实验3卵磷脂的提取和鉴定

实验三卵磷脂的提取和鉴定1.目的：加深了解磷脂类物质的结构和性质；掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。2.原理：磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。3.操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g（两管）蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂。(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入2mL乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。2.磷酸的检验取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴钼酸铵试剂，观察现象；最后将试管放入热水浴中加热5～10min，观察有何变化。R1-COO-CH2R2-COO-C—HCH2—O—P—O—ROHO12*3R1常为饱和脂肪酸如C16，C18R2常为不饱和脂肪酸如花生四烯酸R=—CH2CH2-N(CH3)3OH为：卵磷脂+-+-HO-CH2CH2-N(CH3)3OH胆碱Question卵磷脂彻底水解的产物是什么？CO2-CH2CO2-CHCH2O-P-O-CH2CH2-N(CH3)3OO+HOH-由于甘油磷脂分子中磷酸部分还有一个可以电离的H+，而胆碱或胆胺部分又有碱性基团，故甘油磷脂以偶极离子的形式存在。非极性端疏水端，亲油端磷脂分子中同时具有疏水基和亲水基。正是由于这种特点，使得磷脂类化合物在细胞中起着重要的生理作用。-极性端疏油端，亲水端H-OH