SNT 2497.8-2010 进出口危险化学品安全试验方法 第8部分腘窝淋巴结试验

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２４９７．８—２０１０进出口危险化学品安全试验方法第８部分：腘窝淋巴结试验犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犱犪狀犵犲狉狅狌狊犮犺犲犿犻犮犪犾狊—犘犪狉狋８：犘狅狆犾犻狋犲犪犾犾狔犿狆犺狀狅犱犲犪狊狊犪狔２０１００３０２发布２０１００９１６实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言　　ＳＮ／Ｔ２４９７《进出口危险化学品安全试验方法》系列标准共分为２９部分：———第１部分：体内哺乳动物肝细胞程序外ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验；———第２部分：空斑形成细胞（ＰＦＣ）试验；———第３部分：大型溞繁殖试验；———第４部分：酿酒酵母有丝分裂重组试验；———第５部分：睾丸细胞ＵＤＳ试验；———第６部分：哺乳类动物细胞姐妹染色单体互换体外试验；———第７部分：小鼠耳肿胀试验；———第８部分：腘窝淋巴结试验；———第９部分：血清溶血素测定试验；———第１０部分：Ｔ淋巴细胞增殖功能测定试验；———第１１部分：种系突变试验；———第１２部分：单细胞凝胶电泳分析试验；———第１３部分：荧光原位杂交试验；———第１４部分：ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳试验；———第１５部分：ＰＣＲＳＳＣＰ实验；———第１６部分：ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ实验；———第１７部分：哺乳动物行为毒理学试验；———第１８部分：ＤＮＡ加合物的检测方法；———第１９部分：ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ实验；———第２０部分：Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测定蛋白质含量；———第２１部分：琼脂糖凝胶电泳试验；———第２２部分：ＤＮＡ的Ｔｍ值测定方法；———第２３部分：细胞器的分离实验方法；———第２４部分：细胞免疫功能体外检测方法；———第２５部分：体液免疫功能试验；———第２６部分：巨噬细胞功能试验；———第２７部分：流式细胞术检测凋亡；———第２８部分：穿梭质粒在突变检验中的应用；———第２９部分：生化需氧量（ＢＯＤ）测定。本部分为ＳＮ／Ｔ２４９７的第８部分。本部分修改采用《毒理学实验方法与技术》中的免疫毒理学研究方法，其有关技术内容与上述方法完全一致，在标准文本格式上按ＧＢ／Ｔ１．１—２０００做了编辑性修改。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局。本部分主要起草人：李宁涛、王利兵、于艳军、赵琢、张园、李学洋。本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２４９７．８—２０１０进出口危险化学品安全试验方法第８部分：腘窝淋巴结试验１　范围ＳＮ／Ｔ２４９７的本部分规定了进出口危险化学品安全试验中腘窝淋巴结试验的试验原理、试验方法和试验结果。本部分适用于进出口危险化学品安全试验中的腘窝淋巴结试验。２　规范性引用文件　　下列文件中的条款通过ＳＮ／Ｔ２４９７的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。　　ＧＢ１４９２４．１　实验动物　配合饲料通用质量标准３　试验原理将引起超敏反应或自身免疫反应的化学物注射小鼠足跖部皮下，引起腘窝淋巴结内Ｔ、Ｂ细胞增殖而使淋巴结肿大，重量增加和细胞数改变。４　试验方法４．１　试验动物选取（６～８）周龄小鼠，体重（１８～２２）ｇ。实验动物和动物试验的环境设施应符合ＧＢ１４９２４．１的相关要求。４．２　试验耗材微量注射器、２４孔培养板、血细胞记数板、天平、显微镜。４．３　受试物将待测样品配成适当浓度，不至于产生细胞毒作用，一般＜１０ｍｇ／ｋｇ。４．４　试验步骤４．４．１　致敏将受试物溶液于小鼠右侧后肢足跖部从足跟向足尖方向皮下注射１０μＬ，同时左后肢足跖部皮下注射１０μＬ溶剂作为对照。４．４．２　处死连续注射７ｄ后，处死小鼠，分别取其双侧后肢腘窝淋巴结（ＰＬＮ），去除周围结缔组织及脂肪称重。４．４．３　细胞计数将腘窝淋巴结放在盛有１ｍＬ／孔生理盐水的２４孔板内，并制成单个细胞悬液，计数细胞数。５　试验结果———观察终点为ＰＬＮ重量指数及ＰＬＮ细胞指数。———ＰＬＮ重量指数＝试验侧ＰＬＮ重量／对照侧ＰＬＮ重量。———ＰＬＮ细胞指数＝试验侧ＰＬＮ细胞数／对照侧ＰＬＮ细胞数。１犛犖／犜２４９７．８—２０１０书书书０１０２—８．７９４２犜／犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行　业　标　准进出口危险化学品安全试验方法第８部分：腘窝淋巴结试验ＳＮ／Ｔ２４９７．８—２０１０中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街１６号邮政编码：１０００４５网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ电话：６８５２３９４６　６８５１７５４８中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本８８０×１２３０１／１６　印张０．５　字数４千字２０１０年５月第一版　２０１０年５月第一次印刷印数１—１６００书号：１５５０６６·２２０９２８　定价１４．００元