DB52T 919-2014 金线莲规范化生产技术规程

ICS65.020.01B38DB52贵州省地方标准DB52/T919—2014金线莲规范化生产技术规程TechnicalregulationsforStandardizedproductionofAnoectochilus2014-09-13发布2014-10-13实施贵州省质量技术监督局发布DB52/T919—2014I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14选种和留种........................................................................25组培苗培育........................................................................26商品苗............................................................................37种植环境..........................................................................48种植设施..........................................................................49基质..............................................................................510种植.............................................................................511种植管理.........................................................................512采收与加工.......................................................................6附录A（资料性附录）三个物种鉴定....................................................7附录B（资料性附录）培养基配制方法..................................................8附录C（资料性附录）种植基质配比....................................................9附录D（资料性附录）金线莲主要病害防治表...........................................10附录E（资料性附录）金线莲主要虫害防治表...........................................11DB52/T919—2014II前言本标准按照GB/T1.1-2009《标准化指导原则第1部分：标准的结果和编写》给出的规则起草。请注意：本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由贵州省农业科学院提出并归口。本标准由贵州省质量技术监督局批准。本标准起草单位：贵州省亚热带作物研究所、贵州省现代中药研究所、贵州师范大学生命科学院。本标准主要起草人：罗晓青、吴明开、乙引、申刚、张宇斌、廖明亮、敖茂宏、张显波、汤毅。DB52/T919—20141金线莲规范化生产技术规程1范围本标准规定了金线莲原植物、选种、留种、组培苗培育、组培苗出瓶分级标准、炼苗、种植环境、种植设施、基质、管理、病虫害防治及产品采收与产地加工的技术要求。本标准适用于贵州省金线莲适生地区，以全草药食兼用为目的的人工种植与推广。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T19630.1有机产品GB3095环境空气质量标准GB5084农田灌溉水质标准GB15618土壤环境质量标准《中药材生产质量管理规范（试行）》（国家药品监督管理局局令第32号，2002）3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1蒴果由两个或多个心皮形成的开裂干果。金线莲蒴果中具有大量无胚乳粉末状的种子。3.2原球茎由金线莲不同部位如种子、茎尖、茎段等诱导产生，具有发育潜能的细胞团。3.3不定芽凡从叶、根、或茎节间或是离体培养的原球茎、愈伤组织等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽。3.4丛生芽DB52/T919—20142不定芽经增殖培养形成的群体丛生芽苗。3.5基质种植中用来固定植株及贮存植物所需水分、养分的材料。金线莲种植常采用的基质有腐殖土、草炭土、碎树皮、碎树叶等按一定比例配制。4选种和留种4.1选种本标准所指的金线莲原植物包括兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）的3个种，即兴仁金线兰（AnoectochilusxingrenensisZ.H.TsietX.H.Jin）、金线兰（Anoectochilusroxburghii（Wall.）Lindl.）、台湾银线兰（AnoectochilusformosanusHayata），经过鉴定确认，鉴定方法见附录A。4.2留种留种应选择植物形态特征典型，植物之间形态差异小，长势均匀，生长健壮的植株进行人工授粉结实获得的蒴果。4.2.1授粉盛花期进行人工授粉，采用异株异花授粉，母本在授粉后立即套袋，挂牌标记。人工授粉只能在同一种内进行。4.2.2结实授粉成功，子房开始膨大时进行疏果，每株留果2～3个；蒴果成熟时，选择饱满的果实采收备用。4.2.3蒴果保存留种蒴果置于冰箱4℃保存备用。5组培苗培育5.1种子无菌培养5.1.1蒴果处理与播种蒴果表面先用清水清洗干净，放在75％酒精里浸泡3分钟，在酒精灯上快速烧干表面酒精，剖开蒴果，将种子播于培养基上，40天左右种子开始膨大，通过种子萌发，经培养获得大量实生苗。5.1.2种子萌发培养基1/2MS+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.1.3增殖分化种子萌发后适时转接，进行增殖分化培养。DB52/T919—201435.1.4增殖分化培养基MS+(1.0～2.0mg/L)6-BA+(0.1～0.2mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.1.5壮苗生根将分化长至2cm～3cm的小苗适时转接，进行壮苗生根培养。5.1.6壮苗生根培养基MS+（0.5～1.0mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.2丛生芽培养5.2.1外植体获取选择健壮的种植植株或野生植株的茎段作外植体，也可从无菌瓶苗中选择外植体。5.2.2外植体处理种植或野生植株金线莲用自来水冲洗干净，清理叶、叶苞鞘、根，用肥皂水浸泡20min，流水冲洗30min，在超净工作台上用75%酒精消毒30s，后用0.1%升汞消毒10min，再用无菌水洗5次，无菌滤纸吸干水分，将植株切为0.5cm长带节的茎段备用。无菌瓶苗可直接在超净工作台上取出，无菌操作，将植株切为0.5cm长带节的茎段备用。5.2.3不定芽诱导与增殖将带腋芽的茎段接种于不定芽诱导与增殖培养基中，经继代增殖培养，形成大量丛生芽。5.2.4不定芽诱导与增殖培养基MS+(1.0～2.0mg/L)6-BA+(0.1～0.2mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.2.5壮苗生根当丛生芽长至2cm～3cm时，转入壮苗生根培养。5.2.6壮苗生根培养基MS+（0.5-1.0mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.3培养条件光照1000Lx～1500Lx，光照时间12h/d，温度（25±2）℃。5.4继代次数原球茎和丛生芽继代控制在6～8代。6商品苗6.1商品苗分级用于种植的苗应无污染，无烂茎，无烂根，叶色正常并展开。商品苗分级标准（见表1）DB52/T919—20144表1金线莲商品苗分级分级/项目根（条）株高（cm）茎粗（cm）优质苗2条～3条≥5.0≥0.25合格苗1条～2条≥4.0≥0.206.2炼苗试管苗移栽前将培养瓶放置于与栽培相近的环境中进行炼苗，利用遮光率为80%遮阳网双层遮阴，温度20℃～28℃，炼苗1周～2周。6.3出瓶用镊子从培养瓶中取出组培苗，清水反复漂洗干净，用杀菌液浸根10min左右。杀菌液应符合GB/T19630.1有机产品规定。7种植环境符合GB3095环境空气质量标准，GB5084农田灌溉水环境质量标准，GB15618土壤环境质量标准。8种植设施8.1设施准备金线莲以保护地种植为宜，可使用温室或大棚等设施种植，配备遮阳网、防虫网、喷雾和灌溉设备。8.2薄膜大棚单栋或连栋大棚。大棚上方和东、西两侧设两层遮光率为80％的遮光网。连栋大棚要确保通风，面积不宜超过1500m2。8.3简易棚用热镀锌钢管（或其它坚固材料）插地建成，棚高度2.8m～3.5m。棚上方和东、西两侧覆盖两层遮光率为80％的遮光网。8.4喷灌系统安装可以形成雾状的喷头进行喷灌。8.5种植苗床8.5.1高架苗床高架苗床,材料选用钢架或其它坚固材料，架高0.6m～0.8m，架宽1.0m～1.5m，架间距0.4m～0.6m。8.5.2水泥瓦苗床用砖块支撑离地面高0.2m～0.3m的水泥瓦苗床，苗床宽1.0m～1.5m，苗床间距0.4m～0.6m。DB52/T919—201459基质9.1基质选择基质用腐殖土、草炭土、碎树皮、碎树叶等按一定比例配制而成（见附录B）。9.2基质处理树皮和树叶粉碎至0.5cm～1cm大小。充分腐熟，经太阳暴晒2～3d，并用1:1000的高锰酸钾溶液喷雾处理。9.3基质铺设9.3.1将基质铺在种植苗床上，厚约8cm～10cm。9.3.2高架苗床，先用孔径小于0.5cm的塑料网铺于框架上，再铺上种植基质。9.3.3水泥瓦苗床，先用直径3～5cm的小石子铺于水泥瓦凹沟里，再铺上种植基质。10种植10.1金线莲种苗种苗应达到本标准“6商品苗”的合格种苗质量要求。10.2种苗处理用清水仔细冲洗种苗根部附着的培养基，清洗干净后用1:1000高锰酸钾溶液浸根10min左右。10.3种植季节金线莲适宜种植季节为每年3月～6月。10.4种植方式种植前2天将苗床基质浇透、浇均匀，阴干待用。以株为单位种植，株行距按5～8cm×8～10cm。栽植深度以基质盖过根系与少许基部即可。11种植管理11.1光照5月～10月需在大棚顶上和东、西两侧面太阳照射到的地方采用两层80％的遮阳网遮阴，其他时间用一层80％的遮阳网。11.2温湿度金线莲生长适宜温度为20℃～28℃，空气湿度为65％～80％。11.3水分11.3.1水源要求符合GB5084农田灌溉水质标准。DB52/T919—2014611.3.2浇水以保持基质湿润为宜。一般情况每天上午9:00之前喷灌，每天一次；持续干旱季节在下午17:00以后再喷灌一次。11.3.3雨季应及时开沟排水，避免棚内及四周积水。11.4施肥11.4.1施肥原则:可少施或不施肥。1