SNT 2147-2008 进出口食品中硫线磷残留量的检测方法

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２１４７—２００８进出口食品中硫线磷残留量的检测方法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犪犱狌狊犪犳狅狊狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋２００８０９０４发布２００９０３１６实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言　　本标准附录Ａ和附录Ｂ均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山西出入境检验检疫局、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局。本标准主要起草人：薛平、连庚寅、王明泰、杜利君、张莹、康杰、苑利。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２１４７—２００８进出口食品中硫线磷残留量的检测方法１　范围本标准规定了进出口食品中硫线磷残留量的气相色谱测定和气相色谱质谱确证方法。本标准适用于芦笋、土豆、大葱、苹果、桃、玉米、荞麦、茶叶、食醋、蜂蜜、核桃仁、兔肉、鸡肝和虾仁中硫线磷残留量的测定和确证。２　方法提要植物源性样品用乙酸乙酯环己烷混合溶剂提取；动物源性样品和含油量高的植物源性样品用乙腈提取，提取液用凝胶色谱仪（ＧＰＣ）或Ｃ１８固相萃取柱净化，供带有氮磷检测器的气相色谱仪测定，外标法定量，阳性样品用气相色谱质谱法确证。３　试剂和材料除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。３．１　乙酸乙酯：农残级。３．２　环己烷：农残级。３．３　乙腈：色谱纯。３．４　正己烷。３．５　三氯甲烷。３．６　无水硫酸钠：６５０℃灼烧４ｈ，贮于密封容器中备用。３．７　乙酸乙酯环己烷（１＋１，体积比）：５００ｍＬ乙酸乙酯中加入５００ｍＬ环己烷，混匀。３．８　乙酸乙酯环己烷（１＋２，体积比）：５００ｍＬ乙酸乙酯中加入５００ｍＬ环己烷，混匀。３．９　硫线磷标准物质（Ｃａｄｕｓａｆｏｓ，Ｃ１０Ｈ２３Ｏ２ＰＳ２；ＣＡＳ：９５４６５９９９，分子量：２７０．４）：纯度大于等于９９％。３．１０　硫线磷标准储备液（１００ｍｇ／Ｌ）：准确称取适量硫线磷标准物质，用乙酸乙酯溶解，配制成浓度为１００ｍｇ／Ｌ的标准储备液，该溶液在０℃～４℃保存。３．１１　硫线磷标准工作液：根据需要再用乙酸乙酯稀释成适当浓度的标准工作溶液。标准工作液应现用现配。３．１２　Ｃ１８固相萃取柱：６０ｍｇ，３ｍＬ，或相当者。３．１３　微孔滤膜：０．４５μｍ。４　仪器和设备４．１　气相色谱仪：配有氮磷检测器。４．２　气相色谱质谱仪：配有电子轰击源（ＥＩ）。４．３　分析天平：感量为０．０００１ｇ。４．４　凝胶色谱仪，配有单元泵，馏分收集器。４．５　固相萃取装置。４．６　离心机：４０００ｒ／ｍｉｎ。４．７　无水硫酸钠柱：７．５ｃｍ×１．５ｃｍ（内径）玻璃柱，内装５ｃｍ高无水硫酸钠。４．８　旋转蒸发器。１犛犖／犜２１４７—２００８４．９　涡旋混合器。４．１０　超声波清洗器。４．１１　氮吹仪。４．１２　具塞离心管：５０ｍＬ，聚四氟乙烯。５　样品置备与保存５．１　样品制备５．１．１　粮谷及茶叶类将样品按四分法缩分至５００ｇ，用磨碎机全部磨碎。混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样瓶内，密闭，标明标记。５．１．２　水果及蔬菜类抽取水果或蔬菜样品５００ｇ，或去壳、去籽、去皮、去茎、去根、去冠（不可用水洗涤），将其可食用部分切碎后，依次用食品捣碎机将样品加工成浆状。混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样袋内，密闭，标明标记。５．１．３　肉及肉制品类、坚果类从所取全部样品中取出有代表性样品约１ｋｇ，取可食部分经捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样。密封并标明标记。５．２　试样保存粮谷类、茶叶类、坚果类、蜂蜜及蜂蜜制品类试样于０℃～４℃保存；其他类试样于－１８℃以下冷冻保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。６　测定步骤６．１　提取６．１．１　蔬菜、水果、粮谷蔬菜、水果称取２０ｇ试样（精确至０．１ｇ），粮谷称取１０ｇ试样（精确至０．１ｇ），置于５０ｍＬ离心管中，加入２０ｍＬ乙酸乙酯环己烷混合溶剂（３．７），涡旋振荡混匀３０ｓ，超声提取２０ｍｉｎ，４０００ｒ／ｍｉｎ离心３ｍｉｎ，移取上层有机相，残留物再用２０ｍＬ乙酸乙酯环己烷混合溶剂（３．７）重复提取一次，合并上层有机相，过无水硫酸钠玻璃柱（４．７），４０℃下旋转浓缩至近干，准确加入１０．０ｍＬ乙酸乙酯环己烷（３．７）溶解残渣，并用０．４５μｍ滤膜过滤，待净化。６．１．２　茶叶称取２．５ｇ试样（精确至０．１ｇ），置于５０ｍＬ离心管中，加入１０ｍＬ水，静置１ｈ，加入２０ｍＬ乙酸乙酯环己烷混合溶剂（３．８）旋涡振荡混匀３０ｓ，超声提取及随后步骤同６．１．１。６．１．３　醋、蜂蜜Ｃ１８固相萃取柱依次用２ｍＬ正己烷（３．４），２ｍＬ三氯甲烷（３．５），３ｍＬ蒸馏水预淋洗。称取２．５ｇ试样（精确至０．１ｇ），加入５ｍＬ水旋涡振荡混匀３０ｓ进行提取，将提取液全部过已经预淋洗的固相萃取柱，流速控制在１滴／２ｓ，再用２ｍＬ水淋洗柱子，弃去淋洗液，真空抽干２ｍｉｎ，用２．５ｍＬ正己烷洗脱，洗脱液４０℃下氮气吹干，用乙酸乙酯定容至１．０ｍＬ，待测。６．１．４　核桃仁、兔肉、鸡肝、虾称取１０ｇ试样（精确至０．１ｇ），置于５０ｍＬ离心管中，加入２０ｍＬ乙腈（３．３），使用均质器搅拌３０ｓ，超声提取２０ｍｉｎ，４０００ｒ／ｍｉｎ离心３ｍｉｎ，收集上层有机相，残留物再用２０ｍＬ乙腈重复提取一次，合并上层有机相，过无水硫酸钠玻璃柱，收集液于４０℃旋转浓缩至１ｍＬ～２ｍＬ时，加入５ｍＬ环己烷乙酸乙酯（３．７）再次旋转浓缩至近干，准确加入１０ｍＬ环己烷乙酸乙酯（３．７）溶解残渣，并用２犛犖／犜２１４７—２００８０．４５μｍ滤膜过滤，待净化。６．２　凝胶色谱净化６．２．１　凝胶色谱净化条件　　ａ）　凝胶净化柱：ＢｉｏＢｅａｄｓＳＸ３，３００ｍｍ×２０ｍｍ（内径），或相当者；ｂ）　流动相：环己烷乙酸乙酯（３．７）；ｃ）　流速：４．７ｍＬ／ｍｉｎ；ｄ）　样品定量环：５ｍＬ；ｅ）　收集时间：７．５ｍｉｎ～１２．５ｍｉｎ。６．２．２　凝胶色谱净化步骤将１０ｍＬ待净化液按上述条件过凝胶色谱净化，收集７．５ｍｉｎ～１２．５ｍｉｎ流出液，３５℃下氮气吹至近干，用乙酸乙酯定容至１．０ｍＬ，供气相色谱仪测定，气相色谱质谱法确证。６．３　气相色谱测定６．３．１　气相色谱条件ａ）　色谱柱：ＣＰ１３０１石英毛细管柱，３０ｍ×０．２５ｍｍ（内径）×０．２５μｍ，或性能相当者；ｂ）　色谱柱温度：５０℃（１ｍｉｎ）２０℃／→ｍｉｎ２２０℃；ｃ）　进样口温度：２６０℃；ｄ）　检测器温度：２８０℃；ｅ）　载气：氮气，纯度大于等于９９．９９５％，柱流量１ｍＬ／ｍｉｎ；ｆ）　气体流量：氢气：３．０ｍＬ／ｍｉｎ，空气：１５０ｍＬ／ｍｉｎ，尾吹气：３０ｍＬ／ｍｉｎ；ｇ）　恒流方式：１ｐＡ；ｈ）　进样方式：无分流，１ｍｉｎ后打开分流阀；ｉ）　进样量：１μＬ。６．３．２　气相色谱测定根据样液中硫线磷含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液，标准工作溶液和样液中硫线磷相应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，硫线磷的保留时间约为１３．０ｍｉｎ。标准品的色谱图参见附录Ａ中图Ａ．１。标准溶液及样液均按６．３．１的条件进行测定，如果样液中与标准溶液相同的保留时间有峰出现，则对其进行气相色谱质谱确证。６．４　气相色谱质谱确证６．４．１　气相色谱质谱条件ａ）　色谱柱：ＨＰ５ＭＳ石英毛细管柱，３０ｍ×０．２５ｍｍ（内径）×０．２５μｍ，或性能相当者；ｂ）　色谱柱温度：５０℃（１ｍｉｎ）１０℃／→ｍｉｎ２８０℃（１０ｍｉｎ）；ｃ）　进样口温度：２５０℃；ｄ）　色谱质谱接口温度：２８０℃；ｅ）　电离方式：ＥＩ；ｆ）　电离能量：７０ｅＶ；ｇ）　载气：氦气，纯度大于等于９９．９９９％，流速１ｍＬ／ｍｉｎ；ｈ）　进样方式：无分流，０．７５ｍｉｎ后打开分流阀；ｉ）　进样量：１μＬ；ｊ）　测定方式：选择离子监测；ｋ）　选择监测离子（ｍ／ｚ）：１５９、２１３、２１５、２７０；ｌ）　溶剂延迟：５．０ｍｉｎ。３犛犖／犜２１４７—２００８６．４．２　气相色谱质谱法确证经确证分析被测物质量色谱峰保留时间与标准品样品相一致，并且在扣除背景后的样品谱图中，所选择的离子均出现；同时所选择离子的丰度比与标准样品相关离子的相对丰度一致，相似度在允许差之内（见表１），则可判定样品为硫线磷阳性检出。硫线磷标准物质的气相色谱质谱选择离子色谱图和质谱图参见附录Ｂ中图Ｂ．１和图Ｂ．２。表１　定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度／％＞５０＞２０～５０＞１０～２０≤１０允许相对偏差／％±１０±１５±２０±５０６．５　空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。７　结果计算和表述用色谱数据处理机或按式（１）计算试样中硫线磷残留量：犡＝犃·犮ｓ·犞犃ｓ·犿……………………………（１）　　式中：犡———试样中硫线磷残留量，单位为毫克每千克（ｍｇ／ｋｇ）；犃———样液中硫线磷的峰面积；犮ｓ———标准工作液中硫线磷的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；犞———样液最终定容体积，单位为毫升（ｍＬ）；犃ｓ———标准工作液中硫线磷的峰面积；犿———最终样液所代表的试样质量，单位为克（ｇ）。注：计算结果应扣除空白值。８　测定低限和回收率８．１　测定低限本标准对桃、苹果、芦笋、大葱、土豆、玉米、荞麦、虾仁和兔肉的测定低限为０．００５ｍｇ／ｋｇ；茶叶、食醋、蜂蜜、核桃仁和鸡肝的测定低限为０．０１ｍｇ／ｋｇ。８．２　回收率方法回收率见表２。表２　检测低限及回收率范围样品名称添加浓度范围／（ｍｇ／ｋｇ）回收率范围／％桃０．００５～０．０２０８９．９～１０４．０苹果０．００５～０．０２０８４．８～１０７．０芦笋０．００５～０．０２０８９．６～１０２．０大葱０．００５～０．０２０８７．０～９８．１土豆０．００５～０．０２０８７．８～９２．５玉米０．００５～０．０２０９２．８～１０５．０荞麦０．００５～０．０２０９３．８～１０３．６茶叶０．０１～０．０５０９３．０～９９．０４犛犖／犜２１４７—２００８表２（续）样品名称添加浓度范围／（ｍｇ／ｋｇ）回收率范围／％蜂蜜０．０１～０．０５０９３．０～９９．０食醋０．０１～０．０５０９０．０～１０４．０核桃仁０．０１～０．０５０８４．３～１０５．０兔肉０．００５～０．０２０９３．５～１１０．０鸡肝０．０１～０．０５０９０．７～９９．０虾仁０．００５～０．０２０９２．５～９８．０５犛犖／犜２１４７—２００８附　录　犃（资料性附录）硫线磷标准物质气相色谱图图犃．１　硫线磷标准物质气相色谱图６犛犖／犜２１４７—２００８附　录　犅（资料性附录）硫线磷标准物质气相色谱质谱图图犅．１　硫线磷标准物质（１．０μ犵／犿犔）气相色谱质谱选择离子色谱图图犅．２　硫线磷标准物质质谱图７犛犖／犜２１４７—２００８犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犃犪狀犱犃狀狀犲狓犅狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狀犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲狅犳狋犺犲犖犪狋犻狅狀犪犾犚犲犵狌犾犪狋犻狅狀犆狅犿犿犻狊狊犻狅狀犳狅狉犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犛犺犪狀狓犻犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌，犑犻犾犻狀犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌，犎狌狀犪狀犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌．犜犺犻狊犿犪犻狀犱狉犪犳狋犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲：犡狌犲犘犻狀犵，犔犻犪狀犌犲狀犵狔犻狀，犠犪狀犵犕犻狀犵狋犪犻，犇狌犔犻犼狌狀，犣犺犪狀犵犢犻狀犵，犛狅狀