DB34T 1035-2009 饲料中总砷和无机砷的测定

DB34安徽省地方标准DB34/T1035—2009饲料中总砷和无机砷的测定2009-10-21发布2009-10-21实施安徽省质量技术监督局发布食品伙伴网—2009前言本标准由安徽省畜牧兽医局提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。本标准起草人：丁在亮、刘发全、张尤贞、刘红云、张莉、许世富、丁作坤、陶小平、蔡东东。本标准首次发布。食品伙伴网—2009饲料中总砷和无机砷的测定1范围本标准规定了用原子荧光光度法测定饲料中总砷和无机砷的方法。本标准适用于配合饲料、预混合饲料、浓缩饲料和单一类饲料中总砷和无机砷的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的昀新版本。凡是不注日期的引用文件，其昀新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样方法3原理3.1总砷的测定试样经酸消解或干灰化破坏有机物，使砷成离子状态存在，加入硫脲（或碘化钾、氯化亚锡）将高价砷还原为三价砷，再加入硼氢化钠(NaBH4)或硼氢化钾(KBH4)在盐酸介质中还原成砷化氢(H3As)，由载气(氩气)带入原子化器中进行原子化，在砷特制空心阴极灯照射下，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与砷含量成正比。与标准系列比较定量，测定总砷。3.2无机砷的测定试样在1+1盐酸溶液中，经70℃水浴加热后，无机砷以氯化物的形式被提取，实现无机砷和有机砷的分离，在2mol/L盐酸条件下与硼氢化钠(NaBH4)或硼氢化钾(KBH4)反应还原成砷化氢(H3As)，由载气(氩气)带入原子化器中进行原子化，在砷特制空心阴极灯照射下，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与砷含量成正比。与标准系列比较定量，测定无机砷。4试剂和溶液实验室用水应符合GB/T6682中二级用水的规格，使用的试剂除另有说明外，应为分析纯。4.1盐酸。4.2硝酸。4.3硫酸。4.4高氯酸。4.5六水硝酸镁。4.6硫脲。4.7碘化钾。4.8氢氧化钠。4.9硼氢化钠。4.1010%盐酸或硝酸(V/V)：准确量取100mL盐酸或硝酸于1000mL容量瓶中用水定容至刻度，摇匀。4.11碘化钾-硫脲混合溶液：称取碘化钾10g，硫脲5g溶于水中，溶解后稀释至100mL，混匀。4.12盐酸(1+1)：量取盐酸（4.1）与水1比1混合，摇匀。食品伙伴网—20094.13氢氧化钠(8g/L)：精确称取8g氢氧化钠(4.8)，于1000mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。4.14氢氧化钠(100g/L)：精确称取10g氢氧化钠(4.8)，于100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。4.15硼氢化钠溶液(10g/L):称取10.0g硼氢化钠(4.9),溶于氢氧化钠溶液(4.13)中，然后稀释至至1000mL(也可以用14.0g硼氢化钾代替硼氢化钠)。此溶液可在冰箱中保存10天。4.16硫酸溶液(1+9)：量取硫酸（4.3）100mL，小心倒入900mL水中，摇匀。4.17硝酸镁(150g/L):称取150.0g六水硝酸镁（4.5）,溶于1000mL水中，混匀。4.18砷标准储备液（0.1mg/mL）:精确称取0.1320g于100℃干燥2小时的基准三氧化二砷（As2O3），加100g/L氢氧化钠（4.14）1.0mL和少量水溶解后水转入100mL容量瓶中，加25mL(1+9)硫酸（4.16），摇匀，冷却至室温后，用10%盐酸或硝酸(4.10)定容至刻度。贮存于冰箱中，备用。此溶液含三价砷（A3+）1mg/mL。4.191μg/mL砷标准应用液:砷浓度为。取1.0mL砷标准储备液（4.18）于1000mL容量瓶中，用10%盐酸或硝酸(4.10）定容至刻度。