2018临床执业医师综合知识点(十八)

（3）调节蛋白——原核生物有三类：1）特异因子2）阻遏蛋白：阻操结合：和阻遏蛋白结合的部位是操纵基因，抑制基因转录。3）激活蛋白——促进启聚结合的：启动序列和RNA聚合酶的结合，增强RNA聚合酶活性——真核生物基因的调节蛋白称转录因子：大多属于反式作用因子。（4）RNA聚合酶二、基因表达调控的基本原理（一）原核基因表达调控（乳糖操纵子）原核生物基因表达调控的典型例子——大肠杆菌的乳糖操纵子（属可诱导型调控）1.结构基因：编码相应的功能蛋白如酶等2.调节基因Ⅰ：编码阻遏蛋白——阻遏蛋白和操纵序列O序列结合，使操纵子受阻遏处于关闭状态（1）操纵序列O：为阻遏蛋白结合部位（2）启动序列P：为RNA聚合酶结合位点（3）CAP结合位点：分解（代谢）物基因激活蛋白（CAP）结合位点2＋3＋4为调控区3.乳糖操纵子调节机制（1）阻遏蛋白的负性调节1）诱导物：乳糖2）无乳糖时：阻操结合——遏蛋白和操纵序列O序列结合，RNA聚合酶不能结合模板，基因关闭，不能转录。3）有乳糖时：阻乳结合——阻遏蛋白和乳糖结合，基因开放转录。（2）CAP的正性调节1）定义：CAP和其结合位点结合后，转录增强。2）CAMP对转录进行调控条件：必须先和CAP结合，形成CAMP-CAP复合物（3）协调调节：阻遏蛋白和CAP交互调节（二）真核基因表达调控（顺式作用元件、反式作用因子）1.顺式作用元件：是指可影响自身基因表达活性的DNA序列。2.反式作用因子：真核基因转录调节蛋白又称转录因子。绝大多数真核转录调节因子由它的编码基因表达后，通过与特异的顺式作用元件的识别，结合（即DNA蛋白相互作用），反式激活另一基因的转录，因此被称为反式作用因子。第十二节信号转导一、信号分子1.概念：细胞主要感受的化学、物理信号2.信息物质分泌方式：自分泌、旁分泌、内分泌3.信息物质分类：间一内二（1）细胞间信息物质：又称为第一信使（2）细胞内信息物质：又称为第二信使。细胞内传递信息的小分子物质，完成信息传递后，立即灭活。举例：无糖脂核）无机离子位于内质网Ca2＋2）糖类衍生物：IP3（三磷酸肌醇），IP3受体也位于内质网提示：PIP2（磷脂酰肌醇二磷酸），不是第二信使，为常见的干扰项3）脂类衍生物：DAG（二脂酰酸甘油），可直接激活蛋白酶C4）核苷酸类化合物：cAMP（位于细胞膜，由ATP生成，别构激活蛋白激酶A），cGMP（激活蛋白激酶G）二、受体和信号转导分子（一）受体分类和作用特点1.本质：糖蛋白（糖蛋白中糖占的比重较少）2.分类：膜受体和细胞内受体（1）膜受体：大多数为镶嵌蛋白（2）细胞内受体：全部为DNA结合蛋白。细胞内受体类型又称受体-转录因子，和DNA结合后能调节转录。细胞内受体常见的胞内受体按成分分：维甲类受体、维甲酸受体、甲状腺激素受体、类固醇激素受体部位核内受体：雄，雌，孕，甲状腺激素（T3，T4）受体位于细胞核内胞质受体：糖皮质激素受体位于细胞质内3.作用特点：细胞膜受体接收的是不能进入细胞的水溶性化学信号（生长因子、细胞因子、水溶性激素等）和位于邻近细胞表面分子的信号（黏附分子等），需要一复杂的跨膜传递和转换过程。而胞内受体接收的是可以直接通过脂双层质膜进入细胞的脂溶性化学信号，如类固醇激素、甲状腺素、维A酸和维生素D等。4.重要的膜受体示例（1）单个跨膜α螺旋受体：1）酪氨酸蛋白激酶受体型（催化型受体）——口诀：表姨酪饼，单个跨膜。如表皮生长因子受体，胰岛素受体（其β亚基具有酪氨酸蛋白激酶活性）2）非酪氨酸蛋白受体型：为干生两素受体如干扰素受体，生长激素受体（二）G蛋白1.定义：有一类重要的信号通路开关，即鸟苷酸结合蛋白（Gprotein）简称G蛋白，亦称GTP结合蛋白。2.结构：α，β，γ，三个亚基组成。β，γ，结合紧密3.分类：异源三聚体G蛋白和低分子质量G蛋白。4.特点：G蛋白通过游离α亚基和GTP或GDP结合后具有GTP酶活性，可激活AC（腺苷酸环化酶），磷脂酶C（三）蛋白激酶和蛋白磷酸酶蛋白磷酸酶与蛋白激酶相辅相成，两者共同构成了细胞内磷酸化与去磷酸化的蛋白活性开关系统，而且对于细胞信号转导的作用也是相辅相成。三、膜受体介导的信号转导机制根据激活其的物质不同可分为，蛋白激酶A，C，G1.蛋白激酶A通路（1）PKA通路（2）作用机制：蛋白激酶A通路以改变靶细胞内cAMP浓度和蛋白激酶A活性为主要特征，是激素调节物质代谢的主要通路之一。2.蛋白激酶C通路（1）PKC通路：上述两通路的共同特点是（2）作用机制：由G蛋白介导。通过PKC对下游靶蛋白的磷酸化修饰，参与多种生理功能的调节。3.酪氨酸蛋白激酶通路（1）酪氨酸蛋白质激酶（TPK）（2）作用机制：催化蛋白质分子中的酪氨酸残基磷酸化。四、包内受体介导的信号转导机制（类固醇激素和甲状腺素的作用机制）已知通过胞内受体调节的激素有糖皮质激素、盐皮质激素、雄激素、孕激素、雌激素、甲状腺素、维A酸、1，25-（OH）。维生素D3。位于细胞内的受体多为转录因子，当与相应配体结合后进RU细胞核内，与DNA的顺式作用元件结合，在转录水平调节基因表达。胞内受体通常为400～1000个氨基酸残基组成的单体蛋白质，由4个区域构成。高度可变区位于N末端具有转录激活功能DNA结合区位于受体分子的中部，含两个锌指模体与DNA结合；铰链区有核定位信号引导受体进入细胞核；激素结合区位于C末端。第十三节重组DNA技术一、重组DNA技术的概述（一）重组DNA技术相关的概念1.DNA克隆：在分子生物学领域，分子克隆主要指DNA大量复制2.目的基因：为感兴趣的基因或DNA序列就是目的基因，目的基因本身不能复制。3.基因载体（1）作用：携带目的基因（2）其必须具备的条件是1）能在宿主细胞中稳定保存2）能大量复制，以提供大量目的基因（3）分类：克隆载体和表达载体1）表达载体：使插入的外源DNA序列可转录翻译成多2）肽而设计的载体；如酵母，腺病毒表达载体4.克隆载体：为使外源DNA序列被扩增特意设计的载体，常用的载体：质，粘，噬，毒，体（1）质粒：环状闭合共价双链DNA细菌染色质外遗传物质，能自我复制（2）粘粒（3）噬菌体（4）病毒DNA（常见的干扰选项：病毒RNA）（5）人工染色体来源：金樟教育集团医考事业部