SBT 10319-1999 熟料消化率测定法(试行)

中华人民共和国专业标准熟料消化率测定法(试行)SB/T10319-1999Determinationofdigestibilityofsteamedmaterial━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━本方法适用于酿造酱油时在制品熟料的消化率测定。消化率系指原料经蒸煮后,其中蛋白质可被酶分解为水溶性肽类或氨基酸的百分比,以此来衡量蒸煮的质量。1试剂与仪器所用试剂都为分析纯。1.1酶液(10%种曲浸出液)取约20g新鲜种曲,放入锥形瓶中,加20mL50%酒精(酒精:水=1∶1)混匀,加180mL水搅拌均匀,置于40℃水浴中浸泡1h,频频摇动,用慢速滤纸或离心机分离(1500～2000r/min)5min,上清液或滤液用福林法测定蛋白酶活力在100单位/mL以上;但酶液的全氮含量须在0.06%以下,如不在此范围内,则须加以调节。酶液不必每次都在测定前进行制备。在几天内可根据需要量,一次制备好,调整好酶活力范围以后置冰箱中备用,但也不宜超过三天。1.2pH7.2磷酸盐缓冲液甲液:称磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)31.2g,用蒸馏水定容至1000mL。乙液:称磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)53.7g,用蒸馏水定容至1000mL。取甲液28mL,乙液72mL混合即成pH7.2的磷酸盐缓冲液。1.3高速组织捣碎机,型号DS-1(上海标本模型厂制造)功率200W,转速10000～12000r/min。1.4水浴锅1.5离心机1.6测定酶活力、全氮所用试剂、仪器见有关标准(ZBX66030-87、ZBX66026-87)。2操作方法2.1熟料浆制备取100g熟料放入高速组织捣碎机中,加蒸馏水300mL。盖好盖子,合上开关,捣搅1min后停机,将飞溅在容器壁上的熟料颗粒用角匙刮下,再继续开机捣碎2min,使熟料捣成均匀的料浆。停机、开盖,将料浆倒入烧杯内。用四层湿纱布盖好备用。2.2测定步骤2.2.1精确称取熟料浆6g左右(精确到0.2mg)于150mL锥形瓶内,加入75mL酶液,再加入pH7.2缓冲液20mL摇匀,在瓶口塞上橡皮塞后,置于水浴锅中。55℃保持2h取出,拔下塞子,放在已煮沸的沸水浴中再煮沸10min。取出冷却,转入100mL容量瓶,定容至100mL。用慢速滤纸过滤,或离心分离10min(1500～2000r/min)。弃去开始滤出的滤液5mL左右。用移液管精确吸取滤液或上清液10mL,严格按照全氮测定法测定水解液的全氮(TN水)。2.2.2精确吸取酶液10mL,并测定其全氮含量(TN酶)。2.2.3精确称取熟料浆2g左右(精确到0.2mg),测出料浆的全氮含量(TN料)。3计算TN水×100-TN酶×75消化率(%)=━━━━━━━━━━━×100TN料×6式中:TN水×100——100mL水解液所含总氮量,g;TN酶×75——所加75mL酶液所含的总氮量,g;TN料×6——6g熟料浆所含总氮量,g。4注意事项4.1料浆要尽量捣碎均匀,捣碎后要及时称量。水解用料浆和测定全氮用料浆要紧接在一起称量,以免水分蒸发而引起误差。4.2酶液可预先制备好。捣碎称量、测定酶液全氮、测定料浆全氮可在酶液浸出过程中和水解过程中交叉进行,以便压缩总的测定时间。4.3为使浓度呈梯度分布的上清液混合均匀,离心结束后须把上清液倾出摇均后再吸取,为防止倾出时把沉淀带出,可把上清液再用快速滤纸过滤一次,减少测定误差。━━━━━━━━━附加说明:本标准由商业部副食品局提出。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━中华人民共和国商业部1987-11-20批准1988-07-01实施