多功能酶标仪-软件操作

多功能酶标仪－软件操作（1）开仪器电源，仪器指示灯由黄色变为绿色，即可开显示器和电脑主机（2）双击仪器控制软件“SkanItREforVarioskanFlash2.4.5”，进入“LogonToSkanItSoftware”对话框，直接点击“ok”按钮（3）进入仪器控制软件界面SkanItSoftware2.4.5，点击“Opensession”按钮打开已运行的实验（4）点击“Newsession”按钮，新建实验，出现“CreateNewsession”对话框，给即将开展的实验命名（5）点击“Next”按钮，进入“Selectplatetemplate”对话框，根据实验时所使用的96孔或384孔板的型号进行选择（6）点击“Next”按钮，进入实验方案、数据存储位置选择，可在SkanItsoftware目录下新建一个文件下并命名，选中新建文件夹，点击“Finish”按钮（7）进入“PlateLayout”界面，对96孔板或384孔板进行编辑。“New”增加孔板数。“Delete”删除孔板数。“Wizard”对实验板上每个样品孔进行编辑说明。“Clear”在样品板上选中编辑错误的区域，点击该按钮进行清除。“Print”打印编辑好的孔板。“Description”对每个样品孔板进行描述说明。“PlateLayout”界面有4个图标（具体见软件界面）点击后可显示整个样品板、放大样品板、缩小样品板、最佳显示样品板（8）点击“Wizard”按钮，进入“FillWizard”对话框，对孔板上每个孔中的样品进行编写说明。Type：选择样品类型（5种：Blank，Calibrator，Control，Empty，Unknown）。Name：样品名称，人工手动输入。Group：默认为Assay。Noof…：样品的数量。Fillingorder，样品填充顺序，有上下左右四种。Noofreplicates：设置样品重复测定次数。Specificblanks，特定的空白对照，一般设置为默认值None。Currentplate：当前孔板编号。Dilution：样品稀释倍数，样品未稀释填写数值为1。Unit：样品的浓度单位。填写完成之后，点击“Add”按钮，进行其它样品孔的编写说明。编写过程中发现编写错误，可点击“Close”按钮，关闭当前界面，在“PlateLayout”界面，将填写错误的部分选中，点击“Clear”按钮即可清除（9）标准品的样品孔的设置，例如蛋白质浓度测定时标准曲线的制作。Type设置为Calibrator，Name设置为Cal，Group设置为Assay默认值，NoofCalibrators填写标准样品的数量，Noofreplicates填写每个样品重复测定次数，Fillingorder样品填充顺序。点击“Generateseries”按钮，进入“Concentration”对话框。Unit：标准品浓度单位。选中“Series”填写“Series”参数。Initialvalue：填写起始标准品样品的浓度值。Operators四种方案：Multiply倍数，Add增加，Divide除数，Subtract递减。Stepby：倍数值/除数值/增加量/递减量，填写具体的数值。设置好之后点击“ok”按钮，完成序列设置。（10）待测样品的设置，待测样品设置为“Unknown”，同样需要设置样品的数量、每个样品的重复测定次数，填充顺序及起点、稀释倍数和浓度单位、孔板名称，设置好之后点击“Add”（11）选中“Protocol”，进入“ProtocolProperities”①点击“Photometricmeasurement”，测定光吸收值，填写光波长wavelength，点击“Save”按钮②点击“PhotometricScanning”，波段扫描，需要设置3个参数，起始波长，结束波长，Stepsize设置为默认值2nm，点击“Save”按钮③点击“Fluorometricmeasurement”，测定样品的荧光值，需要对激发光和发射光波长进行设置，设置完成后点击“Save”按钮④点击“FluorometricScanning”，样品荧光扫描。（a）固定激发光波长，扫描发射荧光；（b）固定发射光波长，扫描激发光波长。需要设定参数：激发光和发射光波长，扫描波段及Stepsize（默认值2nm）⑤点击“Luminometricmeasurement”，样品自发荧光测定。Optics可选择“Normal”、“Monochromator”和“Filter”三种，仪器未配备滤镜，一般不选择使用“Filter”，选择“Monochromator”，需要填写波长参数⑥点击“Luminometricscanning”，荧光波普扫描，波段和Stepsize需要进行设置⑦点击“TRFmeasurement”，时间分辨荧光检测，基本同荧光检测，不同的是要设置延迟时间（TRFdelaytime）和积分时间（TRFintegrationtime）⑧点击“TRFscanning”，时间分辨荧光光谱扫描，基本同荧光扫描，需要设置延迟时间和积分时间⑨点击“TRFdecay”，时间分辨荧光延迟时间和积分时间扫描⑩根据实验要求在实验步骤前后添加action。Runplatein/Runplateout,关门/开门。Incubate，恒温孵育，设置时间和温度。Pause，暂时中止，设置中止时间。Shake，震动混匀，设置震动时间。（12）点击“Result”，进入结果分析设置①Blanksubstration减去空白，Blanktype选择Average（必须在Platelayout里面设置Blank）②Basicstatistics基本统计，包括SD标准差和CV%变异系数（必须在Platelayout里面设置Replicates）③QuantitativeCurveFit曲线拟合，Fittype中Linearregression（LLS）代表直线拟合，Fourparameterlogistic代表四参数拟合（必须在Platelayout里面设置Calibrator及其浓度）④ΣUser-definedequation用户自定义公式，可设置双波长扣减或扣除板子本底值等复杂的设置（13）完成上述工作后，运行程序前保存所编辑的程序，点击“Runplateout”出板，放入孔板后，点击“Runplatein”，运行程序开始测定样品（14）结果导出-Report模式①在Result中增加Report。在参数面板中，将需要保存的参数选中，添加②点击ViewReport切换到Report面板，对导出的结果进行浏览。按保存，输入文件名称，选择文件类型（.xl或.pdf或.txt），一般保存结果至Excel文件（15）结果导出-简单模式（QuickExport）①选中某一结果，例如Photometric1。按右键，点击QuickExport，或菜单Calculations/Quickeport。选择Matrix，确定后保存结果至TXT文本文件②用记事本打开保存的文本文件。数据是按矩阵形式保存的，与Platelayout对应③保存的数据也可以用Excel打开