此溶液现用现配。5仪器5.1原子荧光分光光度计。5.2分析天平分度值0.0001g。5.3电热板。5.4自动控温高温炉。5.5电热板（3000W）或可调温电炉（600W）。6分析步骤6.1测定总砷试样制备6.1.1湿法消解：称取1.0g～2.5g样品（精确到0.0001g）于100mL三角烧瓶中，加30mL硝酸(4.2),1.25mL（1+9）硫酸(4.12)，摇匀，过夜。次日于电热板上加热消解，当烧瓶内溶液约10mL时，观察，如果样品完全消解，取下，冷却后将内容物全部转移至50mL容量瓶或比色管中，加2.5mL碘化钾-硫脲溶液（4.11），用水定容至刻度，待测；如果有未消解物质，补加10mL硝酸(4.2)继续消解至10mL左右观察，如此反复，直至样品完全消解。同时做空白试验。6.1.2干法消解：称取1.0g～2.5g样品（精确到0.0001g）于坩埚中。加入10mL150g/L硝酸镁(4.17)，混合后低温蒸干，然后加1g六水硝酸镁（4.5）覆盖于样品上部，再继续加热至不冒黑烟后，转入550℃高温炉灰化4小时，取出冷却后加10mL（1+1）盐酸(4.12)，煮沸后取下，冷却，然后转移至50mL容量瓶或比色管中，向容量瓶或比色管中加2.5mL50g/L碘化钾-硫脲溶液（4.11），用1.25mL（1+9）硫酸(4.16)洗涤坩埚后一并转入容量瓶或比色管中，用水定容到刻度待测。同时做试剂空白。6.2测定无机砷试样制备称取试样2.5g（精确到0.0001g）于50mL具塞刻度试管（或50mL比色管）中，加1+1盐酸20mL（4.12）摇匀。置70℃水浴锅中加热18小时，其间多次振摇，使试样充分提取，然后取出冷却后用1+1盐酸（4.12）定容至刻度，摇匀。用脱脂棉过滤，准确取4mL滤液于10mL容量瓶中,加1mL碘化钾-硫脲混合溶液（4.11），用水定容至刻度。放置10分钟后测定。如果出现浑浊，过滤后再测定。同时做试剂空白。6.3砷标准系列溶液的配制6.3.1测定总砷用砷标准系列溶液的配制食品伙伴网—2009取6个25mL容量瓶或比色管，依次准确加入0.0、0.05、0.2、0.5、2.0、5.0mL1μg/mL的砷标准应用液（4.19）1.25mL（1+9）硫酸（4.12）和2.5mL50g/L硫脲溶液（4.9），用10%盐酸或硝酸(4.8)定容至刻度，摇匀,待测。此标准砷浓度为：0.0、2.0、8.0、20.0、80.0、200.0ng/mL。6.3.2测定无机砷用砷标准系列溶液的配制准确量取0.00、0.05、0.20、0.50、1.00、2.00mL的砷标准应用溶液(4.19)，分别于50mL具塞比色管或容量瓶中用10%盐酸(4.10)定容至刻度，其浓度分别是0.00，1.00，4.00，10.00，20.00，40.00ng/mL。6.4检测6.4.1仪器参考条件光电倍增管负高压:270V；灯电流:70mA；原子化器温度:室温（档）；炉高:8mm；载气流速:500mL/min；测量方式:标准曲线法；读数方式:峰面积；延迟时间:2s；积分时间:15s；采样时间8s加液时间：自动；泵速:100转/分。6.4.2总砷的测定6.4.2.1在标准曲线界面下，把6.3.1中的砷标准系列溶液依次检测，绘制出神标准曲线，要求标准曲线的R2≥0.9998。6.4.2.2样品检测在样品参数界面，对6.1.1样品溶液进行检测。6.4.3无机砷的测定6.4.3.1在标准曲线界面下，把6.3.2中的砷标准系列溶液依次检测，绘制出神标准曲线，要求标准曲线的R2≥0.9998。6.4.3.2样品检测在样品参数界面，对6.2样品溶液进行检测。6.5结果测定完毕后，点击“报告”按钮，即进入“报告”界面，在此界面内选择需要的报告格式然后将测定结果直接打印出来。取平行样品结果的平均值作为昀终结果，结果表示到小数点后两位。7检测方法灵敏度、准确度、精密度7.1灵敏度本方法检出限为0.01mg/kg。7.2准确度本方法回收率均为80％～120％。7.3精密度本方法的批内变异系数CV≤10％，批间变异系数CV≤15％。食品伙伴网