GBT22286-2008动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定-液相色谱串联质谱法

背景介绍（特性及药理作用、危害、检测方法以及相应标准）GB/T22286-2008检测原理及适用范围检测流程（酶解、提取、净化）仪器条件注意事项主要内容一、背景介绍Β-受体激动剂是一类化学合成的苯乙醇胺类物质，早期主要用于防治人、动物支气管哮喘和支气管痉挛，后来发现在饲料中添加该类药物后具有营养再分配作用，可明显提高动物的瘦肉率（提高10%），因此曾被作为促生长添加剂被广泛关注，但是人们食用了该类药物残留的畜禽产品后会出现面色潮红、头痛、头晕、胸闷、心悸、四肢麻木等不良反应，严重的可危及生命。因此欧盟、美国等都先后立法禁止在养殖业中使用该类药物，我国政府也明令禁止其使用。1.“瘦肉精”的危害盐酸克伦特罗在动物体内主要发生氧化作用，也发生硫酸化反应和葡萄糖醛酸络合反应(存在形式为结合态和游离态)。其主要代谢场所是肝脏，最终大部分随尿液排出，实验证明，盐酸克伦特罗在动物体内代谢周期长，易富集和残留，耐热性较高，在100℃的沸水中很稳定。2.“瘦肉精”体内代谢目前，针对β-兴奋剂有效检测方法主要集中在胶体金快速检测卡法、酶联免疫法（ELISA）、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)、气相色谱-质谱法(GC-MS)3.检测方法及相应标准二、GB/T22286-2008适用范围及原理范围：本标准规定了动物源性食品中（适用于猪肝和猪肉）克伦特罗、沙丁胺醇、特布他林、莱克多巴胺、塞曼特罗、塞布特罗、溴布特罗、苯氧丙酚胺、马布特罗、溴代克伦特罗残留量的检测方法，检出限均为0.5μg/kg。实验室还针对鳗鱼及烤鳗等动物源性食品进行了方法验证检测原理原理：试样中的残留物经酶解，用高氯酸调节pH值，沉淀蛋白后离心，上清液用异丙醇-乙酸乙酯提取，再用阳离子交换柱净化，液相色谱串联质谱法测定，内标法定量（沙丁胺醇-D3作为沙丁胺醇、特布他林和莱克多巴胺的内标物，克伦特罗-D9作为其余β-受体激动剂的内标物质）克伦特罗沙丁胺醇特布他林莱克多巴胺赛曼特罗-NH-+H20-NH2-+OH+-水解作用三、检测流程检测流程：-NH-+H20-NH2-+OH+-水解作用酶解提取净化1.酶的最适pH2.在酸性条件下溶于水，易提取四、液相色谱-串联质谱条件五、注意事项1、每批检测样做样顺序为试剂空白、样品空白、空白样品加标曲线、样品。2、加标回收：取0.25mL10.0ng/mL的四种兴奋剂混标到5g样品中，相当于0.5μg/kg添加水平3、初测加标选用同等基质的任一样品，复测时做平行样，初测浓度较高的样品复测时应先将样品稀释一定倍数后过固相萃取柱，保证最终浓度在曲线范围之内，且最终对应内标浓度应与曲线保持一致4、检测结果无需校正回收率Q&A