沈平、汪其怀。本部分为首次发布。农业部953号公告－9.2-2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第2部分：生存竞争能力1范围本部分规定了转基因抗细菌病害白叶枯病水稻生存竞争能力的检测方法。本部分适用于转基因抗白叶枯病水稻变为杂草的可能性、转基因抗白叶枯病水稻与非转基因水稻及杂草竞争能力的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分。然而，鼓励根据本部分达成协议的各研究和检测单位使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB4404.1粮食作物种子禾谷类农业部953号公告－9.1-2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第1部分：对靶标病害的抗性GB/T3543.4农作物种子检验规程发芽试验3要求3.1试验材料转基因抗病水稻品种（系）和对应的非转基因水稻品种（系）。上述材料的质量应达到GB4404.1中不低于二级水稻种子的要求。3.2其它要求按农业部953号公告－9.1-2007中“4要求”执行。4试验方法4.1竞争性4.1.1试验设计试验在稻田进行，分为两种处理类型。处理一除正常灌溉外不进行农事操作；处理二按当地常规栽培管理方式进行。小区采用随机区组设计，3次重复。处理一小区面积为6m2（2m×3m），处理二小区面积为24m2（4m×6m）。4.1.2播种和移栽按当地栽培要求进行。转基因抗病水稻在处理一中采取直播方式，播种量为50粒/m2；处理二采取育苗移栽方式，25～30d秧龄（或转基因抗病水稻品种推荐秧龄）时，按当地常规栽插密度或供试品种推荐密度单株移栽。南方稻区早稻为20cm×17cm，中稻为25cm×20cm，晚稻为24cm×20cm。农业部953号公告－9.2-20074.1.3调查方法采用对角线5点取样，杂草调查处理一每点0.5m×0.5m，处理二每点1.0m×1.0m。4.1.4调查和记录处理一：播种后30d调查记录每小区的水稻株数、出苗率。分别在播种后30d及以后每隔20d调查记录每点杂草种类、株数，按植株垂直投影面积占小区面积的比例估算出杂草相对覆盖率；同时每小区随机调查10株水稻的主茎株高、分蘖数、叶片数、生长发育期、相对覆盖率。水稻成熟后每小区随机调查10株水稻每株穗数、每穗粒数、千粒重。处理二：分蘖盛期调查记录每小区水稻株数、成苗率。分别在水稻分蘖期、拔节期、齐穗期和黄熟期调查