QBT 1613-1992 食品添加剂 β-环状糊精

中华人民共和国行业标准食品添加剂β-环状糊精QB1613-92━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━本标准适用于淀粉经酶转化再用水提纯制取的β—环状糊精。用于食品作稳定剂、矫味剂、改形剂等。分子式：(C6H10O5)7分子量:1134.997(按1983年国际原子量)1技术要求1.1感官要求本品为白色结晶性粉末,无嗅,微甜。1.2β—环状糊精理化指标应符合表中要求。─────────┬────┬─────项目│指标,％│试验方法─────────┼────┼─────总糖≥│86.5│─────────┼────┼─────含量(总糖中)≥│95│─────────┼────┼─────水分≤│13│GB5009.3─────────┼────┼─────灰分≤│0.5│GB5009.4─────────┼────┼─────重金属(以Pb计)≤│0.002│GB8451─────────┼────┼─────砷(As)≤│0.0001│GB8450─────────┴────┴─────2试验方法2.1鉴别2.1.1称取1g试样,加入100mL水。混匀后取1mL于试管中,加入一滴三氯乙烯,强烈振摇,产生白色沉淀。2.1.2称取1g试样,加入100mL水。混匀后取1mL滴在白瓷板上,加入一滴0.02mol/L的碘液,显淡黄色。2.2含量及总糖测定2.2.1原理用苯酚硫酸法测定试样的总糖量,利用糖化酶只分解直链糊精和低聚糖,而不分解环状糊精的特性,以DNS法(3.5—二硝基水杨酸法)测出糖化酶作用于试样产生的葡萄糖量,总糖与葡萄糖量之差与总糖之比,即为环状糊精的含量。2.2.2试剂和溶液a.硫酸(GB625);b.苯酚(HGB3131,重蒸馏):80％水溶液;c.0.2mol/L乙酸—乙酸钠缓冲溶液:(PH4.5)取11.43mL冰乙酸(GB676)定容为1000mL,成为0.2mol/L浓度的乙酸溶液。称取27.2g乙酸钠(GB693)或16.4g无水乙酸钠(GB694)溶解定容为1000mL,成为0.2mol/L浓度的乙酸钠溶液,以乙酸溶液∶乙酸钠溶液=5.7∶4.3(体积比)的比例混合即成,上述缓冲溶液应以酸度计校正PH值;d.葡萄糖淀粉酶溶液:配制根霉葡萄糖淀粉酶(实验室用)溶液酶活力为4U/mL,用时配制,可放冰箱4℃保存,保存期不超过3天;e.3,5—二硝基水杨酸溶液称取3,5—二硝基水杨酸12.6g、酒石酸钾钠(GB1288)364g、重蒸苯酚10g、氢氧化钠(GB629)41.92g、亚硫酸氢钠(HG3-1291)10g,混合加热溶解后定容为2000mL;暗处保存一星期,滤纸过滤备用。此溶液简称DNS溶液;f.葡萄糖标准溶液:称取0.5000g葡萄糖(HG3-1094),用水溶解,定容至500mL,成为1000μg/mL的葡萄糖标准溶液;吸取10mL上述标准溶液,定容至100mL,即成100μg/mL的葡萄糖标准液。2.2.3测定程序2.2.3.1葡萄糖的测定a.DNS法葡萄糖标准曲线的制作,按表在试管中配制反应液。──────────────┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──编号││││││││││空白│1│2│3│4│5│6│7│8试剂│││││││││──────────────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──1000μg/mL的葡萄糖标准溶液mL│0.00│0.10│0.15│0.20│0.30│0.40│0.60│0.80│1.00──────────────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──水mL│1.50│1.40│1.35│1.30│1.20│1.10│0.90│0.70│0.50──────────────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──比色液中葡萄糖含量μg│0│100│150│200│300│400│600│800│1000──────────────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──乙酸—乙酸钠缓冲缓mL│1.0│1.0│1.0│1.0│1.0│1.0│1.0│1.0│1.0──────────────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──DNS溶液mL│2.5│2.5│2.5│2.5│2.5│2.5│2.5│2.5│2.5──────────────┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──将上述反应液置于沸水浴中反应5min后取出,冷却至室温,在分光光度计上用0.5cm比色杯,在540nm波长处比色,记录消光值,以葡萄糖含量为横坐标,消光值为纵坐标,绘制标准曲线。b.试样中酶解产生的葡萄糖量的测定称取1.000g试样,溶解定容至100mL,吸取1mL该试样液,加入0.2mol/L乙酸—乙酸钠缓冲液(PH4.5)1mL,再加入葡萄糖淀粉酶溶液0.5mL,置于50℃超级恒温水浴中反应30min,反应终止时,加入DNS溶液2.5mL,再置于沸水浴中5min后取出,冷至室温,按2.2.3.1a测定消光值,空白用1mL水代替试样液,根据试样的消光值查对标准曲线,得出比色液含葡萄糖量,根据式(1)求出1g试样中酶解产生的葡萄糖量A(g)。C×100A=────………………………………………(1)10**6式中:A——1g试样中酶解产生的葡萄糖量,g;C——在标准曲线上查得的数值,μg。2.2.3.2总糖的测定a.苯酚硫酸法葡萄糖标准曲线的制作,按表在试管中配制反应液。────────────────┬───┬──┬──┬──┬──┬──-试剂编号│空白│1│2│3│4│5────────────────┼───┼──┼──┼──┼──┼───100μg/mL葡萄糖标准溶液mL│0.0│0.5│0.7│0.9│1.1│1.3水mL│2.0│1.5│1.3│1.1│0.9│0.7比色液中葡萄糖含量μg│0│50│70│90│110│130苯酶(80％水溶液)μL│50│50│50│50│50│50硫酸mL│5│5│5│5│5│5────────────────┴───┴──┴──┴──┴──┴───注:将表中三种溶液混匀后再加入硫酸。加硫酸时,应将移液管正对液面,直冲而下,以移液管壁上附留的酸液滴下5滴为准。待上述反应液冷却至室温后,在分光光度计上用0.5cm的比色杯,在490nm波长处比色,记录消光值,以葡萄糖含量为横坐标。消光值为纵坐标,绘制标准曲线b.试样的总糖测定将2.2.3.1b的试样液再稀释100倍,制成100μg/mL的试样液,吸取1mL该试样液,加1mL水、50mL苯酚水溶液,充分摇匀后,再加入5mL硫酸,反应后冷却至室温,按2.2.3.2a测定消光值。空白用2mL水代替试样液。根据比色液的消光值查对标准曲线,得出比色液含总糖量。根据式(2)求出1g试样中的总糖量β(以葡萄糖计,g)。C×100×100B=──────…………………………………(2)10**6式中:B——1g试样中的总糖量(以葡萄糖计),g;C——在标准曲线上查得的数值,μg。2.2.3.3计算B-AX(％)=──-×100…………………………………(3)B式中:X——β—环状糊精含量(总糖中),％;A——1g试样中酶解产生的葡萄糖量,g;β——1g试样中的总糖量(以葡萄糖计),g。