课标专用5年高考3年模拟A版2021高考生物专题24微生物的利用课件

专题24微生物的利用高考生物考点一微生物的培养考点清单基础知识一、培养基1.概念:人们按照微生物对①营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。2.营养成分(1)确定原则:根据微生物的需要。(2)主要营养物质:碳源、②氮源、水和无机盐。(3)其他条件:pH、特殊营养和氧气。3.种类(1)根据物理性质可分液体培养基和固体培养基和半固体培养基,固体和液体培养基二者的区别是是否添加琼脂等凝固剂。(2)根据功能可分为选择培养基和鉴别培养基。4.培养基的制备步骤:计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板。【名师点拨】(1)培养基用什么方法灭菌?培养基灭菌后需要立即进行倒平板操作吗?提示:培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌。为防止烫伤,需要冷却到50℃左右时才能进行倒平板操作。(2)倒平板时为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?提示:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。(3)平板冷凝后,为什么要将平板倒置?提示:可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。二、无菌技术1.目的:获得纯净的培养物。2.关键:防止外来杂菌的入侵。3.常用方法:灭菌和消毒,二者的区别是前者可以杀死全部微生物,包括芽孢和孢子。条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体如牛奶化学药剂消毒法用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属用具③高压蒸汽灭菌法培养基及容器三、纯化大肠杆菌1.原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。2.两种微生物纯化培养的方法平板划线法稀释涂布平板法平板示意图  纯化原理通过连续划线操作实现将菌液进行一系列的梯度稀释和涂布平板操作实现注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高菌体获取在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落,又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作复杂,需要涂布多个平板3.菌种的保藏方法(1)临时保藏法:对于频繁使用的菌种,先接种到试管的固体斜面培养基上培养,然后放入4℃的冰箱中保藏。(2)甘油管藏法:对于需要④长期保存的菌种,先将菌液转入灭菌后的甘油中,混匀后放在-20℃冷冻箱中保存。【名师点拨】微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗?微生物接种的核心是什么?提示:不是,微生物的接种方法还包括斜面接种、穿刺接种等,其核心是防止杂菌的污染,保证培养物的纯度。重难突破一、选择培养基与鉴别培养基1.种类类型实例选择培养基培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物鉴别培养基伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌(菌落呈黑色)2.制备原理选择培养基:培养基中去除某种营养物质或添加某些特殊成分,允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长。如去除培养基中的氮源,可筛选固氮微生物。以石油为唯一碳源的培养基可用于分离降解石油的微生物。鉴别培养基:根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品。如加入伊红美蓝的培养基可用于鉴别大肠杆菌,大肠杆菌在伊红美蓝培养基上形成的菌落呈黑色。二、平板划线接种过程中的无菌操作与划线操作1.无菌操作(1)拔出盛有菌液的试管的棉塞不能放在桌面上;接种过程在酒精灯火焰旁进行;接种过程中只能把培养皿掀开一条小缝,不能把盖子打开等。(2)灼烧接种环2.划线操作每次划线都要从上次划线的末端开始划。因为划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。这样做的目的是将聚集的菌种逐步分散以便获得单个菌落。灼烧时间目的取菌种前杀死接种环上原有微生物每次划线前杀死上次划线后接种环上残留菌种,使下次划线的菌种直接来自上次划线末端,使每次划线菌种数目减少,达到分离菌株的目的接种结束后杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者考点二微生物的分离与计数考点清单基础知识一、纤维素分解菌的分离1.纤维素酶(1)组成:纤维素分解菌可产生纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括C1酶、CX酶和①葡萄糖苷酶三种组分。(2)作用:纤维素 纤维二糖 葡萄糖 2.纤维素分解菌的分离(1)方法:②刚果红染色法。(2)原理 →红色复合物 红色消失、出现透明圈。刚果红纤维素(3)标志:使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基,根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(4)操作流程 项目详细内容实验原理(1)能合成脲酶的细菌才能分解尿素(2)配制以③尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌数量统计(1)直接计数法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)(2)间接计数法:稀释涂布平板法实验流程土壤取样→配制土壤溶液和制备培养基→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数二、土壤中分解尿素的细菌的计数重难突破一、统计菌落数目的两种方法1.显微镜直接计数法:原理利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计数一定容积的样品中微生物的数量方法用计数板计数缺点不能区分死菌与活菌而使计数结果偏大原理当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,计算样品中的活菌数计算公式每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数操作设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数缺点当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计结果可能偏小2.间接计数法(活菌计数法):二、微生物的筛选与鉴别方法1.微生物的筛选方法:单菌落挑取法利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面,直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物选择培养法利用选择培养基对微生物进行选择培养,直接获得目的微生物鉴定培养法利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现易于区分的特征,然后筛选目的微生物菌落特征鉴别法根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别指示剂鉴别法如培养基中加入酚红指示剂,培养某种微生物后,培养基变红说明该种微生物能够分解尿素染色鉴别法如利用刚果红染色法,根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物2.微生物的鉴别方法: