DB13T 1444-2011 饲料添加剂 葡萄糖氧化酶

ICS65.120B46DB13河北省地方标准DB13/T1444—2011饲料添加剂葡萄糖氧化酶2011-09-05发布2011-09-15实施河北省质量技术监督局发布DB13/T1444—2011I前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由河北省科学院提出。本标准起草单位：保定鲜尔康生物工程有限责任公司、河北省饲料产品质量监督检验站、保定市标准化所、河北省科学院。本标准起草人：王卫国、米振杰、武英利、李海龙、李惠玉、唐金金、辛春艳。DB13/T1444—20111饲料添加剂葡萄糖氧化酶1范围本标准规定了饲料添加剂葡萄糖氧化酶的术语和定义、要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输、贮存。本标准适用于以特异青酶（Penicilliumnotatum）为生产菌种，发酵生产的葡萄糖氧化酶制剂。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T5917.1饲料粉碎粒度测定两层筛筛分法GB/T6435饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T9724化学试剂pH值测定通则GB10648饲料标签GB/T13079饲料中总砷的测定GB/T13080饲料中铅的测定原子吸收光谱法GB/T13082饲料中镉的测定方法GB/T13091饲料中沙门氏菌的检测方法GB4789.3－2010食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB/T17480－2008饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法GB/T13093饲料中细菌总数的测定GB/T14699.1饲料采样3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1葡萄糖氧化酶活力单位在pH5.6的磷酸缓冲液、30℃温度的条件下，每分钟催化氧化1µmol葡萄糖转化为葡萄糖酸的酶的量，为一个酶活力单位，以GODU表示。4要求4.1感官指标DB13/T1444—201124.1.1固体剂型：为黄棕色粉末，色泽一致，无结块，气味微酸、无其它异味；4.1.2液体剂型：为淡黄至浅棕色半透明液体，气味微酸、无其它异味。4.2理化指标应符合表1规定。表1理化要求项目要求固体液体畜禽用水产动物用反刍动物用所有动物用指标（酶活力）15GODU/g12GODU/g15GODU/mL酶活力为标示值的≥（％）85干燥失重（％）≤12.0_______细度（通过0.45mm分析筛％）≥808580_______pH值4.6－5.44.4－5.44.3卫生指标应符合表2规定表2卫生指标项目要求固体液体砷，mg/kg≤3.03.0铅（以Pb计），mg/kg≤8.05.0镉（以Cd计），mg/kg≤0.50.5沙门氏菌不得检出不得检出大肠菌群（个/100g）≤30003000黄曲霉毒素B1（µg/kg）≤0.10.1细菌总数（cfc/g）或（cfc/ml）≤5×1055×1045试验方法本标准所用试剂除特殊表明外，均为分析纯。所用水均应符合GB/T6682中三级水规格。所需的标准溶液，没有表明时，均按GB/T601、GB/T603规定的方法制备。5.1试剂和溶液5.1.1葡萄糖磷酸缓冲液（20g/L）：称取20g无水葡萄糖，用0.06mol/LpH5.6磷酸缓冲液溶解，定容至1000mL。5.1.2NaOH标准滴定溶液（0.1mol/L）。5.1.3HCL标准滴定溶液（0.1mol/L）。DB13/T1444—201135.1.4酚酞指示剂（10g/L）称取酚酞1g溶于100ml90％乙醇中。5.1.5磷酸缓冲液（0.06mol/LpH5.6）NaH2PO4·2H2O溶液：称取NaH2PO4·2H2O9.36g，加水溶解，定容至1000mL，摇匀即可；Na2HPO4·12H2O溶液：称取Na2HPO4·12H2O21.48g，加水溶解，定容至1000mL，摇匀即可；取上述NaH2PO4·2H2O溶液和Na2HPO4·12H2O溶液按20:1比例混合，用NaH2PO4·2H2O溶液或Na2HPO4·12H2O溶液调pH值至5.6即可。5.2仪器设备5.2.1分析天平,感量0.01g。5.2.2磁力搅拌器。5.2.3pH计：精度为0.01单位。5.2.4分样标准筛：孔径0.45mm。5.2.5恒温水浴震荡器：温差±0.2℃，震荡频率50～220rpm。5.3pH测定a)固体产品取样10g加50ml水摇匀，浸30分钟，用滤纸过滤，取上清液按GB/T9724规定的方法测定。b)液体产品直接按GB/T9724规定的方法测定。5.4干燥失重的测定称取试样约5g，按照GB/T6435中8.2的规定测定。5.5细度测定按照GB/T5917的规定执行。5.6砷含量的测定按照GB/T13079规定执行。5.7铅含量的测定按照GB/T13080规定执行。5.8镉含量的测定按照GB13082规定执行。5.9饲料中沙门氏菌的测定按照GB/T13091规定执行。5.10大肠菌群计数按照GB4789.3－2010规定执行。5.11饲料中黄曲霉毒素B1测定DB13/T1444—20114按照GB/T17480－2008规定执行。5.12细菌总数的测定按照GB/T13093规定执行。5.13葡萄糖氧化酶测定5.13.1原理葡萄糖氧化酶是一种需氧脱氢酶，能催化氧化葡萄糖生成葡萄糖酸。用过量的氢氧化钠中和产生的葡萄糖酸，再用盐酸返滴定，即可求得葡萄糖酸的产量，根据产葡萄糖酸量表示酶活力高低。5.13.2测定方法取固体产品10.00g置250mL锥形瓶中。准确加入适量蒸馏水稀释,使酶液浓度控制在2.4～3.5U/mL范围（记录稀释倍数f）。搅拌摇匀后于4～8℃冰箱中浸提15～16小时，用中性快速滤纸或细绸布过滤，滤液作为测定液；准确量取液体产品，用适量蒸馏水稀释，使酶液浓度控制在2.4～3.5U/mL范围（记录稀释倍数f），作为测定液。取2％葡萄糖磷酸缓冲液25.00mL置250mL锥形瓶中，于恒温摇床上30℃、150rpm预热3分钟，准确加入上述测定液1.00mL，立即置恒温摇床上，30℃、150rpm振荡反应60分钟取出（准确计时）；立即准确加入0.1mol/L的氢氧化钠溶液20.00ml，振摇终止反应；加酚酞指示剂1滴，用0.1mol/L盐酸滴定剩余的氢氧化钠，记录所消耗的盐酸毫升数A。空白对照，取2％葡萄糖磷酸缓冲液25.00mL置250mL锥形瓶中，准确加入0.1mol/L的氢氧化钠溶液20.00ml，摇匀，再准确加入酶液1.00mL，酚酞指示剂1滴，用0.1mol/L盐酸滴定剩余的氢氧化钠，记录所消耗的盐酸毫升数B。5.13.3计算葡萄糖氧化酶活力单位(GOD/g或mL)=601000fB×××−NA）（(1)式中：A----反应后消耗的盐酸（mL）；B----反应前消耗的盐酸（mL）；N----盐酸摩尔浓度（mol/L）；f-----稀释倍数60----为反应60分钟，按分钟计；6检验规则6.1出厂检验6.1.1每批产品应有企业质量检验部门进行出厂检验，检验合格后签发合格证出厂。6.1.2出厂检验项目a)固体剂型：感官指标、酶活力、干燥失重、细度、pH值、细菌总数。b)液体剂型：感官指标、酶活力、pH值、细菌总数。6.2型式试验DB13/T1444—201156.2.1型式检验项目为本标准第4章规定的全部项目。6.2.2有下列情形之一时，应进行型式检验：a)新产品定型投产时；b)原料、加工工艺有调整可能影响产品质量时；c)连续正常生产每年进行一次；d)停产或转产半年又继续生产时；e)上级质检部门提出型式检验要求时。6.3组批抽样6.3.1组批以每一班次生产的、同一质量规格、同一包装的产品为一批。6.3.2采样方法按照GB/T14699.1规定的方法进行。6.4判定规则检验结果全部指标符合标准要求，判定该批产品合格。如果检验结果中有一项指标不符合标准要求时，应重新抽样进行复检。复检取样范围或样品数量是第一次的两倍，复检结果中仍有指标不合格时，则判定整批产品不合格。卫生指标不合格不得进行复检。7标志、包装、运输、贮存7.1标志7.1.1包装标志产品外包装需注明：品名、规格、注册商标、生产厂家等，并采用鲜明的饲料标签和检验合格证。7.1.2标签产品标签应符合GB10648之规定。7.2包装内包装为塑料膜或瓶（桶），外包装为复合纸袋或纸箱，也可按用户要求包装。7.3运输在运输过程中应防雨、防潮、防晒，装卸时应轻拿轻放。7.4贮存产品贮存在清洁、阴凉、干燥的库房中，严禁与有毒、有腐蚀性物品和其它污染物混装、混贮。液体产品可贮存在4～8℃或常温条件下。7.5保存期DB13/T1444—20116在规定的贮运和包装条件下，原包装从生产之日起液体产品（4～8）℃为12个月，常温下为6个月。固体产品常温下为12个月。_________________________________